發(fā)布時間：2021-06-15 14:01

　　日本腦炎病毒（Japanese encephalitis virus, JEV）可經蚊蟲傳播引起嚴重的人畜共患疾病。JEV屬于黃病毒科黃病毒屬家族,其基因組只有一個開放閱讀框,可編碼3個結構蛋白,衣殼蛋白（C）,膜蛋白（M）,囊膜糖蛋白（E）和7個非結構蛋白（NS1,NS2A, NS2B, NS3, NS4A, NS4B, NS5）。本研究中,（1）分析了JEV感染細胞不同時間點脂肪酸合成途徑中相關酶類mRNA水平上的變化；（2）選擇針對乙酰輔酶A羧化酶1（ACC1）和脂肪酸合成酶（FAS）的抑制劑,對其抑制JEV感染活性進行研究,結果證明這兩個酶在病毒感染過程中具有重要作用；（3）針對宿主細胞DEAD-boxRNA解旋酶DDX3的抑制劑抑制JEV感染的活性研究,篩選得到3個能夠抑制病毒感染的化合物。主要研究內容分為以下4個部分：1.JEV感染對宿主細胞內脂肪酸生物合成過程中相關酶的影響設計針對13個宿主細胞脂肪酸生物合成過程相關酶/蛋白的實時熒光定量PCR引物,甘油醛-3-磷酸脫氫酶（GADPH）作為內參。收集感染病毒12、24和48 h的細胞,通過實時定量PCR方法檢測脂肪酸合成相... 

【文章來源】：南京農業(yè)大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 日本腦炎病毒的研究進展
    1 日本腦炎發(fā)展歷史及地理分布
    2 日本腦炎的流行病學研究進展
        2.1 易感宿主、傳染源、傳播途徑
        2.2 流行特點
        2.3 敏感動物與細胞
    3 JEV的病原學特性
        3.1 分類及理化性質
        3.2 生物學性狀
    4 JEV的自然變異和分型
    5 發(fā)病機理
    6 JEV分子生物學研究進展
        6.1 JEV基因結構特征
        6.2 JEV蛋白的結構與功能
        6.3 JEV的吸附與入胞機制
        6.4 JEV的復制
    7 抗病毒藥物的研究進展
        7.1 抑制病毒感染
        7.2 干擾素
        7.3 抗體
        7.4 抑制宿主細胞的酶類
    參考文獻
第二章 宿主細胞脂肪酸生物合成相關蛋白/酶在JEV感染過程中的RNA水平變化
    1 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結果
        2.1 擴增曲線和融解曲線
        2.2 數(shù)據(jù)分析
    3 討論
    參考文獻
第三章 體外下調脂肪酸生物合成途徑而抑制JEV的感染
    1 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結果
        2.1 抑制劑細胞毒性的測定
        2.2 抑制劑對JEV感染的抑制作用
        2.3 細胞內FAS與JEV NS3、NS5及RNA的共定位
    3 討論
    參考文獻
第四章 體內下調脂肪酸生物合成途徑而抑制JEV的感染
    1 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結果
        2.1 腹腔接種JEV的半數(shù)致死量
        2.2 腦腔接種JEV的半數(shù)致死量
        2.3 C75和TOFA的體內抗病毒試驗
        2.4 EGCG的體內抗病毒試驗
    3 討論
    參考文獻
第五章 宿主蛋白DDX3的酶活抑制劑體外抑制JEV感染的研究
    1 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結果
        2.1 DDX3酶活抑制劑的化學結構(專利保護)
        2.2 DDX3酶活抑制劑細胞毒性的測定
        2.3 DDX3酶活抑制劑抗JEV感染效果的篩選
        2.4 DDX3酶活抑制劑抗病毒效果劑量依賴性的研究
        2.5 DDX3酶活抑制劑對抗JEV感染的半數(shù)抑制濃度
    3 討論
    參考文獻
全文總結
致謝
發(fā)表論文及專利


【參考文獻】：
期刊論文
[1]脂肪酸合成酶基因的研究進展[J]. 羅建學,李春風,初曉輝,谷大海,黎小青,徐志強.  中國畜牧獸醫(yī). 2011(06)
[2]黃病毒科病毒編碼的非結構蛋白及其功能[J]. 周鵬程,陳建國,丁明孝.  微生物學免疫學進展. 1999(02)
[3]兒茶素衍生物對人免疫缺陷病毒逆轉錄酶及DNA聚合酶的抑制作用[J]. 陶佩珍,章天,周萍,王淑琴,程書鈞,蔣景儀,郭巨濤,陳鴻珊.  中國醫(yī)學科學院學報. 1992(05)

博士論文
[1]乙型腦炎病毒分子流行病學、診斷及重組疫苗研究[D]. 劉昊.吉林大學 2013

碩士論文
[1]豬細小病毒分離株感染母豬及胎豬的體內組織分布及病理變化[D]. 苗嵐飛.東北農業(yè)大學 2009



本文編號：3231187