水貂阿留申病乳膠凝集試驗(yàn)抗體檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用
發(fā)布時(shí)間:2021-06-13 18:43
水貂阿留申。ˋleutian disease of mink,AD),由阿留申病毒(Aleutian disease virus,ADV)引起的進(jìn)行性傳染病。該病不僅能夠?qū)е迈跞旱姆敝衬芰ο陆?而且還能引起成年水貂消瘦、皮張質(zhì)量降低等問(wèn)題,使特種養(yǎng)殖行業(yè)承受了巨大的經(jīng)濟(jì)損失,嚴(yán)重阻礙了我國(guó)毛皮行業(yè)的健康發(fā)展。目前公認(rèn)的辦法是通過(guò)檢測(cè)來(lái)逐步淘汰病貂、弱貂,以達(dá)到凈化貂群的作用。ADV特異性抗體檢測(cè)是診斷該病的最有效途徑,對(duì)流免疫電泳技術(shù)(Convection immune electrophoresis,CIEP)是ADV血清抗體檢測(cè)方法之一,但該方法操作過(guò)程比較繁瑣,檢測(cè)時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng),加之需要特定儀器設(shè)備,在臨床應(yīng)用上受到了一定的阻礙。因此,建立一種準(zhǔn)確率高、省時(shí)高效的水貂阿留申病檢測(cè)方法勢(shì)在必行。本研究將實(shí)驗(yàn)室前期設(shè)計(jì)并串聯(lián)表達(dá)的水貂阿留申病毒抗原表位(簡(jiǎn)稱抗原肽-SD)與羧基化聚苯乙烯微球共價(jià)偶聯(lián),制備抗原肽-SD微球復(fù)合物,建立了檢測(cè)水貂阿留申病血清中特異性抗體的乳膠微球凝集試驗(yàn)方法。結(jié)果表明,制備抗原肽-SD微球復(fù)合物的最佳條件為:羧基化聚苯乙烯微球以EDC為活化劑、活化時(shí)間...
【文章來(lái)源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:68 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
水溶性碳化二亞胺法示意圖(引自宋欣明,1993)
圖 1.1 重組 SD 蛋白表達(dá)的 SDS-PAGE 結(jié)果L15000 marker; 1:空白對(duì)照; 2:純化前; 3:SD 蛋白流 第一次洗除雜蛋白; 5:30 mM 第五次洗除雜蛋白; 6:ig 1.1 SDS-PAGE results of recombinant SD protein exp00 Marker; 1: Blank control; 2: Prepurification; 3: SD profirst wash impurity protein; 5: 30mM 5th times wash impu6: Target protein肽-SD 的濃度測(cè)定A 蛋白試劑盒操作說(shuō)明,測(cè)定重組蛋白濃度為 5mg/m化聚苯乙烯微球最佳活化劑種類的確定時(shí)間為 30min、蛋白濃度為 1mg/ml、EDC 活化劑組、N
劑及不同活化劑組合對(duì)抗原肽-SD 微球復(fù)合物(* p<0.05; ** p<0.01; *** p<0.001)f no activator and different activators on couplinpeptide-SD microsphere complex(* p<0.05; ** p<0.01; *** p<0.001)苯乙烯微球最佳活化時(shí)間的選擇結(jié)果 1 mg/ml,EDC 活化劑濃度為 100 ug/ml,偶聯(lián)沖液體系中,選取了 6 個(gè)活化時(shí)間點(diǎn)(5 min、和 50 min),研究了不同活化時(shí)間對(duì)抗原肽-S圖 1.3 所示,活化時(shí)間為 30min 時(shí),偶聯(lián)率具有顯著差異(*p<0.05),活化時(shí)間為 30m試驗(yàn)選用 30 min 作為最佳活化時(shí)間。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]雞白痢沙門氏菌膠體金免疫層析快速檢測(cè)試紙條的研制及初步應(yīng)用[J]. 劉志科,楊寧寧,徐明國(guó),荊明龍,曹旭東,陳創(chuàng)夫. 河南科技學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2018(01)
