為建立1株豬源2009/H1N1流感病毒A/swine/Heilongjiang/44/2009（HLJ44）的反向遺傳系統(tǒng),利用雙向表達(dá)質(zhì)粒p HW2000,分別構(gòu)建了該病毒株8個(gè)基因節(jié)段的重組質(zhì)粒,將其共轉(zhuǎn)染于293T和MDCK混合培養(yǎng)的細(xì)胞,拯救出重組病毒R-HLJ44。測(cè)序結(jié)果表明,R-HLJ44與親本病毒HLJ44的核苷酸序列完全一致;二者在細(xì)胞上具有相似的增殖特性;抗原性未發(fā)生變化;分別以106TCID50的劑量鼻腔感染BALB/c小鼠,結(jié)果顯示R-HLJ44與親本HLJ44在小鼠臟器中的復(fù)制滴度也基本一致。以上結(jié)果表明拯救的重組病毒保持了與親本病毒一致的生物學(xué)特性。該病毒反向遺傳系統(tǒng)的建立,為進(jìn)一步研究H1N1亞型流感病毒的致病分子機(jī)制及新型疫苗研制等奠定了基礎(chǔ)。 

【文章來源】：畜牧與獸醫(yī). 2017,49(01)北大核心

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 病毒株和質(zhì)粒
    1.2 主要試劑與材料
    1.3 引物設(shè)計(jì)
    1.4 重組質(zhì)粒的構(gòu)建
    1.5 病毒拯救
    1.6 拯救病毒的序列測(cè)定
    1.7 拯救病毒的TCID50測(cè)定
    1.8 拯救病毒的抗原性分析
    1.9 病毒感染小鼠的致病性試驗(yàn)
2 結(jié)果
    2.1 重組病毒的拯救
    2.2 病毒的滴度測(cè)定
    2.3 病毒的抗原性分析
    2.4 病毒對(duì)小鼠的致病性測(cè)定
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]反向遺傳學(xué)技術(shù)在流感病毒研究和防控中的應(yīng)用[J]. 李呈軍,陳化蘭.  中國(guó)科學(xué):生命科學(xué). 2015(10)
[2]一株類禽型H1N1亞型豬流感病毒的反向遺傳系統(tǒng)的建立[J]. 孟沙沙,喬傳玲,陳艷,楊煥良,劉麗萍,尹航,辛?xí)怨?陳化蘭.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2013(02)



本文編號(hào)：3239686