隱孢子蟲（Cryptosporidium）是一種屬于頂復(fù)門原蟲的機(jī)會(huì)性寄生蟲,可以侵入不同哺乳動(dòng)物包括人類的小腸上皮細(xì)胞內(nèi)。隱孢子蟲病可導(dǎo)致劇烈的腸炎而引起水瀉,在免疫缺陷的個(gè)體可導(dǎo)致死亡。隱孢子蟲病是6種世界最常見腹瀉病之一,該病分布廣泛、危害嚴(yán)重。子孢子和裂殖子是隱孢子蟲的侵入時(shí)期,首先通過蟲體頂端的亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)（棒狀體、微線體和致密顆粒）分泌的蛋白選擇性的粘附在腸上皮細(xì)胞表面,使腸上皮細(xì)胞膜發(fā)生內(nèi)陷形成納蟲空泡,從而使蟲體進(jìn)入細(xì)胞膜內(nèi)并包裹在納蟲空泡內(nèi),可以逃避機(jī)體的免疫應(yīng)答反應(yīng)和藥物作用。本實(shí)驗(yàn)為了發(fā)現(xiàn)更多微小隱孢子蟲黏附相關(guān)蛋白,通過結(jié)構(gòu)域檢索確定包含Apple和Ricin B結(jié)構(gòu)域基因,并對(duì)選定的結(jié)構(gòu)域基因進(jìn)行克隆及原核表達(dá),以純化后的GST-Apple和GST-RicinB重組蛋白為免疫原,對(duì)Balb/c小鼠進(jìn)行免疫,將效價(jià)較高的小鼠利用雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體,并用Western blot鑒定其特異性。從而利用制備的高特異性單克隆抗體對(duì)微小隱孢子蟲卵囊中的Apple和Ricin B結(jié)構(gòu)域蛋白進(jìn)行定位。通過條件摸索發(fā)現(xiàn)Apple和Ricin B結(jié)構(gòu)域蛋白均用0.1mmol/... 

【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁(yè)數(shù)】：53 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
英文縮寫
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 微小隱孢子蟲主要粘附蛋白研究進(jìn)展
第二篇 研究?jī)?nèi)容
    第一章 微小隱孢子蟲含Apple、Ricin B結(jié)構(gòu)域基因的原核表達(dá)及純化
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 結(jié)果
        1.4 討論
        1.5 小結(jié)
    第二章 抗微小隱孢子蟲Apple、Ricin B結(jié)構(gòu)域蛋白單克隆抗體的制備
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 結(jié)果
        2.4 討論
        2.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]弓形蟲侵入宿主細(xì)胞的研究進(jìn)展[J]. 李學(xué)瑞,王艷華,趙象忠,張德林.  中國(guó)寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2007(02)
[2]核糖體失活蛋白的研究進(jìn)展[J]. 李建國(guó).  分子植物育種. 2005(04)
[3]隱孢子蟲病免疫學(xué)研究進(jìn)展[J]. 菅復(fù)春,張龍現(xiàn),寧長(zhǎng)申,孫銘飛,閆文朝,邵兆霞.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2005(06)
[4]微小隱孢子蟲子孢子表面抗原CP23融合蛋白在大腸桿菌的表達(dá)[J]. 何宏軒,張西臣,歐陽(yáng)紅生,尹繼剛,李吉平,李建華,楊舉.  中國(guó)人獸共患病雜志. 2003(03)
[5]微小隱孢子蟲CP23基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)[J]. 何宏軒,張西臣,歐陽(yáng)紅生,尹繼剛,李建華.  寄生蟲與醫(yī)學(xué)昆蟲學(xué)報(bào). 2003(01)



本文編號(hào)：3260518