豬流行性腹瀉（Porcine epidemic diarrhea,PED）是由豬流行性腹瀉病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）引起的一種以仔豬水樣腹瀉、嘔吐、脫水和高死亡率為主要特征的高度接觸性傳染病。該病首先在歐洲出現(xiàn)地區(qū)性暴發(fā),2000年后在亞洲流行嚴重,給全球養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的損失。由于PEDV毒株變異迅速,研究對PEDV具有抑制作用的天然活性化合物對于了解病毒感染致病機制以及防控PED具有重要意義。本研究通過RT-PCR、空斑形成試驗、Western Blot和MTT試驗等方法探究黃腐酚是否對PEDV感染具有抑制作用,并驗證其作用效果。結(jié)果顯示,黃腐酚能夠明顯抑制PEDV感染Vero-E6細胞中病毒M基因mRNA水平,顯著降低細胞內(nèi)和上清中病毒粒子的產(chǎn)生;黃腐酚對Vero-E6細胞幾乎無毒性,抑制PEDV呈劑量依賴性且半數(shù)有效濃度為3.865μM;黃腐酚處理能明顯降低PEDV不同毒株（如CV777和SQ2014毒株）感染細胞中N蛋白表達水平。本研究為進一步探究黃腐酚抗PEDV感染機制,研制抗PEDV或廣譜抗冠狀病毒藥物奠定了基礎。 

【文章來源】：病毒學報. 2020,36(05)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

黃腐酚抑制豬流行性腹瀉病毒（PEDV）感染

PEDV屬于α-冠狀病毒屬，能引起不同成長階段和不同品種豬的水樣腹瀉、脫水以及嘔吐，在仔豬群體中引起極高的死亡率。因此，PED對養(yǎng)殖場的影響極大，也給各國經(jīng)濟帶來不小的損失。隨著PEDV強毒株的不斷出現(xiàn)，早期研制的疫苗已不足以控制和預防PED的傳播[14]，且目前養(yǎng)殖場內(nèi)尚無能夠明顯改善PED癥狀和抑制PEDV的藥物，因此，開發(fā)抗病毒藥物具有重要的意義。目前一些抗病毒藥物以及天然化合物已被報道具有抑制PEDV的作用，如利巴韋林，一種廣譜抗病毒藥物，目前已被證明具有抑制PEDV的潛力[15]；從紅藻中提取的格瑞弗森（Griffithsin）對PEDV具有抑制作用[16]；抗菌肽Caerin1.1通過與PEDV直接結(jié)合抑制病毒的體外增殖[17]。本研究中，經(jīng)驗證發(fā)現(xiàn)，黃腐酚對PEDV具有較好的抑制效果，且對Vero-E6細胞幾乎無毒性。圖3 黃腐酚對CV777毒株和SQ2014毒株的抑制作用

圖2 黃腐酚半數(shù)細胞毒性濃度（CC50）和半數(shù)有效濃度（EC50）值黃腐酚是僅存于酒花中的異戊二烯基黃酮（圖4），是酒花中重要的黃酮類物質(zhì)之一，僅占酒花干重的0.1%～1%[18]。黃腐酚生物活性顯著，目前已有部分研究表明，黃腐酚在體外通過激活Nrf2-HMOX1通路抑制豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）的增殖并抑制PRRSV誘導的的氧化應激[19]，臨床試驗中能減輕PRRSV引起的臨床癥狀和炎癥反應[20]。另外，黃腐酚對丙型肝炎病毒（Hepatitis C virus,HCV）具有一定的抑制作用：一方面，黃腐酚對HCV的替代模型牛病毒性腹瀉病毒（Bovine viral diarrhea virus,BVDV）有抑制作用[21,22]；另一方面，黃腐酚主要通過抑制氧化反應和調(diào)節(jié)細胞的凋亡來改善HCV誘導的肝炎癥狀、脂肪變性和纖維化[23,24]，但尚無關于黃腐酚抑制PEDV感染的研究。本研究為后續(xù)研究黃腐酚抑制PEDV的作用機制以及探究其是否具有廣譜抗冠狀病毒的效果奠定了基礎。


本文編號：3249890