發(fā)布時(shí)間：2021-06-15 15:05

　　H9N2亞型禽流感病毒在家禽中廣泛流行,宿主范圍已從禽類擴(kuò)大到了哺乳動(dòng)物。內(nèi)皮細(xì)胞被認(rèn)為在病毒感染期間通過(guò)表達(dá)多種蛋白分子參與機(jī)體的固有免疫反應(yīng)。具有廣譜抗病毒功能的干擾素誘導(dǎo)蛋白IFITM1和IFIT1可以被病毒誘導(dǎo)表達(dá),并通過(guò)多種機(jī)制抑制病毒的感染和復(fù)制。因此,探究H9N2禽流感病毒誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)IFITM1和IFIT1的模式及機(jī)制,以及誘導(dǎo)的蛋白分子對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞抗病毒狀態(tài)的影響具有重要意義。目前,H9N2禽流感病毒誘導(dǎo)IFITM1和IFIT1在內(nèi)皮細(xì)胞上表達(dá)的模式、機(jī)制,以及誘導(dǎo)的IFITM1、IFIT1對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞抗病毒反應(yīng)的影響尚不清楚。為解決這些問(wèn)題,本研究使用H9N2禽流感病毒A/Chicken/Hebei/4/2008（Ck/HB/4/08）)為試驗(yàn)毒株,并用該毒株制作滅活病毒顆粒。以人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）為主要研究對(duì)象來(lái)探討IFITM1和IFIT1的表達(dá)情況、表達(dá)模式、表達(dá)機(jī)制以及對(duì)細(xì)胞抗病毒能力的影響,并選擇人支氣管上皮細(xì)胞（BEAS-2Bs）為對(duì)照細(xì)胞;以BALB/c小鼠為模型動(dòng)物來(lái)探討滅活H9N2禽流感病毒顆粒體內(nèi)誘導(dǎo)IFITM1表達(dá)的情況。為探究IFI... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：102 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖I-2病衡誘導(dǎo)ISGs衰達(dá)的棋式圖(MichaelS.Diamond,ete1.Naturereviews,2013)

２．４．２?ＨＵＶＥＣｓ和ＢＥＡＳ－２Ｂｓ細(xì)胞月莫表面ＳＡ２－３Ｇａｌ表達(dá)情況??由于Ａ１Ｖ優(yōu)先結(jié)合ＳＡ２－３Ｇａｌ，因此，我們使用免疫熒光的方法檢測(cè)兩種細(xì)胞膜表面ＳＡ２－３Ｇａｌ??的表達(dá)情況。如圖２－２所示，ＨＵＶＥＣｓ和ＢＥＡＳ－２Ｂｓ細(xì)胞膜上均存在ＳＡ２－３Ｇａｈ由熒光陽(yáng)性的面??積可以看出ＢＥＡＳ－２Ｂｓ細(xì)胞膜上ＳＡ２－３Ｇａ丨數(shù)量多于ＨＵＶＥＣｓ細(xì)胞膜（圖２－２Ｃ）。??Ｍｌ＾ｌ?Ｌｉ??＾ｍｍｍ??圖２－２?ＨＵＶＥＣｓ和ＢＥＡＳ－２Ｂｓ細(xì)朐膜表面ＳＡ２－３Ｇａ丨表達(dá)情況??Ａ為ＨＵＶＥＣｓ細(xì)胞膜ＳＡ２－３Ｇａｌ表達(dá)情況，Ｂ為ＢＥＡＳ－２Ｂｓ細(xì)胞膜表面ＳＡ２－３Ｇａ丨表達(dá)情況，Ｃ為熒光陽(yáng)性面積占??圖片總面積的百分比。??Ｆｉｇ．?２－２?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＳＡ２－３Ｇａｌ?ｏｎ?ｔｈｅ?ｓｕｒｆａｃｅ?ｏｆ?ＨＵＶＥＣｓ?ａｎｄ?ＢＥＡＳ－２Ｂｓ??Ａ：?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＳＡ２－３Ｇａｌ?ｏｎ?ＨＵＶＥＣｓ，?Ｂ：?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆＳＡ２－３ＧａＩ?ｏｎ?ＢＥＡＳ－２Ｂｓ．?Ｃ：?Ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ?ｏｆ?ｐｏｓｉｔｉｖｅ?ｓｔａｉｎｉｎｇ??ａｒｅａ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｔｏｔａｌ?ａｒｅａ?ｏｆ?ｐｉｃｔｕｒｅ．??１９??

ＭＯＩ?（ＰＦＵ／ｃｅｌｌ）?Ｔｉｍｅ?（ｈｏｕｒ）??圖２－５?Ｈ９Ｎ２?ＡＩＶ在ＢＥＡＳ－２Ｂｓ內(nèi)的復(fù)制情況??Ａ為用不同ＭＯ丨的病毒接種２４?ｈ后細(xì)胞上清中的病毒滴度，Ｂ為用ＭＯ丨值為０．２和５的病毒接種后不同時(shí)間點(diǎn)??上清中的病毒滴度。??Ｆｉｇｕｒｅ?２－４?Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?Ｈ９Ｎ２?ＡＩＶ?ｉｎ?ＢＥＡＳ－２Ｂｓ??Ａ：?Ｖｉｒｕｓ?ｔｉｔｅｒｓ?ｉｎ?ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔｓ?ａｔ?２４?ｈ?ｐｏｓｔｉｎｆｅｃｔｉｏｎ?ｗｉｔｈ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ＭＯＩ，?Ｂ：?Ｖｉｒｕｓ?ｔｉｔｅｒｓ?ｉｎ?ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔｓ?ａｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｔｉｍｅ??ｐｏｉｎｔｓ?ａｆｔｅｒ?ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ?ｗｉｔｈ?ａ?ＭＯＩ?ｏｆ?０．２?ａｎｄ?５．??２１??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]IFIT家族基因抑制A型流感病毒W(wǎng)SN毒株的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄[J]. 侯力丹,李晶,瞿洪仁,楊利敏,陳亞軍,杜茜茜,劉文軍.  生物工程學(xué)報(bào). 2015(01)



本文編號(hào)：3231280