鴨疫里氏桿菌06537/06542基因缺失株的構(gòu)建及其生物學(xué)特性研究
發(fā)布時(shí)間：2021-06-20 21:01
鴨疫里氏桿菌（Riemerella anatipestifer,RA）感染是當(dāng)前危害全球養(yǎng)鴨業(yè)的重要傳染病之一。目前發(fā)現(xiàn)RA至少有21種血清型。但即使是在同一種血清型中,不同來(lái)源菌株之間的毒力也存在較大差異。一旦鴨疫里氏桿菌感染鴨群,它可以造成該病的廣泛流行且徹底根除十分困難,而且存在反復(fù)感染發(fā)作的可能性,所以我們急需要一種安全有效的疫苗以預(yù)防該病。而目前有關(guān)鴨疫里氏桿菌感染的分子致病機(jī)理及免疫機(jī)制的研究報(bào)道較少。運(yùn)用分子生物學(xué)的方法深入研究鴨疫里氏桿菌感染的分子致病機(jī)理及免疫機(jī)制來(lái)預(yù)防該病的發(fā)生是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。本研究以鴨疫里氏桿菌血清1型云夢(mèng)株（RA-YM）為親本株,選取了其中一對(duì)雙組份調(diào)控系統(tǒng)06537/06542為研究對(duì)象,通過(guò)構(gòu)建重組自殺性質(zhì)粒,采用接合轉(zhuǎn)移方法構(gòu)建了RA-YM株的06537/06542基因缺失株,對(duì)該基因缺失株的生物學(xué)特性進(jìn)行了研究,并比較了其與RA-YM親本株對(duì)雛鴨的致病性。取得的主要研究結(jié)果如下:1構(gòu)建了RA-YM 06537/06542基因缺失株根據(jù)RA-YM株06537/06542基因的序列,通過(guò)重組自殺性質(zhì)粒p RE112-LSR,利用接合轉(zhuǎn)移同源...
【文章來(lái)源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】：63 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
pMD18-T質(zhì)粒圖譜
cript II SK（+），自殺性質(zhì)粒 pRE112（圖 3-2）及宿主菌 保存。觀霉素抗性（SpcR）基因 pIC333 質(zhì)粒由本實(shí)驗(yàn)室保存。體的結(jié)構(gòu)示意圖如下：圖 3-1:pMD18-T 質(zhì)粒圖譜Fig.3-1:Restriction map of pMD18-T
結(jié)構(gòu) RNA 聚合酶發(fā)生相互作用。而在 373bp-462bp 的位置上還有蛋白甘露糖基轉(zhuǎn)移酶結(jié)構(gòu)域。從中可以看出，06542 基因符合反應(yīng)調(diào)控因子 RR 一般結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。通過(guò)生物信息學(xué)分析，發(fā)現(xiàn) 06537/06542 是一對(duì)分別具有 BaeS 和 OmpR 保守性區(qū)域的雙組份調(diào)控系統(tǒng)。已有的研究報(bào)道發(fā)現(xiàn) BaeS 通常與 BaeR 組成一對(duì)雙組份調(diào)控系統(tǒng)，而 OmpR 則通常與 EnvZ 組成一對(duì)雙組份調(diào)控系統(tǒng)，BaeS 和 OmpR 這種組合的雙組份系統(tǒng)當(dāng)前尚無(wú)研究報(bào)道。而且，06537 基因的 BaeS 保守性區(qū)域前還具有一個(gè)與細(xì)菌 SNF2 解旋酶相關(guān)的結(jié)構(gòu)域，這種 SNF2_assoc-HisKA-HATPase_c 的HK 結(jié)構(gòu)域組合當(dāng)前也未被報(bào)道過(guò)（附錄圖 3）。因此，這種新的 HK 結(jié)構(gòu)域組合和新的 TCS 組合對(duì)鴨疫里氏桿菌生物學(xué)特性和致病性的影響也是后續(xù)研究的重點(diǎn)。運(yùn)用TMHMM 軟件對(duì)RAYM_06537和RAYM_06542的跨膜螺旋區(qū)域進(jìn)行分析（圖 4-1A，圖 4-1B），結(jié)果發(fā)現(xiàn) RAYM_06537 有兩個(gè)跨膜區(qū)，其中第 1-4 氨基酸位于細(xì)胞膜內(nèi)，第 5-27 氨基酸為跨膜螺旋區(qū)，第 28-258 氨基酸在細(xì)胞膜外，第259-281 氨基酸為第二個(gè)跨膜螺旋區(qū)，第 282-514 氨基酸在細(xì)胞膜內(nèi)；RAYM_06542上無(wú)跨膜區(qū)。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]鴨傳染性漿膜炎的診治[J]. 朱二勇,殷麗霞,王曉春,趙慶遠(yuǎn),鄭楊,劉翠娥,王本玲. 當(dāng)代畜禽養(yǎng)殖業(yè). 2015(02)
[2]鴨疫里默氏桿菌的GAPDH同源體:一種有生物活性的胞外蛋白（英文）[J]. Ji-ye GAO,Cui-lian YE,Li-li ZHU,Zhi-ying TIAN,Zhi-bang YANG. Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2014(09)
