我國是綿羊存欄量和羊肉消費(fèi)大國,提高綿羊生產(chǎn)性能一直是畜禽遺傳育種領(lǐng)域研究重點(diǎn)。綿羊按照尾型可以被劃分為脂尾羊、脂臀羊和瘦尾羊。脂尾性狀是瘦尾羊經(jīng)過長期的自然選擇和人工選育形成的獨(dú)特性狀。目前,綿羊脂尾性狀的相關(guān)研究大多從基因組水平、轉(zhuǎn)錄組水平對不同尾型的成年綿羊進(jìn)行分析,然而綿羊尾脂的沉積在胚胎時期已經(jīng)開始,出生后綿羊的脂尾已經(jīng)形成。因此本研究對綿羊胚胎期尾脂沉積過程中關(guān)鍵的功能基因和生物學(xué)通路進(jìn)行了探索性研究。基于上述背景,本研究主要工作內(nèi)容和結(jié)果如下:（1）胚胎期尾組織組織形態(tài)學(xué)分析表明E70-E80是尾脂沉積的關(guān)鍵時期。采集了灘羊（脂尾羊）妊娠期60天（E60）、70天（E70）、80天（E80）和90天（E90）的胚胎尾部組織,我們發(fā)現(xiàn)E70-E80尾組織在形態(tài)上發(fā)生了劇烈的變化（由“棍狀”變?yōu)椤膀蝌綘睢保�。HE染色和油紅染色表明E60和E70時期尾部無脂肪沉積,但脂肪前體細(xì)胞在尾組織中聚集成規(guī)則的葉狀細(xì)胞團(tuán);E80和E90時期尾部的脂肪前體細(xì)胞大量增殖分化為脂肪細(xì)胞,尾部脂肪大量沉積。（2）尾脂沉積時間要早于皮下、肌內(nèi)和內(nèi)臟脂肪的沉積。同時對E80時期尾、肌肉、皮膚、肝臟和... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

DNA芯片技術(shù)原理

?Rodelspergeretal.,2017;Sakaietal.,2015)。但是該方法對組織提取RNA要求極高、價(jià)格昂貴，限制了該技術(shù)的大規(guī)模的應(yīng)用。RNA-Seq技術(shù)指的是應(yīng)用第二代測序技術(shù)對組織或細(xì)胞轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物構(gòu)建的cDNA文庫進(jìn)行測序的技術(shù)，在目前的轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究領(lǐng)域最為常見，應(yīng)用的最為廣泛，該方法通過在不同的實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)進(jìn)行設(shè)計(jì)，能夠分別對全轉(zhuǎn)錄組、mRNA、lncRNA和microRNA進(jìn)行建庫測序。一般來說，組織或細(xì)胞中提取出的RNA反轉(zhuǎn)成cDNA，在cDNA雙末端添加具有特定序列的接頭，然后對每個帶接頭的cDNA片段擴(kuò)增或直接進(jìn)行單末端或雙末端高通量測序（圖1-2）。目前，多種測序平臺被開發(fā)出來用于轉(zhuǎn)錄組高通量測序，如：Roche454LifeScience(Barbazuketal.,2007)、IlluminaIG(Nagalakshmietal.,2008)和AppliedBiosystemsSOLiD(Cloonanetal.,2008)等，不同的測序方法或不同的測序平臺單次可測定的讀段長度存在差異，一般在30-400pb。測序后，產(chǎn)生的讀段一方面可以與參考基因組或參考轉(zhuǎn)錄本進(jìn)行作圖，另一方面可以在沒有參考基因組的情況下用進(jìn)行重新組裝，構(gòu)建新的轉(zhuǎn)錄圖譜，之后根據(jù)匹配到每個基因外顯子區(qū)域讀段的總數(shù)推斷基因的表達(dá)水平，進(jìn)而根據(jù)匹配的外顯子長度對表達(dá)水平進(jìn)行歸一化處理。圖1-2轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)流程Fig.1-2Transcriptomesequencingprocess(Wangetal.,2009)相較于基于芯片雜交的轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究方法，RNA-Seq具有眾多優(yōu)點(diǎn)。首先，該技術(shù)突破了必須對已注釋基因進(jìn)行檢測的限制，因此，該技術(shù)可以很好地應(yīng)用于無參考基因組的非模式生物的研究。轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)能夠以單堿基分辨率對轉(zhuǎn)錄結(jié)構(gòu)、轉(zhuǎn)錄水平基因組變異信息（如SNP和可

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第一章緒論5用于儲存脂肪，同時含有豐富的線粒體，具有棕色脂肪細(xì)胞特性；當(dāng)細(xì)胞受到冷刺激時，轉(zhuǎn)化為多泡脂肪細(xì)胞，能夠如同棕色脂肪細(xì)胞一樣產(chǎn)熱。米色脂肪細(xì)胞在小鼠體內(nèi)主要分布在皮下白色脂肪組織庫，目前尚未證實(shí)在人體白色脂肪組織庫中也存在米色脂肪細(xì)胞(Harmsetal.,2013)。棕色和米色脂肪細(xì)胞產(chǎn)熱功能的實(shí)現(xiàn)主要依賴于UCP1蛋白，這種蛋白不在白色脂肪細(xì)胞或身體其他任何細(xì)胞中表達(dá)(Gaoetal.,2018)。圖1-3棕色脂肪細(xì)胞（A）、米色脂肪細(xì)胞（B）和白色脂肪細(xì)胞（C）Fig.1-3Brownadipocyte(A),beigeadipocyte(B)andwhiteadipocyte(C)脂肪組織在動物體內(nèi)處于動態(tài)變化之中，是一種能夠介導(dǎo)全身穩(wěn)態(tài)的高度動態(tài)化的器官(Bakhtiarizadehetal.,2013)。理論上，脂肪組織的生長可以通過脂肪細(xì)胞體積的增大和數(shù)量的增多來實(shí)現(xiàn)，由于成熟的脂肪細(xì)胞是由前脂肪細(xì)胞分化而來的一種終末分化細(xì)胞，所以數(shù)量的增加（增生）代表著脂肪細(xì)胞重新形成的過程；體積的增大（肥大）往往和脂肪功能障礙有關(guān)。研究表明，大多數(shù)WAT中脂肪細(xì)胞的數(shù)量在生長過程中逐漸確定了下來，成年時期，前脂肪細(xì)胞分化出的新的脂肪細(xì)胞用來取代死亡的脂肪細(xì)胞，以保持脂肪細(xì)胞的數(shù)量(Jefferyetal.,2015)。此外，成年人體內(nèi)的AT主要由白色脂肪細(xì)胞構(gòu)成，但是在新生兒體內(nèi)的AT主要由富含線粒體的脂肪細(xì)胞組成；在高營養(yǎng)飲食狀態(tài)會導(dǎo)致體內(nèi)白色脂肪細(xì)胞體積、數(shù)量迅速增加(Jefferyetal.,2015)，而減肥一般會造成脂肪細(xì)胞體積減小，與數(shù)目無關(guān)。動物脂肪組織還受到性別、環(huán)境、飼養(yǎng)管理方式等眾多因素的影響，更重要的是，動物體內(nèi)脂肪組織的沉積對肉質(zhì)和風(fēng)味都有很大的影響(滑留帥等，2014)。1.1.3綿羊尾脂研究進(jìn)展我國幅員遼闊，擁有豐富的綿羊品種資?

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3221035