本文關(guān)鍵詞：小花棘豆中苦馬豆素對羊的毒性作用及大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞影響的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：本文通過在羊飼糧中添加小花棘豆,研究小花棘豆中苦馬豆素對羊的毒性作用及體外腦細(xì)胞的影響。試驗(yàn)內(nèi)容分為以下3個(gè)方面。試驗(yàn)一:小花棘豆的攻毒試驗(yàn)本試驗(yàn)旨在驗(yàn)證小花棘豆對卡拉庫爾羊組織器官的損傷,為研究其抗氧化指標(biāo)的變化提供依據(jù)。試驗(yàn)選取12只體重為16.00±1.40 kg的卡拉庫爾羊,采用單因素隨機(jī)分組設(shè)計(jì),將其分為2個(gè)組,每組6只羊,每只羊?yàn)?個(gè)重復(fù),對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧,試驗(yàn)組在基礎(chǔ)飼糧中添加400 g/d小花棘豆干粉。試驗(yàn)期42 d,每7 d進(jìn)行一次稱重、采血,在42 d時(shí),開展屠宰試驗(yàn),并對羊只的組織進(jìn)行取樣。應(yīng)用全自動生化分析儀和HE染色分別對血清指標(biāo)和組織病理進(jìn)行測定。結(jié)果表明:與對照組相比,試驗(yàn)組出現(xiàn)典型的臨床癥狀,組織和器官出現(xiàn)病理變化,AST、ALT、AKP、BUN、GLU、TC含量極顯著升高(P0.01),而TG極顯著降低(P0.01)。本試驗(yàn)表明小花棘豆中能夠引起卡拉庫爾羊的組織器官發(fā)生病變和損傷。試驗(yàn)二:小花棘豆對羊血漿及腦組織抗氧化指標(biāo)的影響本試驗(yàn)旨在研究小花棘豆對卡拉庫爾羊血漿及腦組織抗氧化指標(biāo)的影響,為進(jìn)一步完善小花棘豆中毒機(jī)理提供依據(jù)。試驗(yàn)選取12只體重為16±1.4 kg的卡拉庫爾羊,采用單因素隨機(jī)分組設(shè)計(jì),將其分為2個(gè)組,每組6只羊,每只羊?yàn)?個(gè)重復(fù),對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧,試驗(yàn)組基礎(chǔ)飼糧中添加400 g/d小花棘豆干粉。試驗(yàn)期42 d,每7 d進(jìn)行一次稱重和采血,在42 d時(shí),開展屠宰試驗(yàn),并對羊只的腦組織進(jìn)行取樣。應(yīng)用紫外可見分光光度計(jì)和酶標(biāo)儀分別對血漿和腦組織指標(biāo)進(jìn)行測定。結(jié)果表明:與對照組相比,1)試驗(yàn)組血漿中SOD活性在連續(xù)攻毒15 d時(shí)顯著降低(P0.05),攻毒21 d至42 d時(shí)極顯著降低(P0.01);試驗(yàn)組GSH含量在連續(xù)攻毒8 d時(shí)顯著降低(P0.05),攻毒15 d至試驗(yàn)終止時(shí)極顯著降低(P0.01);MDA含量在連續(xù)攻毒15 d至42 d時(shí)極顯著升高(P0.01);TSH和NPSH含量在連續(xù)攻毒21 d時(shí)顯著降低(P0.05),攻毒到28 d至42 d時(shí)極顯著降低(P0.01);連續(xù)攻毒21 d時(shí)測得AMA含量顯著降低(P0.05),攻毒到36 d至42 d時(shí)極顯著降低(P0.01);試驗(yàn)組羊NO含量在攻毒21 d至42 d時(shí)極顯著升高(P0.01);試驗(yàn)組羊ET-1含量在攻15d至21 d時(shí)顯著升高(P0.05),攻毒36d時(shí)表現(xiàn)差異不顯著(P0.05);試驗(yàn)組羊CGRP含量在攻毒21 d時(shí)顯著升高(P0.05),攻毒28 d至42 d時(shí)極顯著升高(P0.01);2)腦組織中SOD活性和GSH含量極顯著低于對照組(P0.01),而MDA、NO和ET-1含量極顯著高于對照組(P0.01)。本試驗(yàn)表明小花棘豆能夠?qū)е聶C(jī)體抗氧化能力降低,使得組織器官受到損傷。試驗(yàn)三:小花棘豆中苦馬豆素對大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞AQP1、AQP4的影響本試驗(yàn)旨在研究小花棘豆中苦馬豆素對星形膠質(zhì)細(xì)胞的毒性作用及水通道蛋白的影響,為研究小花棘豆中苦馬豆素與腦水腫之間的關(guān)系提供依據(jù)。試驗(yàn)采用不同濃度SW(0、0.5、1.0、2.0 mg/mL)細(xì)胞培養(yǎng)液對星形膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),分別培養(yǎng)3h、6h、12h、24h,采用MTT方法和Western Blot技術(shù)對細(xì)胞活性、存活率及AQP1、AQP4相對表達(dá)量進(jìn)行測定。結(jié)果表明:1)攻毒劑量越大和攻毒時(shí)間越長,細(xì)胞的存活率越低;2)與對照組相比,各試驗(yàn)組中AQP1、AQP4的相對表達(dá)量都有所升高,其中1.0 mg/mL SW組和2.0 mg/mL SW組中AQP1和AQP4相對表達(dá)量均極顯著增加(P0.01)。本試驗(yàn)表明小花棘豆中苦馬豆素能夠降低細(xì)胞存活率及調(diào)節(jié)水通道蛋白的表達(dá)。