[3]假單胞菌碳代謝抑制調(diào)控系統(tǒng)各組分的功能及作用機(jī)制[J]. 弓湃,尚立國(guó),戰(zhàn)崳華,燕永亮,林敏. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào). 2014(02)
[4]鴨疫里默氏桿菌強(qiáng)、弱菌株外膜蛋白的比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究[J]. 劉燕,韋強(qiáng),鮑國(guó)連,季權(quán)安. 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2008(06)
[5]鴨疫里默氏桿菌外膜蛋白生物學(xué)特性研究[J]. 劉燕,韋強(qiáng),鮑國(guó)連,季權(quán)安. 生物工程學(xué)報(bào). 2008(04)
[6]鴨疫里默氏菌的gyrA基因的檢測(cè)與變異位點(diǎn)的分析[J]. 劉穎,蘇敬良,劉文華. 中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2007(01)
[7]鴨疫里默氏菌一個(gè)可能新型的鑒定[J]. 張大丙,鄭獻(xiàn)進(jìn),曲豐發(fā). 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2006(01)
[8]鴨疫里默氏菌16SrDNA基因的PCR-RFLP分析[J]. 曲豐發(fā),張大丙,鄭獻(xiàn)進(jìn),郭玉璞. 中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2005(10)
[9]間接免疫組化法檢測(cè)鴨疫里默氏桿菌感染和抗原定位[J]. 劉維平,程安春,汪銘書(shū),陳孝躍,周毅,朱德康,劉菲,孟瓊?cè)A,黃誠(chéng),宋涌. 中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2005(04)
[10]PCR法快速檢測(cè)鴨疫里氏桿菌的研究[J]. 楊建遠(yuǎn),鄧舜洲,何后軍. 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2005(03)
博士論文
[1]A群鏈球菌CovRS雙組份系統(tǒng)致病機(jī)制研究[D]. 李錦銓.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[2]雙組分調(diào)控系統(tǒng)1910HK/RR調(diào)控豬鏈球菌2型致病性研究[D]. 袁芳艷.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[3]谷氨酰胺合成酶GlnA及其轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子GlnR對(duì)2型豬鏈球菌致病力影響的研究[D]. 司有輝.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[4]鴨疫里氏桿菌免疫診斷方法及在感染鴨肝臟差異表達(dá)基因的研究[D]. 周祖濤.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[5]鴨疫里默氏桿菌致病相關(guān)因子研究[D]. 李繼祥.西南大學(xué) 2009
[6]二元信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)SalK/SalR調(diào)控高致病性2型豬鏈球菌毒力的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 李明.第三軍醫(yī)大學(xué) 2008
碩士論文
[1]豬鏈球菌2型雙組分信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)NisKR和BceRS對(duì)毒力調(diào)控的研究[D]. 徐娟.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]豬鏈球菌2型雙組份調(diào)控系統(tǒng)CiaRH調(diào)控基因SSU052036和SSU052039的功能研究[D]. 賈志平.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[3]胸膜肺炎放線桿菌CpxA/R雙組份調(diào)控系統(tǒng)基因缺失突變株構(gòu)建及生物學(xué)特性研究[D]. 承慧.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[4]胸膜肺炎放線桿菌雙組份調(diào)控系統(tǒng)QseB/QseC突變株構(gòu)建功能研究[D]. 胡琳琳.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[5]鴨疫里氏桿菌野生型質(zhì)粒的分離、序列分析和DPP Ⅳ缺失株的構(gòu)建[D]. 彭曉婭.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[6]鴨疫里默氏桿菌特異性單克隆抗體的研制以及生物被膜和OmpA缺失株的研究[D]. 周小進(jìn).揚(yáng)州大學(xué) 2010
