睪丸支持細(xì)胞的增殖分化能力直接影響精子發(fā)生過(guò)程、雄性生殖發(fā)育。WNTs蛋白可以參與調(diào)控支持細(xì)胞增殖分化與精子發(fā)生。隨著生物信息學(xué)的發(fā)展,關(guān)于細(xì)胞中l(wèi)ncRNA調(diào)控靶基因表達(dá)已經(jīng)成為當(dāng)前的熱點(diǎn)研究。因此關(guān)于在支持細(xì)胞增殖分化過(guò)程中是否存在調(diào)控WNTs蛋白表達(dá)的lncRNA是一個(gè)值得研究的課題。本研究以大足黑山羊?yàn)閷?shí)驗(yàn)對(duì)象,通過(guò)采集大足黑山羊初生、青春期前期、成熟三個(gè)年齡段的睪丸組織,進(jìn)行高通量測(cè)序,預(yù)測(cè)在睪丸生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中與WNTs相關(guān)的lncRNA,最終篩選出lncRNA WNT3-IT可能靶向調(diào)控WNT3的表達(dá)。為了驗(yàn)證其對(duì)WNT3的表達(dá)調(diào)控,在體外培養(yǎng)睪丸支持細(xì)胞基礎(chǔ)上,采用石蠟切片、熒光原位雜交、干擾、過(guò)表達(dá)、細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)、Western blot、qPCR等技術(shù),對(duì)lncRNA WNT3-IT與WNT3表達(dá)關(guān)系進(jìn)行定位分析、干擾和過(guò)表達(dá)分析以及對(duì)lncRNA WNT3-IT對(duì)支持細(xì)胞增殖活性與增殖周期進(jìn)行分析,得到以下結(jié)果:1.睪丸組織石蠟切片結(jié)果顯示,初生的大足黑山羊睪丸中只含有支持細(xì)胞與精原干細(xì)胞;2月齡的睪丸中已經(jīng)有支持細(xì)胞與精原干細(xì)胞的增殖分化但沒(méi)有精子細(xì)胞的存在;9月... 

【文章來(lái)源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：78 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

lncRNA與基因的相對(duì)位置

圖 1-2 lncRNA 的兩種調(diào)控機(jī)制Figure 1-2 Two regulatory mechanisms of lncRNAa: lncRNA 調(diào)控組蛋白標(biāo)記的激活和抑制; b: lncRNA 充當(dāng) miRNA 海綿調(diào)控 mRNA 翻譯: lncRNA regulates the activation and inhibition of histone markers; b: lncRNA acts as a miRponge to regulate mRNAtranslation)還有許多 lncRNA 能與染色質(zhì)重塑復(fù)合物共同調(diào)控基因的表達(dá)。盡管這一調(diào)制還不是十分清楚，但有一些研究已經(jīng)表明 lncRNA 可以通過(guò)補(bǔ)充轉(zhuǎn)錄抑制復(fù)來(lái)達(dá)到沉默目的基因片段的目的。例如在Ｘ染色體失活（XCI）過(guò)程中，為了性哺乳動(dòng)物其中一條 X 染色體失活，從而使雌性體內(nèi) X 染色體的基因表達(dá)趨衡，這時(shí)需要一些 lncRNA 參與到這個(gè)過(guò)程中，包括 Xist、Tsix 和 Xite[36,37]，XCI修飾的Xist[38]補(bǔ)充染色體復(fù)合物用來(lái)沉默X（i被沉默的X染色體）。LncRN這一調(diào)控機(jī)制也發(fā)生在癌癥中，如 lncRNASChLAP1（second chromosome lossociated with prostate-1）與人類前列腺癌細(xì)胞中染色質(zhì)重塑復(fù)合體 SWI/SNF 的[39]。lncRNASChLAP1 的下調(diào)導(dǎo)致細(xì)胞侵襲和增殖受損，而敲除下調(diào) SMARCSWI/SNF 的組成部分）后導(dǎo)致癌癥的惡化，從而表明 lncRNA SChLAP1 WI/SNF 在人類前列腺癌細(xì)胞系中的具有相反功能。

第 1 章 文獻(xiàn)綜述物過(guò)程中起著都扮演著至關(guān)重要的角色，典型的作用有：支架分子、誘餌分子、信號(hào)分子、或核糖體抑制物、核糖體活化劑、海綿體和 small-ncRNA 前體等。其中 lncRNA 的支架作用主要是在基因表達(dá)調(diào)控參與了表觀遺傳和轉(zhuǎn)錄控制的過(guò)程研究表明，lncRNA 支架與許多核小體重塑復(fù)合物有關(guān)聯(lián)[44, 45]，其介導(dǎo)的這些復(fù)合物的組裝重塑了染色質(zhì)結(jié)構(gòu)域的組織，從而允許包括轉(zhuǎn)錄、重組、DNA 修復(fù)以及RNA 加工在內(nèi)的所有基于 DNA 的生物學(xué)過(guò)程的調(diào)節(jié)[46, 47]。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]牛體外受精胚胎抗氧化相關(guān)的長(zhǎng)鏈非編碼RNA表達(dá)譜[J]. 郭芹芹,李鳳,孫尉峻,郝海生,劉巖,趙學(xué)明,龐云渭,朱化彬,杜衛(wèi)華.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2017(07)
[2]Wnt/β-catenin信號(hào)通路在成人睪丸支持細(xì)胞增殖中的作用及其機(jī)制[J]. 李毅,張帥,殷鋼,史琨,邴魯軍,郝晶.  山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2012(03)
[3]大足黑山羊種質(zhì)特性[J]. 趙中權(quán),張家驊,李周權(quán),王賢海,陳長(zhǎng)庚,徐恢仲.  中國(guó)畜牧雜志. 2008(15)



本文編號(hào)：3221512