【目的】篩選安全的、具有優(yōu)良特性的乳酸菌菌株,進(jìn)一步研發(fā)益生制劑,為飼料添加劑等動(dòng)物相關(guān)產(chǎn)品提供資源�！痉椒ā繌奈覈�(guó)黑龍江省大興安嶺地區(qū)采集野豬糞便樣品13份,編號(hào)后置于4℃保溫箱迅速運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室,利用MRS培養(yǎng)基分離純化乳酸菌。使用細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒提取分離菌株的基因組DNA,利用細(xì)菌16S rDNA通用引物進(jìn)行PCR鑒定,將擴(kuò)增得到的序列測(cè)序后在NCBI上使用BLAST與GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中序列進(jìn)行對(duì)比分析,確定各菌株的分類(lèi)學(xué)地位。將鑒定后的乳酸菌菌株分別接種于酸性（pH 3.0）和含膽鹽（0.3%）的MRS培養(yǎng)基,在不同條件下評(píng)價(jià)乳酸菌菌株的耐酸、耐膽鹽特性。將過(guò)夜培養(yǎng)的乳酸菌于室溫條件下靜置,在不同時(shí)間測(cè)定其OD600nm,進(jìn)行自凝集能力評(píng)價(jià);過(guò)夜培養(yǎng)的菌株分別與致病性埃希氏大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和鼠傷寒沙門(mén)氏菌3種致病菌混合后于室溫靜置,進(jìn)行共凝集能力檢測(cè)。在體外,分別進(jìn)行乳酸菌菌株對(duì)Caco-2細(xì)胞和IPEC-J2細(xì)胞的黏附能力測(cè)定,評(píng)價(jià)不同菌株的黏附能力。通過(guò)測(cè)定乳酸菌菌株對(duì)致病性埃希氏大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和鼠傷寒沙門(mén)氏菌3種致病菌的抑菌環(huán)直徑,評(píng)價(jià)分離菌株... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2020,53(14)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：10 頁(yè)

【部分圖文】：

3株乳酸菌自凝集能力及其與致病菌的共凝集能力

溶血性試驗(yàn)結(jié)果顯示，金黃色葡萄球菌（ATCC6538P）劃線的血平板上菌落周?chē)纬赏耆该鞯娜苎h(huán)（β型溶血），模式菌株嗜酸乳桿菌（ATCC 4356）和3株乳酸菌菌株劃線的血平板上菌落周?chē)鸁o(wú)溶血現(xiàn)象，表明3株乳酸菌均無(wú)溶血性（圖3）。食物來(lái)源的腸球菌存在單一或多重毒力因子，盡管其在益生性腸球菌中的發(fā)生率較低，另外，也有關(guān)于乳桿菌中存在毒力因子的報(bào)導(dǎo)，因此仍需對(duì)本試驗(yàn)中分離的兩株腸球菌和一株黏膜乳桿菌進(jìn)行毒力因子的分析，以評(píng)估其安全性。在本研究中，以乳酸菌分離株基因組DNA為模板，使用多對(duì)毒力因子相應(yīng)引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，均未檢測(cè)到毒力因子（圖4）。圖3 乳酸菌分離株的溶血性

乳酸菌分離株的溶血性

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]大興安嶺地區(qū)野生動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)的機(jī)遇、挑戰(zhàn)與應(yīng)對(duì)措施[J]. 郭玉榮,王利利,金煜.  野生動(dòng)物. 2006(05)



本文編號(hào)：3232490