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貴州從江香豬PHKG1、PHKG2基因的克隆表達(dá)及功能研究

發(fā)布時(shí)間:2021-06-06 21:46
  磷酸化酶激酶(phosphorylase kinase,PHK)是糖原分解代謝過程中的一種關(guān)鍵調(diào)節(jié)酶,包括α、β、γ、δ四個(gè)亞基,其中γ為催化亞基,γ亞基同時(shí)受到磷酸化酶激酶γ1(Phosphorylase kinaseγ1,PHKG1)和磷酸化酶激酶γ2(Phosphorylase kinaseγ2,PHKG2)基因編碼,具有為機(jī)體肌肉收縮提供能量以及維持機(jī)體血糖平衡的作用。本試驗(yàn)以貴州從江香豬為研究對(duì)象,利用分子克隆技術(shù)、RNAi技術(shù)、細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù),從分子水平和細(xì)胞水平分別研究PHKG1和PHKG2基因的功能。主要研究結(jié)果如下:(1)運(yùn)用qRT-PCR技術(shù)檢測(cè)從江香豬和大白豬不同組織間PHKG1和PHKG2基因的表達(dá)情況,發(fā)現(xiàn)PHKG1基因在大白豬和從江香豬背最長(zhǎng)肌中表達(dá)量最高,在心臟、肝臟、脾臟、腎臟等內(nèi)臟組織中表達(dá)量均較低,且該基因在大白豬和從江香豬肺組織中的表達(dá)量差異極顯著(P<0.01);PHKG2基因在組織中表達(dá)量為脾>肺>大腸>小腸>脂肪>肝>腎>胃>心>背最長(zhǎng)肌,在大白豬和從江香豬所有組織中的表達(dá)量差異不顯... 

【文章來源】:貴州大學(xué)貴州省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:82 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

貴州從江香豬PHKG1、PHKG2基因的克隆表達(dá)及功能研究


PHK家族基因組成(Maicheleetal,1996)

磷酸化酶,糖原


圖 1-2 參與糖原代謝的肝磷酸化酶系統(tǒng)Fig.1-2 Hepatic phosphorylase system involved in glycogen metabolism1.2 PHKG1 基因概述PHKG1 基因編碼的γ1 亞基是催化亞基,PHKG1 基因定位在人的 7 號(hào)染色體上(Jones et al.,1990)。Winchester 等人(2007)發(fā)現(xiàn) PHKG1 基因存在一個(gè)弱多聚腺苷酸化與第 6 內(nèi)含子的裂解位點(diǎn),通過內(nèi)含子的不同剪切方式形成不同的剪切體,進(jìn)而在體內(nèi)行使著不同的生物學(xué)功能。Elliott 等(2006)通過熒光素酶報(bào)告顯示人的 PHKG1 基因啟動(dòng)子(2.4Kb)在肝細(xì)胞(HepG2)和小鼠成肌細(xì)胞(C2C12)中均能檢測(cè)到其活性存在。1.2.1 PHKG1 基因國(guó)內(nèi)外研究進(jìn)展Wehner 等(1995)克隆了人的 PHKG1 基因序列,并且預(yù)測(cè) PHKG1 基因突變可能是導(dǎo)致由磷酸化酶激酶(PHK)缺陷引起的肌糖原病候選基因之一,可能導(dǎo)致機(jī)體運(yùn)動(dòng)不耐,肌無(wú)力和肌肉萎縮疾病。Burwinkel 等(2003)根據(jù)小鼠和

作用機(jī)制,糖原


圖 1-3 RNAi 作用機(jī)制Fig.1-3 RNAi mechanism of action意義 和 PHKG2 基因在糖原代謝疾病相關(guān)的研究較豐相關(guān)研究少有涉獵,因此,本研究選取在糖原代基因 PHKG1 和 PHKG2,來探討其與豬肉質(zhì)性狀測(cè) PHKG1、PHKG2 基因在從江香豬和大白豬不同豬 PHKG1、PHKG2 基因結(jié)構(gòu)功能以及組織表達(dá)生物學(xué)角度研究 PHKG1 和 PHKG2 基因?qū)μ谴挠绊懀瑥亩诰蚺c從江香豬肉質(zhì)性狀相關(guān)候選過程中的作用機(jī)理和調(diào)控機(jī)制,從分子機(jī)制上闡用。

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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本文編號(hào):3215199

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