山羊睪丸中l(wèi)ncRNA WNT3-IT通過調(diào)節(jié)WNT3表達影響支持細胞增殖
發(fā)布時間：2021-06-09 23:12
睪丸支持細胞的增殖分化能力直接影響精子發(fā)生過程、雄性生殖發(fā)育。WNTs蛋白可以參與調(diào)控支持細胞增殖分化與精子發(fā)生。隨著生物信息學(xué)的發(fā)展,關(guān)于細胞中l(wèi)ncRNA調(diào)控靶基因表達已經(jīng)成為當(dāng)前的熱點研究。因此關(guān)于在支持細胞增殖分化過程中是否存在調(diào)控WNTs蛋白表達的lncRNA是一個值得研究的課題。本研究以大足黑山羊為實驗對象,通過采集大足黑山羊初生、青春期前期、成熟三個年齡段的睪丸組織,進行高通量測序,預(yù)測在睪丸生長發(fā)育過程中與WNTs相關(guān)的lncRNA,最終篩選出lncRNA WNT3-IT可能靶向調(diào)控WNT3的表達。為了驗證其對WNT3的表達調(diào)控,在體外培養(yǎng)睪丸支持細胞基礎(chǔ)上,采用石蠟切片、熒光原位雜交、干擾、過表達、細胞毒性實驗、Western blot、qPCR等技術(shù),對lncRNA WNT3-IT與WNT3表達關(guān)系進行定位分析、干擾和過表達分析以及對lncRNA WNT3-IT對支持細胞增殖活性與增殖周期進行分析,得到以下結(jié)果:1.睪丸組織石蠟切片結(jié)果顯示,初生的大足黑山羊睪丸中只含有支持細胞與精原干細胞;2月齡的睪丸中已經(jīng)有支持細胞與精原干細胞的增殖分化但沒有精子細胞的存在;9月...
【文章來源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：78 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
lncRNA與基因的相對位置
圖 1-2 lncRNA 的兩種調(diào)控機制Figure 1-2 Two regulatory mechanisms of lncRNAa: lncRNA 調(diào)控組蛋白標(biāo)記的激活和抑制; b: lncRNA 充當(dāng) miRNA 海綿調(diào)控 mRNA 翻譯: lncRNA regulates the activation and inhibition of histone markers; b: lncRNA acts as a miRponge to regulate mRNAtranslation)還有許多 lncRNA 能與染色質(zhì)重塑復(fù)合物共同調(diào)控基因的表達。盡管這一調(diào)制還不是十分清楚，但有一些研究已經(jīng)表明 lncRNA 可以通過補充轉(zhuǎn)錄抑制復(fù)來達到沉默目的基因片段的目的。例如在Ｘ染色體失活（XCI）過程中，為了性哺乳動物其中一條 X 染色體失活，從而使雌性體內(nèi) X 染色體的基因表達趨衡，這時需要一些 lncRNA 參與到這個過程中，包括 Xist、Tsix 和 Xite[36,37]，XCI修飾的Xist[38]補充染色體復(fù)合物用來沉默X（i被沉默的X染色體）。LncRN這一調(diào)控機制也發(fā)生在癌癥中，如 lncRNASChLAP1（second chromosome lossociated with prostate-1）與人類前列腺癌細胞中染色質(zhì)重塑復(fù)合體 SWI/SNF 的[39]。lncRNASChLAP1 的下調(diào)導(dǎo)致細胞侵襲和增殖受損，而敲除下調(diào) SMARCSWI/SNF 的組成部分）后導(dǎo)致癌癥的惡化，從而表明 lncRNA SChLAP1 WI/SNF 在人類前列腺癌細胞系中的具有相反功能。
第 1 章 文獻綜述物過程中起著都扮演著至關(guān)重要的角色，典型的作用有：支架分子、誘餌分子、信號分子、或核糖體抑制物、核糖體活化劑、海綿體和 small-ncRNA 前體等。其中 lncRNA 的支架作用主要是在基因表達調(diào)控參與了表觀遺傳和轉(zhuǎn)錄控制的過程研究表明，lncRNA 支架與許多核小體重塑復(fù)合物有關(guān)聯(lián)[44, 45]，其介導(dǎo)的這些復(fù)合物的組裝重塑了染色質(zhì)結(jié)構(gòu)域的組織，從而允許包括轉(zhuǎn)錄、重組、DNA 修復(fù)以及RNA 加工在內(nèi)的所有基于 DNA 的生物學(xué)過程的調(diào)節(jié)[46, 47]。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]牛體外受精胚胎抗氧化相關(guān)的長鏈非編碼RNA表達譜[J]. 郭芹芹,李鳳,孫尉峻,郝海生,劉巖,趙學(xué)明,龐云渭,朱化彬,杜衛(wèi)華. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2017(07)