[7]鴨疫里默氏桿菌1型磷酸二酯酶基因的發(fā)現(xiàn)及其克隆表達(dá)和應(yīng)用研究[D]. 陳虹.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[8]鴨疫里氏桿菌體內(nèi)誘導(dǎo)抗原基因的篩選與應(yīng)用研究[D]. 陳芬芬.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[9]利用SCOTS技術(shù)篩選鴨疫里氏桿菌體內(nèi)外差異表達(dá)的基因[D]. 鄭娟.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
本文編號(hào)：3239925
【文章來(lái)源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】：63 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
pMD18-T質(zhì)粒圖譜
cript II SK（+），自殺性質(zhì)粒 pRE112（圖 3-2）及宿主菌 保存。觀霉素抗性（SpcR）基因 pIC333 質(zhì)粒由本實(shí)驗(yàn)室保存。體的結(jié)構(gòu)示意圖如下：圖 3-1:pMD18-T 質(zhì)粒圖譜Fig.3-1:Restriction map of pMD18-T
結(jié)構(gòu) RNA 聚合酶發(fā)生相互作用。而在 373bp-462bp 的位置上還有蛋白甘露糖基轉(zhuǎn)移酶結(jié)構(gòu)域。從中可以看出，06542 基因符合反應(yīng)調(diào)控因子 RR 一般結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。通過(guò)生物信息學(xué)分析，發(fā)現(xiàn) 06537/06542 是一對(duì)分別具有 BaeS 和 OmpR 保守性區(qū)域的雙組份調(diào)控系統(tǒng)。已有的研究報(bào)道發(fā)現(xiàn) BaeS 通常與 BaeR 組成一對(duì)雙組份調(diào)控系統(tǒng)，而 OmpR 則通常與 EnvZ 組成一對(duì)雙組份調(diào)控系統(tǒng)，BaeS 和 OmpR 這種組合的雙組份系統(tǒng)當(dāng)前尚無(wú)研究報(bào)道。而且，06537 基因的 BaeS 保守性區(qū)域前還具有一個(gè)與細(xì)菌 SNF2 解旋酶相關(guān)的結(jié)構(gòu)域，這種 SNF2_assoc-HisKA-HATPase_c 的HK 結(jié)構(gòu)域組合當(dāng)前也未被報(bào)道過(guò)（附錄圖 3）。因此，這種新的 HK 結(jié)構(gòu)域組合和新的 TCS 組合對(duì)鴨疫里氏桿菌生物學(xué)特性和致病性的影響也是后續(xù)研究的重點(diǎn)。運(yùn)用TMHMM 軟件對(duì)RAYM_06537和RAYM_06542的跨膜螺旋區(qū)域進(jìn)行分析（圖 4-1A，圖 4-1B），結(jié)果發(fā)現(xiàn) RAYM_06537 有兩個(gè)跨膜區(qū)，其中第 1-4 氨基酸位于細(xì)胞膜內(nèi)，第 5-27 氨基酸為跨膜螺旋區(qū)，第 28-258 氨基酸在細(xì)胞膜外，第259-281 氨基酸為第二個(gè)跨膜螺旋區(qū)，第 282-514 氨基酸在細(xì)胞膜內(nèi)；RAYM_06542上無(wú)跨膜區(qū)。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]鴨傳染性漿膜炎的診治[J]. 朱二勇,殷麗霞,王曉春,趙慶遠(yuǎn),鄭楊,劉翠娥,王本玲. 當(dāng)代畜禽養(yǎng)殖業(yè). 2015(02)
[2]鴨疫里默氏桿菌的GAPDH同源體:一種有生物活性的胞外蛋白（英文）[J]. Ji-ye GAO,Cui-lian YE,Li-li ZHU,Zhi-ying TIAN,Zhi-bang YANG. Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2014(09)
[3]假單胞菌碳代謝抑制調(diào)控系統(tǒng)各組分的功能及作用機(jī)制[J]. 弓湃,尚立國(guó),戰(zhàn)崳華,燕永亮,林敏. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào). 2014(02)
[4]鴨疫里默氏桿菌強(qiáng)、弱菌株外膜蛋白的比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究[J]. 劉燕,韋強(qiáng),鮑國(guó)連,季權(quán)安. 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2008(06)
[5]鴨疫里默氏桿菌外膜蛋白生物學(xué)特性研究[J]. 劉燕,韋強(qiáng),鮑國(guó)連,季權(quán)安. 生物工程學(xué)報(bào). 2008(04)
