本研究旨在建立一種快速、敏感和高特異性檢測鴨坦布蘇病毒（DTMUV）、鴨腸炎病毒（DEV）和番鴨細(xì)小病毒（MDPV）的TaqMan三重實(shí)時熒光定量PCR（q-PCR）的診斷方法并應(yīng)用于臨床疑似樣品檢測。根據(jù)DTMUV的E基因、DEV的UL2基因和MDPV的VP3基因保守區(qū)域,分別設(shè)計(jì)合成了3對特異性引物和探針,在建立單重q-PCR方法的基礎(chǔ)上建立了三重q-PCR方法。運(yùn)用三重q-PCR方法對198份來自江蘇和安徽的鴨組織疑似病料進(jìn)行檢測,結(jié)果表明,建立的TaqMan三重q-PCR可同時檢測這3種病毒,檢測靈敏度至少達(dá)100個拷貝,相關(guān)系數(shù)（R²）均在0.99以上,擴(kuò)增效率為90%～110%。同時,該方法對H9亞型禽流感病毒（H9N2 AIV）、鴨甲肝病毒Ⅰ型（DHAV-1）、番鴨呼腸孤病毒（MDRV）、鴨呼腸孤病毒（DRV）、新城疫病毒（NDV）、鵝細(xì)小病毒（GPV）的檢測均為陰性,表明該方法具備特異性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好和快速等優(yōu)點(diǎn)。與常規(guī)PCR檢測方法相比,三重q-PCR方法靈敏度大約高100倍。臨床疑似樣品檢測結(jié)果表明DTMUV的檢出率最高,3種病毒混合感... 

【文章來源】：江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2020,36(03)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

建立的DEV單重?zé)晒舛繖z測方法及多重?zé)晒舛繖z測方法擴(kuò)增曲線及標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖1 建立的DEV單重?zé)晒舛繖z測方法及多重?zé)晒舛繖z測方法擴(kuò)增曲線及標(biāo)準(zhǔn)曲線圖3 建立的MDPV單重?zé)晒舛繖z測方法及多重?zé)晒舛繖z測方法擴(kuò)增曲線及標(biāo)準(zhǔn)曲線

建立的MDPV單重?zé)晒舛繖z測方法及多重?zé)晒舛繖z測方法擴(kuò)增曲線及標(biāo)準(zhǔn)曲線

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3269582