[2]Wnt/β-catenin信號通路在成人睪丸支持細胞增殖中的作用及其機制[J]. 李毅,張帥,殷鋼,史琨,邴魯軍,郝晶. 山東大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2012(03)
[3]大足黑山羊種質(zhì)特性[J]. 趙中權(quán),張家驊,李周權(quán),王賢海,陳長庚,徐恢仲. 中國畜牧雜志. 2008(15)
本文編號：3221512
【文章來源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：78 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
lncRNA與基因的相對位置
圖 1-2 lncRNA 的兩種調(diào)控機制Figure 1-2 Two regulatory mechanisms of lncRNAa: lncRNA 調(diào)控組蛋白標(biāo)記的激活和抑制; b: lncRNA 充當(dāng) miRNA 海綿調(diào)控 mRNA 翻譯: lncRNA regulates the activation and inhibition of histone markers; b: lncRNA acts as a miRponge to regulate mRNAtranslation)還有許多 lncRNA 能與染色質(zhì)重塑復(fù)合物共同調(diào)控基因的表達。盡管這一調(diào)制還不是十分清楚，但有一些研究已經(jīng)表明 lncRNA 可以通過補充轉(zhuǎn)錄抑制復(fù)來達到沉默目的基因片段的目的。例如在Ｘ染色體失活（XCI）過程中，為了性哺乳動物其中一條 X 染色體失活，從而使雌性體內(nèi) X 染色體的基因表達趨衡，這時需要一些 lncRNA 參與到這個過程中，包括 Xist、Tsix 和 Xite[36,37]，XCI修飾的Xist[38]補充染色體復(fù)合物用來沉默X（i被沉默的X染色體）。LncRN這一調(diào)控機制也發(fā)生在癌癥中，如 lncRNASChLAP1（second chromosome lossociated with prostate-1）與人類前列腺癌細胞中染色質(zhì)重塑復(fù)合體 SWI/SNF 的[39]。lncRNASChLAP1 的下調(diào)導(dǎo)致細胞侵襲和增殖受損，而敲除下調(diào) SMARCSWI/SNF 的組成部分）后導(dǎo)致癌癥的惡化，從而表明 lncRNA SChLAP1 WI/SNF 在人類前列腺癌細胞系中的具有相反功能。
第 1 章 文獻綜述物過程中起著都扮演著至關(guān)重要的角色，典型的作用有：支架分子、誘餌分子、信號分子、或核糖體抑制物、核糖體活化劑、海綿體和 small-ncRNA 前體等。其中 lncRNA 的支架作用主要是在基因表達調(diào)控參與了表觀遺傳和轉(zhuǎn)錄控制的過程研究表明，lncRNA 支架與許多核小體重塑復(fù)合物有關(guān)聯(lián)[44, 45]，其介導(dǎo)的這些復(fù)合物的組裝重塑了染色質(zhì)結(jié)構(gòu)域的組織，從而允許包括轉(zhuǎn)錄、重組、DNA 修復(fù)以及RNA 加工在內(nèi)的所有基于 DNA 的生物學(xué)過程的調(diào)節(jié)[46, 47]。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]牛體外受精胚胎抗氧化相關(guān)的長鏈非編碼RNA表達譜[J]. 郭芹芹,李鳳,孫尉峻,郝海生,劉巖,趙學(xué)明,龐云渭,朱化彬,杜衛(wèi)華. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2017(07)
[2]Wnt/β-catenin信號通路在成人睪丸支持細胞增殖中的作用及其機制[J]. 李毅,張帥,殷鋼,史琨,邴魯軍,郝晶. 山東大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2012(03)
[3]大足黑山羊種質(zhì)特性[J]. 趙中權(quán),張家驊,李周權(quán),王賢海,陳長庚,徐恢仲. 中國畜牧雜志. 2008(15)
本文編號：3221512
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