本論文以純化的大豆球蛋白（Glycinin）為試驗(yàn)材料,以體外培養(yǎng)的仔豬小腸上皮細(xì)胞為模型,研究純化的大豆球蛋白對仔豬小腸上皮細(xì)胞活性、細(xì)胞通透性、細(xì)胞間緊密連接蛋白的分布及相關(guān)基因表達(dá)量的影響。試驗(yàn)一：仔豬小腸上皮細(xì)胞原代分離培養(yǎng)。采用組織塊接種培養(yǎng)法和膠原酶Ⅳ消化法相結(jié)合進(jìn)行原代分離培養(yǎng),用相差貼壁法和相差消化法進(jìn)行純化,傳代培養(yǎng)后用角蛋白8免疫組化方法進(jìn)行鑒定。試驗(yàn)結(jié)果表明:使用組織塊接種培養(yǎng)法和膠原酶Ⅳ消化法相結(jié)合可分離獲得大量高活性的仔豬小腸上皮細(xì)胞,1-2天細(xì)胞貼壁且少量遷出,5～7天明顯增殖,9-10天細(xì)胞匯合成單層,17-20天細(xì)胞呈“鋪路石”狀。經(jīng)過形態(tài)學(xué)觀察及免疫組化方法鑒定,95%以上細(xì)胞呈陽性。試驗(yàn)二：大豆球蛋白對仔豬小腸上皮細(xì)胞活性及通透性的影響。本試驗(yàn)比較了五個不同濃度大豆球蛋白添加水平（0mg/mL、0.5mg/mL、1.0mg/mL、2.0mg/mL、4.0mg/mL）對仔豬小腸上皮細(xì)胞活性和通透性的影響。不同處理組細(xì)胞同時培養(yǎng)24小時后,用MTT比色法檢測不同濃度大豆球蛋白對仔豬小腸上皮細(xì)胞活性的影響。通過檢測細(xì)胞跨膜電阻值（TEER）的變化和細(xì)胞培養(yǎng)... 

【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 大豆抗原蛋白研究進(jìn)展
        1.1 大豆抗原蛋白的定義
        1.2 大豆抗原蛋白的分類及生物學(xué)特性
        1.3 大豆抗原蛋白的抗?fàn)I養(yǎng)作用
        1.4 大豆抗原蛋白對腸道細(xì)胞的影響
    第二章 腸黏膜機(jī)械屏障的研究進(jìn)展
        2.1 緊密連接蛋白的定義、分類及功能
        2.2 腸上皮細(xì)胞機(jī)械屏障中緊密連接的功能及作用
    第三章 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)研究進(jìn)展
        3.1 小腸上皮細(xì)胞分離培養(yǎng)方法的建立
        3.2 小腸上皮細(xì)胞的應(yīng)用
第二篇 研究內(nèi)容
    第一章 仔豬小腸上皮細(xì)胞體外分離培養(yǎng)
        1.1 材料與方法
        1.2 結(jié)果與分析
        1.3 討論
        1.4 小結(jié)
    第二章 大豆球蛋白對仔豬小腸上皮細(xì)胞活性及通透性的影響
        2.1 材料與方法
        2.2 結(jié)果與分析
        2.3 討論
        2.4 小結(jié)
    第三章 大豆球蛋白對仔豬腸上皮細(xì)胞緊密連接Z0-1和Occludin分布及基因表達(dá)的影響
        3.1 材料與方法
        3.2 結(jié)果與分析
        3.3 討論
        3.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡介
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]急性肝內(nèi)膽汁淤積大鼠小腸上皮緊密連接蛋白ZO-1和Occludin表達(dá)的變化[J]. 劉圣烜,黃志華,林莉.  實(shí)用兒科臨床雜志. 2011(01)
[2]大豆抗原蛋白對小鼠腸上皮細(xì)胞的影響[J]. 徐君,王之盛,周安國.  飼料研究. 2010(06)
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[4]鯽腸道上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)方法的研究[J]. 宋增福,吳天星,潘曉東.  淡水漁業(yè). 2008(01)
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[7]仔豬消化生理與營養(yǎng)調(diào)控的研究進(jìn)展[J]. 趙金艷,韓瑞明.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2006(04)
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碩士論文
[1]新生山羊小腸上皮細(xì)胞系的建立[D]. 匡偉.揚(yáng)州大學(xué) 2007
[2]腎小管上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)及氧化應(yīng)激凋亡模型的建立[D]. 廖曉星.江西醫(yī)學(xué)院 2003



本文編號：3237783