[6]鴨疫里默氏菌的gyrA基因的檢測(cè)與變異位點(diǎn)的分析[J]. 劉穎,蘇敬良,劉文華. 中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2007(01)
[7]鴨疫里默氏菌一個(gè)可能新型的鑒定[J]. 張大丙,鄭獻(xiàn)進(jìn),曲豐發(fā). 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2006(01)
[8]鴨疫里默氏菌16SrDNA基因的PCR-RFLP分析[J]. 曲豐發(fā),張大丙,鄭獻(xiàn)進(jìn),郭玉璞. 中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2005(10)
[9]間接免疫組化法檢測(cè)鴨疫里默氏桿菌感染和抗原定位[J]. 劉維平,程安春,汪銘書(shū),陳孝躍,周毅,朱德康,劉菲,孟瓊?cè)A,黃誠(chéng),宋涌. 中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2005(04)
[10]PCR法快速檢測(cè)鴨疫里氏桿菌的研究[J]. 楊建遠(yuǎn),鄧舜洲,何后軍. 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2005(03)
博士論文
[1]A群鏈球菌CovRS雙組份系統(tǒng)致病機(jī)制研究[D]. 李錦銓.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[2]雙組分調(diào)控系統(tǒng)1910HK/RR調(diào)控豬鏈球菌2型致病性研究[D]. 袁芳艷.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[3]谷氨酰胺合成酶GlnA及其轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子GlnR對(duì)2型豬鏈球菌致病力影響的研究[D]. 司有輝.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[4]鴨疫里氏桿菌免疫診斷方法及在感染鴨肝臟差異表達(dá)基因的研究[D]. 周祖濤.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[5]鴨疫里默氏桿菌致病相關(guān)因子研究[D]. 李繼祥.西南大學(xué) 2009
[6]二元信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)SalK/SalR調(diào)控高致病性2型豬鏈球菌毒力的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 李明.第三軍醫(yī)大學(xué) 2008
碩士論文
[1]豬鏈球菌2型雙組分信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)NisKR和BceRS對(duì)毒力調(diào)控的研究[D]. 徐娟.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]豬鏈球菌2型雙組份調(diào)控系統(tǒng)CiaRH調(diào)控基因SSU052036和SSU052039的功能研究[D]. 賈志平.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[3]胸膜肺炎放線桿菌CpxA/R雙組份調(diào)控系統(tǒng)基因缺失突變株構(gòu)建及生物學(xué)特性研究[D]. 承慧.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[4]胸膜肺炎放線桿菌雙組份調(diào)控系統(tǒng)QseB/QseC突變株構(gòu)建功能研究[D]. 胡琳琳.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[5]鴨疫里氏桿菌野生型質(zhì)粒的分離、序列分析和DPP Ⅳ缺失株的構(gòu)建[D]. 彭曉婭.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[6]鴨疫里默氏桿菌特異性單克隆抗體的研制以及生物被膜和OmpA缺失株的研究[D]. 周小進(jìn).揚(yáng)州大學(xué) 2010
[7]鴨疫里默氏桿菌1型磷酸二酯酶基因的發(fā)現(xiàn)及其克隆表達(dá)和應(yīng)用研究[D]. 陳虹.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[8]鴨疫里氏桿菌體內(nèi)誘導(dǎo)抗原基因的篩選與應(yīng)用研究[D]. 陳芬芬.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[9]利用SCOTS技術(shù)篩選鴨疫里氏桿菌體內(nèi)外差異表達(dá)的基因[D]. 鄭娟.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
本文編號(hào)：3239925
本文鏈接：http://sikaile.net/yixuelunwen/dongwuyixue/3239925.html
最近更新
教材專著
