為了研究中藥金銀花是否具有抗牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）活性的作用,試驗(yàn)首先測(cè)定了金銀花對(duì)牛腎細(xì)胞（MDBK細(xì)胞）的最佳用藥濃度,用該濃度的金銀花對(duì)在細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外兩種狀態(tài)的BVDV進(jìn)行試驗(yàn)。細(xì)胞外試驗(yàn)中,把BVDV與金銀花在體外混合,作用0,6,12 h后接種MDBK細(xì)胞,以研究金銀花在細(xì)胞外抗BVDV活性作用。細(xì)胞內(nèi)試驗(yàn)中,將BVDV先接種至MDBK細(xì)胞,然后用含金銀花的細(xì)胞維持液培養(yǎng)1 h,最后用細(xì)胞維持液繼續(xù)培養(yǎng)24,36,48 h,以觀察金銀花對(duì)BVDV復(fù)制的影響。采用免疫熒光試驗(yàn)、病毒半數(shù)組織細(xì)胞感染量(TCID₅₀)測(cè)定及熒光定量PCR方法,檢測(cè)金銀花對(duì)BVDV活性和復(fù)制的影響。結(jié)果表明:當(dāng)金銀花濃度為2.5×10^-2 g/mL時(shí),對(duì)細(xì)胞的毒性最小。因此,用該濃度的金銀花對(duì)BVDV在細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外兩種狀態(tài)進(jìn)行試驗(yàn)。細(xì)胞外試驗(yàn)組免疫熒光試驗(yàn)結(jié)果顯示,金銀花與BVDV作用0 h,培養(yǎng)72 h后,仍有特異性熒光;而金銀花與BVDV作用6 h和12 h,培養(yǎng)72 h后則無(wú)特異性熒光出現(xiàn),表明在細(xì)胞外金銀花對(duì)BVDV活性起到了良好的抑制作... 

【文章來(lái)源】：黑龍江畜牧獸醫(yī). 2020,(14)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【部分圖文】：

細(xì)胞內(nèi)外BVDV活性抑制試驗(yàn)TCID50檢測(cè)結(jié)果

金銀花與細(xì)胞外BVDV直接作用后,接種易感MDBK細(xì)胞,免疫熒光試驗(yàn)結(jié)果表明,BVDV對(duì)細(xì)胞失去了感染活性。熒光定量PCR試驗(yàn)結(jié)果表明,BVDV與藥物作用0,6,12 h后感染細(xì)胞,試驗(yàn)組樣品中BVDV mRNA相對(duì)含量均極顯著低于病毒對(duì)照組(P<0.01),見(jiàn)圖4。藥物對(duì)照組與細(xì)胞對(duì)照組不含BVDV,不做對(duì)比。對(duì)細(xì)胞內(nèi)的BVDV,金銀花作用24 h,試驗(yàn)組BVDV mRNA相對(duì)含量顯著低于病毒對(duì)照組(P<0.05),隨著時(shí)間的增加,作用36 h和48 h后,試驗(yàn)組mRNA相對(duì)含量極顯著低于病毒對(duì)照組(P<0.01),見(jiàn)圖5。藥物對(duì)照組與細(xì)胞對(duì)照組不含BVDV,不做對(duì)比。

對(duì)細(xì)胞內(nèi)的BVDV,金銀花作用24 h,試驗(yàn)組BVDV mRNA相對(duì)含量顯著低于病毒對(duì)照組(P<0.05),隨著時(shí)間的增加,作用36 h和48 h后,試驗(yàn)組mRNA相對(duì)含量極顯著低于病毒對(duì)照組(P<0.01),見(jiàn)圖5。藥物對(duì)照組與細(xì)胞對(duì)照組不含BVDV,不做對(duì)比。4 討論


本文編號(hào)：3231961