[2]水貂阿留申病膠體金免疫層析試紙條與對(duì)流免疫電泳對(duì)比試驗(yàn)[J]. 劉潔,李偉,任二軍,劉進(jìn)軍,韓學(xué)良. 今日畜牧獸醫(yī). 2018(01)
[3]水貂阿留申病的診斷方法[J]. 梁宇祥. 畜牧獸醫(yī)科技信息. 2017(09)
[4]水貂阿留申病碘凝集與對(duì)流免疫電泳檢測(cè)方法比較[J]. 任二軍,劉潔,劉進(jìn)軍,韓學(xué)良. 經(jīng)濟(jì)動(dòng)物學(xué)報(bào). 2017(03)
[5]乳膠凝集試驗(yàn)快速檢測(cè)腸出血性大腸桿菌O157∶H7的研究[J]. 羅玲,羅青平,溫國(guó)元,王紅琳,汪宏才,張騰飛,艾地云,盧琴,張蓉蓉,邵華斌. 中國(guó)家禽. 2017(06)
[6]水貂阿留申病抗體檢測(cè)技術(shù)研究及應(yīng)用進(jìn)展[J]. 萬(wàn)洪理,馮二凱,吳洪超,楊艷玲,倪佳,陳立志. 病毒學(xué)報(bào). 2015(01)
[7]乳膠凝集法檢測(cè)隱球菌莢膜多糖抗原在隱球菌性腦膜炎早期診斷價(jià)值[J]. 葉琳,張齊龍. 中國(guó)醫(yī)學(xué)裝備. 2014(S1)
[8]水貂阿留申病研究進(jìn)展[J]. 張慶明,王玉平,雷連成. 河北科技師范學(xué)院學(xué)報(bào). 2011(04)
[9]水貂阿留申病毒VP2基因的原核表達(dá)及初步應(yīng)用[J]. 徐磊,閆喜軍,張蕾,柴秀麗,趙建軍,張海玲,高晗,白雪. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2010(08)
[10]熒光微球的制備技術(shù)及其應(yīng)用進(jìn)展[J]. 張榮榮,徐自力. 高分子通報(bào). 2009(01)
博士論文
[1]納米免疫微球的制備、表征及在免疫層析檢測(cè)中的應(yīng)用研究[D]. 彭運(yùn)平.華南理工大學(xué) 2013
碩士論文
[1]引物和探針核苷酸錯(cuò)配對(duì)PCR靈敏度和特異性影響的研究[D]. 黃可.揚(yáng)州大學(xué) 2017
[2]微流體免疫技術(shù)在動(dòng)物源性食品安全檢測(cè)中的應(yīng)用研究[D]. 陳啟龍.北京化工大學(xué) 2015
[3]水貂阿留申病毒NS1基因的分段原核表達(dá)及免疫原性研究[D]. 劉紅娜.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[4]乳膠凝集試驗(yàn)、間接ELISA診斷鴨病毒性肝炎方法的建立[D]. 劉利芳.福建農(nóng)林大學(xué) 2008
[5]養(yǎng)殖水貂阿留申病感染情況及分子流行病學(xué)的研究[D]. 馬建.東北林業(yè)大學(xué) 2005
本文編號(hào):3228107
【文章來(lái)源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:68 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
水溶性碳化二亞胺法示意圖(引自宋欣明,1993)
圖 1.1 重組 SD 蛋白表達(dá)的 SDS-PAGE 結(jié)果L15000 marker; 1:空白對(duì)照; 2:純化前; 3:SD 蛋白流 第一次洗除雜蛋白; 5:30 mM 第五次洗除雜蛋白; 6:ig 1.1 SDS-PAGE results of recombinant SD protein exp00 Marker; 1: Blank control; 2: Prepurification; 3: SD profirst wash impurity protein; 5: 30mM 5th times wash impu6: Target protein肽-SD 的濃度測(cè)定A 蛋白試劑盒操作說(shuō)明,測(cè)定重組蛋白濃度為 5mg/m化聚苯乙烯微球最佳活化劑種類的確定時(shí)間為 30min、蛋白濃度為 1mg/ml、EDC 活化劑組、N
