【目的】以MS2噬菌體外殼蛋白為載體,構(gòu)建展示豬繁殖與呼吸綜合征病毒GP5蛋白上線性表位的嵌合納米顆粒,并研究其免疫原性,為豬繁殖與呼吸綜合征病毒或其他病毒表位展示提供新的方法和思路�！痉椒ā坷弥丿B延伸PCR將GP5上優(yōu)勢線性表位基因序列插入到MS2噬菌體外殼蛋白基因上,構(gòu)建重組載體,通過原核表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)嵌合蛋白,目的蛋白經(jīng)過硫酸銨沉淀和凝膠過濾層析純化,用動態(tài)光散射和電鏡對嵌合蛋白進(jìn)行物理表征,通過蛋白印跡和動物免疫試驗(yàn)研究表位嵌合顆粒的免疫原性。【結(jié)果】成功將線性表位基因插入MS2噬菌體外殼蛋白基因,嵌合蛋白在原核表達(dá)系統(tǒng)中以水溶性表達(dá),目的蛋白經(jīng)過純化,純度達(dá)85%以上。嵌合蛋白在體外自組裝形成了均一的、直徑為25～31 nm的嵌合表位納米顆粒,該嵌合顆粒免疫動物后,產(chǎn)生可以和滅活病毒反應(yīng)的高水平抗體,具有良好的免疫原性。【結(jié)論】MS2噬菌體外殼蛋白可以耐受9個(gè)外源多肽（豬繁殖與呼吸綜合征病毒GP5上線性表位）的插入,在體外自組裝形成嵌合病毒樣顆粒。該顆粒將外源多肽高密度展示在表面,免疫動物可產(chǎn)生針對該表位的抗體。該技術(shù)可為豬繁殖與呼吸綜合征病毒其他表位或更長串聯(lián)表位的展示奠定... 

【文章來源】：福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2020,35(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3258146