當(dāng)歸補(bǔ)血湯（DBT）是中醫(yī)藥經(jīng)典方劑之一,具有一定的補(bǔ)氣補(bǔ)血和免疫增強(qiáng)等功效。但DBT在獸醫(yī)臨床應(yīng)用較少,且效果不明確,尤其對(duì)DBT中藥發(fā)酵產(chǎn)物作為飼料添加劑研究尚處空白。本論文擬開展枯草芽孢桿菌（B.subtilis）發(fā)酵DBT的工藝研究,利用高效液相色譜（HPLC）法測定DBT發(fā)酵前、后相關(guān)活性成分含量變化,明確DBT發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)肉雞生長、免疫、抗氧化性能和小腸絨毛形態(tài)的影響,以及對(duì)SD大鼠腸道菌群多樣性的調(diào)控作用,旨在為DBT發(fā)酵產(chǎn)物作為新型飼料添加劑提供理論依據(jù)。1.B.subtilis發(fā)酵DBT的工藝參數(shù)優(yōu)化。采用單因素和Box-Behnken中心組合試驗(yàn)考察了發(fā)酵培養(yǎng)基組分、菌液接種量和發(fā)酵時(shí)間對(duì)多糖提取率的影響。最終確定最佳發(fā)酵工藝條件為葡萄糖添加量0.95%,蛋白胨添加量1.52%,接種量2.92%,發(fā)酵時(shí)間35.8 h。該條件下多糖提取率達(dá)到9.23±0.067%,高于未發(fā)酵組（4.6±0.057%）。2.HPLC法測定DBT發(fā)酵前、后相關(guān)活性成分的含量變化。采用HPLC-DAD法測定阿魏酸和毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量,使用Agilent ZORBAX Eclipse X... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

發(fā)酵菌種生長曲線圖

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第二章響應(yīng)面法優(yōu)化DBT液體發(fā)酵工藝11圖2-1發(fā)酵菌種生長曲線圖Fig.2-1Growthcurveoffermentationbacterias2.4.2發(fā)酵菌種及DBT添加量的篩選結(jié)果圖2-2不同發(fā)酵菌種及DBT添加量對(duì)多糖提取率的影響Fig.2-2EffectofdifferentfermentationstrainsandtheamountofDBTaddedontheextractionrateofpolysaccharide.由圖2-2（a）可知,B.subtilis發(fā)酵DBT的多糖提取率達(dá)到了6.80%，優(yōu)于植物乳桿菌和產(chǎn)朊假絲酵母的發(fā)酵效果。因此，選擇B.subtilis作為以下試驗(yàn)中的發(fā)酵菌種。由圖2-2（b）可知DBT多糖提取率隨DBT添加量的增加呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢，當(dāng)DBT提取率為6%時(shí)最高，為7.00%。因此，選擇6%作為發(fā)酵優(yōu)化中DBT的最佳添加量。

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第二章響應(yīng)面法優(yōu)化DBT液體發(fā)酵工藝122.4.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立利用DNS法測定還原糖，以吸光度為縱坐標(biāo)，葡萄糖濃度(g/L)為橫坐標(biāo)分別繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到y(tǒng)=0.7754x+0.0513，R2=0.9999，線性關(guān)系良好，可用于還原糖含量測定；苯酚硫酸法測定總糖，以吸光度為縱坐標(biāo)，葡萄糖濃度(g/L)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到y(tǒng)=3.8586x+0.0662，R2=0.9987，線性關(guān)系良好，用于總糖含量測定。2.4.4單因素試驗(yàn)由圖2-3(a)、2-3(b)可知，葡萄糖和蛋白胨添加量分別在0.5%~1.0%和0.5%~1.5%之間時(shí)，多糖提取率隨著添加量的增加而增大，在1.0%和1.5%時(shí)達(dá)到最大，多糖提取率分別為7.7%和8.2%，當(dāng)葡萄糖和蛋白胨添加量分別大于1.0%和1.5%時(shí)，隨著添加量的增加，多糖提取率呈現(xiàn)下降趨勢。因此，培養(yǎng)基中葡萄糖和蛋白胨最適添加量分別為1.0%和1.5%。由圖2-3(c)、2-3(d)可知，最適接種量和最佳發(fā)酵時(shí)間分別為3%和36h時(shí)，多糖提取率達(dá)到最大。圖2-3葡萄糖、蛋白胨添加量，接種量及發(fā)酵時(shí)間對(duì)DBT多糖提取率的影響Fig.2-3Effectofglucoseandpeptoneaddition,inoculumvolume,andfermentationtimeontheextractionrateofDBTpolysaccharide

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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[2]益生菌發(fā)酵中藥產(chǎn)抗氧化美白成分[D]. 李瑜.江南大學(xué) 2018
[3]百菌清水解脫氯酶（Chd）的枯草芽孢桿菌分泌表達(dá)、發(fā)酵優(yōu)化及應(yīng)用[D]. 孟超.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
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[5]益生菌發(fā)酵健胃消食片藥渣及其對(duì)脾虛小鼠腸道調(diào)整功能的初步研究[D]. 李祖旭.南昌大學(xué) 2012



本文編號(hào)：3260603