劑及不同活化劑組合對(duì)抗原肽-SD 微球復(fù)合物(* p<0.05; ** p<0.01; *** p<0.001)f no activator and different activators on couplinpeptide-SD microsphere complex(* p<0.05; ** p<0.01; *** p<0.001)苯乙烯微球最佳活化時(shí)間的選擇結(jié)果 1 mg/ml,EDC 活化劑濃度為 100 ug/ml,偶聯(lián)沖液體系中,選取了 6 個(gè)活化時(shí)間點(diǎn)(5 min、和 50 min),研究了不同活化時(shí)間對(duì)抗原肽-S圖 1.3 所示,活化時(shí)間為 30min 時(shí),偶聯(lián)率具有顯著差異(*p<0.05),活化時(shí)間為 30m試驗(yàn)選用 30 min 作為最佳活化時(shí)間。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]雞白痢沙門氏菌膠體金免疫層析快速檢測(cè)試紙條的研制及初步應(yīng)用[J]. 劉志科,楊寧寧,徐明國(guó),荊明龍,曹旭東,陳創(chuàng)夫. 河南科技學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2018(01)
[2]水貂阿留申病膠體金免疫層析試紙條與對(duì)流免疫電泳對(duì)比試驗(yàn)[J]. 劉潔,李偉,任二軍,劉進(jìn)軍,韓學(xué)良. 今日畜牧獸醫(yī). 2018(01)
[3]水貂阿留申病的診斷方法[J]. 梁宇祥. 畜牧獸醫(yī)科技信息. 2017(09)
[4]水貂阿留申病碘凝集與對(duì)流免疫電泳檢測(cè)方法比較[J]. 任二軍,劉潔,劉進(jìn)軍,韓學(xué)良. 經(jīng)濟(jì)動(dòng)物學(xué)報(bào). 2017(03)
[5]乳膠凝集試驗(yàn)快速檢測(cè)腸出血性大腸桿菌O157∶H7的研究[J]. 羅玲,羅青平,溫國(guó)元,王紅琳,汪宏才,張騰飛,艾地云,盧琴,張蓉蓉,邵華斌. 中國(guó)家禽. 2017(06)
[6]水貂阿留申病抗體檢測(cè)技術(shù)研究及應(yīng)用進(jìn)展[J]. 萬(wàn)洪理,馮二凱,吳洪超,楊艷玲,倪佳,陳立志. 病毒學(xué)報(bào). 2015(01)
[7]乳膠凝集法檢測(cè)隱球菌莢膜多糖抗原在隱球菌性腦膜炎早期診斷價(jià)值[J]. 葉琳,張齊龍. 中國(guó)醫(yī)學(xué)裝備. 2014(S1)
[8]水貂阿留申病研究進(jìn)展[J]. 張慶明,王玉平,雷連成. 河北科技師范學(xué)院學(xué)報(bào). 2011(04)
[9]水貂阿留申病毒VP2基因的原核表達(dá)及初步應(yīng)用[J]. 徐磊,閆喜軍,張蕾,柴秀麗,趙建軍,張海玲,高晗,白雪. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2010(08)
[10]熒光微球的制備技術(shù)及其應(yīng)用進(jìn)展[J]. 張榮榮,徐自力. 高分子通報(bào). 2009(01)
博士論文
[1]納米免疫微球的制備、表征及在免疫層析檢測(cè)中的應(yīng)用研究[D]. 彭運(yùn)平.華南理工大學(xué) 2013
碩士論文
[1]引物和探針核苷酸錯(cuò)配對(duì)PCR靈敏度和特異性影響的研究[D]. 黃可.揚(yáng)州大學(xué) 2017
[2]微流體免疫技術(shù)在動(dòng)物源性食品安全檢測(cè)中的應(yīng)用研究[D]. 陳啟龍.北京化工大學(xué) 2015
[3]水貂阿留申病毒NS1基因的分段原核表達(dá)及免疫原性研究[D]. 劉紅娜.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[4]乳膠凝集試驗(yàn)、間接ELISA診斷鴨病毒性肝炎方法的建立[D]. 劉利芳.福建農(nóng)林大學(xué) 2008
[5]養(yǎng)殖水貂阿留申病感染情況及分子流行病學(xué)的研究[D]. 馬建.東北林業(yè)大學(xué) 2005
本文編號(hào):3228107
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