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一株塞內(nèi)卡病毒的分離與鑒定

發(fā)布時間:2021-07-04 03:32
  2018年11月,河南南陽地區(qū)某養(yǎng)殖場發(fā)生了豬水皰病,經(jīng)實驗室檢測確診為塞內(nèi)卡病毒(SVV)感染。選擇SVV檢測陽性的臨床樣品,處理后接種PK-15細(xì)胞,經(jīng)多次傳代培養(yǎng),成功分離到1株塞內(nèi)卡病毒,命名為HeNNY-1/2018株,并在PK-15細(xì)胞上對該毒株進行了空斑純化和生長曲線的繪制。為進一步研究其遺傳進化特點,采用RT-PCR技術(shù)擴增了其全基因組序列,并分別構(gòu)建了基于VP1基因和全基因組的系統(tǒng)進化樹。結(jié)果表明,分離株HeNNY-1/2018在感染后第24小時病毒效價最高為107.6TCID50/m L;蚪M核苷酸同源性分析顯示,分離株HeNNY-1/2018與我國廣西分離毒株GXHZH-1和美國毒株KS15-01呈現(xiàn)較高的核苷酸同源性,分別為98.0%和98.7%。進一步分子進化樹分析顯示,該毒株與2018年報道的廣西地區(qū)的毒株處于較近的進化分支,而與我國早年間分離得到的其他毒株親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。本研究為河南地區(qū)塞內(nèi)卡病毒流行狀況提供了新的證據(jù),也為下一步研究該病的診斷和防控提供了有力支撐。 

【文章來源】:中國獸醫(yī)科學(xué). 2020,50(09)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:7 頁

【部分圖文】:

一株塞內(nèi)卡病毒的分離與鑒定


臨床樣品的病原檢測

序列,毒株,熒光,細(xì)胞


使用已發(fā)表的用于全基因組擴增的引物進行擴增,成功獲得了7條目的條帶,條帶大小基本與預(yù)期相符(見圖5)。經(jīng)克隆測序后,拼接得到HeNNY-1/2018毒株的全基因組序列信息,全長共7 285 bp,其中1~668 bp為5′-UTR區(qū),7 215~7 285 bp為3′-UTR區(qū),中間部分為ORF區(qū),詳細(xì)數(shù)據(jù)已提交至GenBank數(shù)據(jù)庫(登錄號MK357116)。圖3 病毒空斑

生長曲線,病毒,毒株,生長曲線


病毒空斑

【參考文獻】:
期刊論文
[1]健康豬體內(nèi)塞尼卡病毒的分離和鑒定[J]. 張志,張麗麗,張美晶,劉爽,張峰,董雅琴,張慧,崔進,吳發(fā)興,李曉成.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2019(04)
[2]塞內(nèi)卡谷病毒熒光RT-RPA快速檢測方法的建立[J]. 林彥星,曹琛福,花群俊,黃超華,楊俊興,徐錚,史衛(wèi)軍,阮周曦,花群義.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2018(12)
[3]豬塞尼卡谷病毒病現(xiàn)狀與未來防控思考[J]. 樊曉旭,遲田英,吳曉東,王志亮.  中國動物檢疫. 2018(02)



本文編號:3263943

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