【關(guān)鍵詞】：小花棘豆 苦馬豆素 羊 血漿指標(biāo) 星形膠質(zhì)細(xì)胞 AQP1 AQP4
【學(xué)位授予單位】：塔里木大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S859.82
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 縮略語表（Abbreviations）11-12
• 第一章 緒論12-22
• 小花棘豆的毒理作用的研究12-14
• 1.1 小花棘豆的認(rèn)識13-14
• 1.1.1 小花棘豆的毒性成分13
• 1.1.2 小花棘豆中毒引起的臨床癥狀13
• 1.1.3 小花棘豆的毒性作用13-14
• 水通道蛋白1和 4 在腦組織中的研究進(jìn)展14-22
• 1.2 AQP認(rèn)識14-21
• 1.2.1 腦中AQP1的分布、表達(dá)及功能15-16
• 1.2.3 腦中AQP4的分布、表達(dá)及功能16-18
• 1.2.4 腦中AQP1和AQP4的調(diào)節(jié)18-20
• 1.2.5 星形膠質(zhì)細(xì)胞（Astrocyte）簡介20-21
• 1.2.6 結(jié)束語與展望21
• 1.3 有待研究問題21-22
• 第二章 小花棘豆攻毒試驗(yàn)驗(yàn)證22-29
• 2.1 材料和方法22-25
• 2.1.1 試驗(yàn)材料22
• 2.1.2 試劑與儀器22-23
• 2.1.3 方法23-25
• 2.2 結(jié)果與分析25-27
• 2.2.1 臨床癥狀25
• 2.2.2 剖檢觀察25
• 2.2.3 組織學(xué)觀察25-26
• 2.2.4 血漿檢測26
• 2.2.5 體重變化26-27
• 2.3 討論27-28
• 2.4 小結(jié)28-29
• 第三章 小花棘豆對羊血漿及腦組織指標(biāo)的影響29-41
• 3.1 材料和方法29-32
• 3.1.1 試驗(yàn)材料29
• 3.1.2 試劑與儀器29-30
• 3.1.3 方法30-32
• 3.2 結(jié)果32-37
• 3.2.1 小花棘豆對羊血漿SOD活性的變化32-33
• 3.2.2 小花棘豆對羊血漿GSH含量的變化33
• 3.2.3 小花棘豆對羊血漿MDA含量的變化33
• 3.2.4 小花棘豆對羊血漿TSH含量的變化33-34
• 3.2.5 小花棘豆對羊血漿NPSH含量的變化34
• 3.2.6 小花棘豆對羊血漿AMA含量的變化34-35
• 3.2.7 小花棘豆對羊血漿NO含量的變化35
• 3.2.8 小花棘豆對羊血漿ET-1 含量的變化35-36
• 3.2.9 小花棘豆對羊血漿CGRP含量的變化36
• 3.2.10 小花棘豆腦組織中 SOD 活性及 GSH、MDA、NO 和 ET-1 含量的變化36-37
• 3.3 討論37-40
• 3.3.1 小花棘豆對羊血漿中SOD的變化37
• 3.3.2 小花棘豆對羊血漿中GSH的變化37-38
• 3.3.3 小花棘豆對羊血漿中MDA含量的變化38
• 3.3.4 小花棘豆苦馬豆素對羊血漿中TSH含量和NPSH含量的變化38-39
• 3.3.5 小花棘豆對羊血漿中NO含量的變化39
• 3.3.6 小花棘豆對羊血漿中ET-1 和CGRP含量的變化39-40
• 3.4 小結(jié)40-41
• 第四章 苦馬豆素對星形膠質(zhì)細(xì)胞AQP1、AQP4的影響41-52
• 4.1 材料和方法41-47
• 4.1.1 試驗(yàn)材料41
• 4.1.2 試劑與儀器41-43
• 4.1.3 方法43-47
• 4.2 結(jié)果47-48
• 4.2.1 星形膠質(zhì)細(xì)胞的活性分布47
• 4.2.2 MTT法檢測苦馬豆素作用星形膠質(zhì)細(xì)胞IC50測定及體外細(xì)胞存活的影響47
• 4.2.3 Western blot檢測測不同濃度苦馬豆素作用星形膠質(zhì)細(xì)胞中AQP1、AQP4相對表達(dá)量的影響47-48
• 4.3 討論48-51
• 4.3.1 星形膠質(zhì)細(xì)胞的選擇48-49
• 4.3.2 星形膠質(zhì)細(xì)胞與AQP1和AQP4關(guān)系49
• 4.3.3 星形膠質(zhì)細(xì)胞AQP1和AQP4表達(dá)變化49-51
• 4.4 小結(jié)51-52
• 第五章 結(jié)論52-53
• 參考文獻(xiàn)53-60
• 致謝60-61
• 作者簡介61

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