弓形蟲（Toxoplasma gondii）是一種呈世界性分布且嚴(yán)重危害人類健康的人畜共患寄生蟲,一種專性細(xì)胞內(nèi)寄生的原蟲。哺乳動(dòng)物和禽類易受其感染,人類弓形蟲感染率也非常高,世界平均感染率約為30%。妊娠早中期的孕婦經(jīng)胎盤將蟲體傳染給胎兒,引起流產(chǎn)、死胎或畸形;妊娠晚期感染,胎兒多數(shù)表現(xiàn)為隱性感染,于出生數(shù)月甚至數(shù)年后才逐漸出現(xiàn)癥狀,如視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜炎、精神運(yùn)動(dòng)障礙、腦鈣化灶和腦積水等。弓形蟲現(xiàn)已被列為感染性致畸（TORCH）綜合征主要病原之一。對(duì)于免疫缺陷或免疫功能低下者,弓形蟲同樣是引起致死性疾病的主要病原體之一。此外,弓形蟲病也可導(dǎo)致動(dòng)物流產(chǎn)、弱胎、死胎、生長(zhǎng)受阻及死亡,給畜牧業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失,因此,弓形蟲感染的防治日益受到重視�，F(xiàn)有的治療弓形蟲病的藥物存在諸多不足,研制和開發(fā)一種高效、低毒的抗弓形蟲藥物迫在眉睫。脂酰輔酶A合成酶（Acyl-CoA synthetase,ACS）是在弓形蟲能量和脂類代謝中發(fā)揮重要作用的一種Ⅱ類脂肪酸合成酶,在脂類的合成過程中催化反應(yīng)的關(guān)鍵酶。目前ACS作為藥物靶點(diǎn)在隱孢子蟲、球蟲上面取得了很大的進(jìn)展,然而在弓形蟲的研究中尤其是作為靶點(diǎn)篩選治療... 

【文章來源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

PCR擴(kuò)增結(jié)果

第3章弓形蟲熒光定量PCR標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立19圖3-2PCR擴(kuò)增結(jié)果Fig.3-2PCRamplificationresultsM:DNAladdermarker2000；1：PCR擴(kuò)增產(chǎn)物M:DNAladdermarker2000；1：PCRamplificationproduct3.3.3小片段引物PCR擴(kuò)增結(jié)果以弓形蟲DNA重組質(zhì)粒為模板，使用設(shè)計(jì)的兩對(duì)引物進(jìn)行3.2.3.3PCR擴(kuò)增，其擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)2.0%瓊脂糖凝膠電泳分析后，與DL2000DNAMarker進(jìn)行比較，均獲得明亮目的條帶，與預(yù)期目的片段大小（160bp、250bp）相符，其中第二對(duì)引物（qTOX-F、qTOX-R）無非特異性片段，故本試驗(yàn)采用第二對(duì)引物（qTOX-F、qTOX-R）作為熒光定量檢測(cè)的引物。PCR產(chǎn)物電泳圖見3-3。圖3-3PCR擴(kuò)增結(jié)果Fig.3-3PCRamplificationresultsM:DNAladdermarker5000；1、2：PCR擴(kuò)增產(chǎn)物M:DNAladdermarker5000；1、2：PCRamplificationproduct3.3.4陽性標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒濃度測(cè)定及拷貝數(shù)計(jì)算通過核酸蛋白檢測(cè)儀測(cè)定陽性標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒的濃度的平均值為148.3ng/μL，利用

第3章弓形蟲熒光定量PCR標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立19圖3-2PCR擴(kuò)增結(jié)果Fig.3-2PCRamplificationresultsM:DNAladdermarker2000；1：PCR擴(kuò)增產(chǎn)物M:DNAladdermarker2000；1：PCRamplificationproduct3.3.3小片段引物PCR擴(kuò)增結(jié)果以弓形蟲DNA重組質(zhì)粒為模板，使用設(shè)計(jì)的兩對(duì)引物進(jìn)行3.2.3.3PCR擴(kuò)增，其擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)2.0%瓊脂糖凝膠電泳分析后，與DL2000DNAMarker進(jìn)行比較，均獲得明亮目的條帶，與預(yù)期目的片段大小（160bp、250bp）相符，其中第二對(duì)引物（qTOX-F、qTOX-R）無非特異性片段，故本試驗(yàn)采用第二對(duì)引物（qTOX-F、qTOX-R）作為熒光定量檢測(cè)的引物。PCR產(chǎn)物電泳圖見3-3。圖3-3PCR擴(kuò)增結(jié)果Fig.3-3PCRamplificationresultsM:DNAladdermarker5000；1、2：PCR擴(kuò)增產(chǎn)物M:DNAladdermarker5000；1、2：PCRamplificationproduct3.3.4陽性標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒濃度測(cè)定及拷貝數(shù)計(jì)算通過核酸蛋白檢測(cè)儀測(cè)定陽性標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒的濃度的平均值為148.3ng/μL，利用

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[6]弓形蟲病研究進(jìn)展[J]. 劉俠,闞松鶴,林青.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2015(01)
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本文編號(hào)：3236016