本文從土壤中分離篩選出能抗大腸桿菌、金黃色葡萄球菌等病原菌的兩株菌種，采用16SrRNA基因分子技術(shù)進行菌種鑒定，并應(yīng)用體外法評價其作為益生菌的效果。研究分離的兩株菌種在斷奶仔豬的作用效果和對仔豬腸道內(nèi)微生物的影響；以犢牛為試驗動物，研究分離兩株菌種對斷奶前后犢牛的生長性能和瘤胃發(fā)酵及微生物區(qū)系變化的影響。圍繞益生菌的篩選和對幼齡動物的作用影響，完成6個試驗，主要內(nèi)容如下：試驗一、乳酸菌GF103的分離鑒定及體外益生效果評價從北京市大興種豬場附近土壤中分離得到一株能抑制病原菌大腸桿菌和金黃色葡萄球菌生長的乳酸菌GF103，經(jīng)16S rRNA基因序列分析鑒定為植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum），GenBank登錄號為JN560899。體外益生效果評價表明，乳酸菌GF103在pH=3的條件下活菌數(shù)較高，能夠耐受0.3%膽鹽。乳酸菌GF103在人工模擬胃液中培養(yǎng)0.5h活菌數(shù)不受影響，培養(yǎng)3h活菌數(shù)降低1log值；在人工模擬腸液中培養(yǎng)3h活菌數(shù)不變。結(jié)果表明，乳酸菌GF103具備益生菌特性，可進一步研究其作為微生物添加劑在動物營養(yǎng)和日糧中的應(yīng)用效果。試驗二、枯草芽孢... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：106 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

‐1益生菌的篩選程序Fig.1-1Theprocedureofisolationprobiotics

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院博士學(xué)位論文 第一章 緒論1.6.3 技術(shù)路線本課題通過對養(yǎng)殖場周圍土壤中分離乳酸菌和芽孢桿菌，通過牛津杯抑菌試驗法篩選出一乳酸菌和一株芽孢桿菌，利用體外法初步確定其具備益生菌的潛質(zhì)。通過益生菌對斷奶仔豬和牛的飼喂試驗，研究益生菌對幼齡動物斷奶應(yīng)激的作用影響。分析益生菌對幼齡動物的胃腸道生物區(qū)系的影響，初步研究其作用機制。試驗實施技術(shù)路線如圖 1-2：

的配制(Huang et al., 2004)：9.5%～10.5%的鹽酸 16.4 mL，加L 溶液中加入 1.0 g 胃蛋白酶，混勻，用 0.2 μm 無菌濾膜過濾。的配制(Huang et al., 2004)：稱取磷酸二氫鉀 6.8 g，加水 500 mL pH 值至 6.8，加水稀釋至 1 000 mL，每 100 mL 液體中加入 1.0 濾膜過濾。 培養(yǎng)液分別接種于人工胃液或人工腸液中，37 ℃，140 r/min 搖in 進行活菌平板計數(shù)。析均為 3 個重復(fù)的平均值，數(shù)據(jù)經(jīng) Microsoft Excel 初步處理后，利行分析，差異顯著性用 DUNCAN 法進行多重比較。分析的分離篩選原菌試驗，篩選出一株能夠抑制大腸桿菌(E. coli)和金黃色葡萄菌 GF103 (如圖 2-1)。

【參考文獻】：
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碩士論文
[1]地衣芽孢桿菌及其復(fù)合菌對后備牛生長性能和瘤胃內(nèi)環(huán)境的影響[D]. 符運勤.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2012
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本文編號：3252207