本研究旨在建立一種快速、敏感和高特異性檢測(cè)鴨坦布蘇病毒（DTMUV）、鴨腸炎病毒（DEV）和番鴨細(xì)小病毒（MDPV）的TaqMan三重實(shí)時(shí)熒光定量PCR（q-PCR）的診斷方法并應(yīng)用于臨床疑似樣品檢測(cè)。根據(jù)DTMUV的E基因、DEV的UL2基因和MDPV的VP3基因保守區(qū)域,分別設(shè)計(jì)合成了3對(duì)特異性引物和探針,在建立單重q-PCR方法的基礎(chǔ)上建立了三重q-PCR方法。運(yùn)用三重q-PCR方法對(duì)198份來(lái)自江蘇和安徽的鴨組織疑似病料進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果表明,建立的TaqMan三重q-PCR可同時(shí)檢測(cè)這3種病毒,檢測(cè)靈敏度至少達(dá)100個(gè)拷貝,相關(guān)系數(shù)（R²）均在0.99以上,擴(kuò)增效率為90%～110%。同時(shí),該方法對(duì)H9亞型禽流感病毒（H9N2 AIV）、鴨甲肝病毒Ⅰ型（DHAV-1）、番鴨呼腸孤病毒（MDRV）、鴨呼腸孤病毒（DRV）、新城疫病毒（NDV）、鵝細(xì)小病毒（GPV）的檢測(cè)均為陰性,表明該方法具備特異性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好和快速等優(yōu)點(diǎn)。與常規(guī)PCR檢測(cè)方法相比,三重q-PCR方法靈敏度大約高100倍。臨床疑似樣品檢測(cè)結(jié)果表明DTMUV的檢出率最高,3種病毒混合感... 

【文章來(lái)源】：江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2020,36(03)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

建立的DEV單重?zé)晒舛繖z測(cè)方法及多重?zé)晒舛繖z測(cè)方法擴(kuò)增曲線及標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖1 建立的DEV單重?zé)晒舛繖z測(cè)方法及多重?zé)晒舛繖z測(cè)方法擴(kuò)增曲線及標(biāo)準(zhǔn)曲線圖3 建立的MDPV單重?zé)晒舛繖z測(cè)方法及多重?zé)晒舛繖z測(cè)方法擴(kuò)增曲線及標(biāo)準(zhǔn)曲線

建立的MDPV單重?zé)晒舛繖z測(cè)方法及多重?zé)晒舛繖z測(cè)方法擴(kuò)增曲線及標(biāo)準(zhǔn)曲線

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]山東省鴨類感染豬圓環(huán)病毒3型的初步調(diào)查[J]. 劉玉偉,辛長(zhǎng)勛,王碩,高梅,鄭書(shū)軒,時(shí)建立,彭喆,吳曉燕,王金寶,李俊.  山東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(05)
[2]廣西雞源H9N2亞型禽流感病毒分離鑒定及遺傳進(jìn)化分析[J]. 張艷雯,何永權(quán),吳云月,于冬玲,曾文榜,寧志鵬.  南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2018(04)
[3]鴨源H9N2亞型禽流感病毒RT-PCR檢測(cè)方法的建立[J]. 王永娟,董亞青,郭方超,左偉勇,孟婷.  江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(01)
[4]鴨瘟強(qiáng)毒人工感染雛鴨的顯微和超微病理學(xué)變化[J]. 劉忠偉,楊穎,江楠,羅樂(lè),文明.  江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(16)
[5]應(yīng)用二重實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR鑒別坦布蘇病毒與產(chǎn)蛋下降綜合征病毒[J]. 曾婷婷,謝芝勛,謝麗基,鄧顯文,謝志勤,羅思思,劉加波,黃莉,黃嬌玲.  中國(guó)家禽. 2015(01)
[6]鴨坦布蘇病毒和鴨瘟病毒二重?zé)晒舛縍T-PCR方法的建立[J]. 張艷芳,謝芝勛,謝麗基,劉加波,范晴,龐耀珊,羅思思,鄧顯文,謝志勤.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2014(03)
[7]新型黃病毒在種鵝中垂直傳播的研究[J]. 趙冬敏,黃欣梅,劉宇卓,張敬峰,李銀.  南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2012(01)
[8]間接免疫熒光染色檢測(cè)石蠟切片中的鴨病毒性腸炎病毒和抗原定位[J]. 程安春,韓曉英,朱德康,汪銘書(shū),袁桂萍,廖永洪,徐超.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2008(08)
[9]番鴨細(xì)小病毒與鵝細(xì)小病毒PCR鑒別診斷方法的建立[J]. 劉家森,姜騫,司昌德,甘一迪,韓凌霞,曲連東.  中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2007(06)



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