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水貂阿留申病乳膠凝集試驗(yàn)抗體檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2021-06-13 18:43
  水貂阿留申。ˋleutian disease of mink,AD),由阿留申病毒(Aleutian disease virus,ADV)引起的進(jìn)行性傳染病。該病不僅能夠?qū)е迈跞旱姆敝衬芰ο陆?而且還能引起成年水貂消瘦、皮張質(zhì)量降低等問(wèn)題,使特種養(yǎng)殖行業(yè)承受了巨大的經(jīng)濟(jì)損失,嚴(yán)重阻礙了我國(guó)毛皮行業(yè)的健康發(fā)展。目前公認(rèn)的辦法是通過(guò)檢測(cè)來(lái)逐步淘汰病貂、弱貂,以達(dá)到凈化貂群的作用。ADV特異性抗體檢測(cè)是診斷該病的最有效途徑,對(duì)流免疫電泳技術(shù)(Convection immune electrophoresis,CIEP)是ADV血清抗體檢測(cè)方法之一,但該方法操作過(guò)程比較繁瑣,檢測(cè)時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng),加之需要特定儀器設(shè)備,在臨床應(yīng)用上受到了一定的阻礙。因此,建立一種準(zhǔn)確率高、省時(shí)高效的水貂阿留申病檢測(cè)方法勢(shì)在必行。本研究將實(shí)驗(yàn)室前期設(shè)計(jì)并串聯(lián)表達(dá)的水貂阿留申病毒抗原表位(簡(jiǎn)稱抗原肽-SD)與羧基化聚苯乙烯微球共價(jià)偶聯(lián),制備抗原肽-SD微球復(fù)合物,建立了檢測(cè)水貂阿留申病血清中特異性抗體的乳膠微球凝集試驗(yàn)方法。結(jié)果表明,制備抗原肽-SD微球復(fù)合物的最佳條件為:羧基化聚苯乙烯微球以EDC為活化劑、活化時(shí)間... 

【文章來(lái)源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:68 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

水貂阿留申病乳膠凝集試驗(yàn)抗體檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用


水溶性碳化二亞胺法示意圖(引自宋欣明,1993)

蛋白表達(dá),蛋白,除雜,活化劑


圖 1.1 重組 SD 蛋白表達(dá)的 SDS-PAGE 結(jié)果L15000 marker; 1:空白對(duì)照; 2:純化前; 3:SD 蛋白流 第一次洗除雜蛋白; 5:30 mM 第五次洗除雜蛋白; 6:ig 1.1 SDS-PAGE results of recombinant SD protein exp00 Marker; 1: Blank control; 2: Prepurification; 3: SD profirst wash impurity protein; 5: 30mM 5th times wash impu6: Target protein肽-SD 的濃度測(cè)定A 蛋白試劑盒操作說(shuō)明,測(cè)定重組蛋白濃度為 5mg/m化聚苯乙烯微球最佳活化劑種類的確定時(shí)間為 30min、蛋白濃度為 1mg/ml、EDC 活化劑組、N

活化劑,微球,復(fù)合物,最佳活化時(shí)間


劑及不同活化劑組合對(duì)抗原肽-SD 微球復(fù)合物(* p<0.05; ** p<0.01; *** p<0.001)f no activator and different activators on couplinpeptide-SD microsphere complex(* p<0.05; ** p<0.01; *** p<0.001)苯乙烯微球最佳活化時(shí)間的選擇結(jié)果 1 mg/ml,EDC 活化劑濃度為 100 ug/ml,偶聯(lián)沖液體系中,選取了 6 個(gè)活化時(shí)間點(diǎn)(5 min、和 50 min),研究了不同活化時(shí)間對(duì)抗原肽-S圖 1.3 所示,活化時(shí)間為 30min 時(shí),偶聯(lián)率具有顯著差異(*p<0.05),活化時(shí)間為 30m試驗(yàn)選用 30 min 作為最佳活化時(shí)間。

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào):3228107

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