采集自然感染的兔豆?fàn)钅椅豺�，人工感染犬，收集孕卵�?jié)片，以不同數(shù)量蟲卵感染家兔和小鼠，定期采血，用間接ELISA法檢測(cè)家兔和小鼠的抗體消長(zhǎng)。結(jié)果顯示：家兔自感染后第8d抗體水平開始升高，第43d開始逐漸下降，直至第63d抗體仍呈較高的陽(yáng)性水平。小鼠自感染后第8d抗體水平開始升高，第38d開始逐漸下降，直至第49d抗體仍呈較高的陽(yáng)性水平。結(jié)果表明，在本試驗(yàn)所設(shè)條件下，抗體水平隨感染數(shù)量的增加而升高；感染劑量最大組抗體水平上升得最快，且抗體水平高于其他攻蟲組。對(duì)豆?fàn)顜Ы{蟲不同發(fā)育階段蟲體、豬囊尾蚴囊液、羊腦多頭蚴及其囊液進(jìn)行SDS-PAGE，分離出4⁸條主要蛋白區(qū)帶，分子量范圍為30.4¹14.9ku。以第50d感染家兔血清對(duì)13種蟲體抗原作Western-blot分析，結(jié)果顯示，13種蟲體抗原在59.4ku處均能被兔抗豆?fàn)钅椅豺赎?yáng)性血清識(shí)別。羊腦多頭蚴與豆?fàn)钅椅豺侍禺愋钥乖瓨O相似，共有4條相似帶，表明它們之間存在著交叉反應(yīng)。根據(jù)帶科其他種屬絳蟲18ku基因的保守區(qū)設(shè)計(jì)引物，以豆?fàn)顜Ы{蟲六鉤蚴RNA為模板，進(jìn)行RT-PCR，擴(kuò)增出TPO18完整開放... 

【文章來源】：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)甘肅省

【文章頁(yè)數(shù)】：44 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Summary
主要縮略詞英漢對(duì)照表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 蟲體天然抗原
        1.1 六鉤蚴及其分泌/排泄物
        1.2 原頭蚴及其組分抗原
        1.3 細(xì)胞苗
    2 基因工程疫苗
        2.1 重組蛋白疫苗
        2.2 核酸疫苗
    3 疫苗研究展望
第二章 豆?fàn)钅椅豺嗜斯じ腥炯彝煤托∈蠛罂贵w消長(zhǎng)及豆?fàn)顜Ы{蟲抗原特性分析
    1 材料與方法
        1.1 主要儀器及試劑
        1.2 蟲種及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.3 犬的感染與豆?fàn)顜Ы{蟲蟲卵的獲取
        1.4 蟲體抗原的制備
        1.5 豆?fàn)钅椅豺嗜斯じ腥炯彝煤托∈笤囼?yàn)
        1.6 蟲體蛋白的 SDS-PAGE 和 Western-blot
    2 結(jié)果
        2.1 家兔抗體水平的 ELISA 檢測(cè)
        2.2 SDS-PAGE 和 Western-blot 電泳譜
        2.3 蟲體蛋白分子量
    3 討論
第三章 TPO18 基因的原核表達(dá)與表達(dá)產(chǎn)物的免疫保護(hù)試驗(yàn)
    1 材料與方法
        1.1 質(zhì)粒、菌株及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
        1.4 豆?fàn)顜Ы{蟲六鉤蚴的活化和總 RNA 的提取
        1.5 TPO18 基因的 RT-PCR 擴(kuò)增
        1.6 重組表達(dá)質(zhì)粒 pGEX-TPO18 的構(gòu)建
        1.7 重組蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)及純化
        1.8 重組蛋白的反應(yīng)原性鑒定
        1.9 家兔免疫保護(hù)試驗(yàn)
    2 結(jié)果
        2.1 豆?fàn)顜Ы{蟲 TPO18 基因片段的擴(kuò)增
        2.2 重組質(zhì)粒 pGEX-TPO18 的鑒定
        2.3 重組蛋白的表達(dá)和純化
        2.4 重組蛋白 pGEX-TPO18 的反應(yīng)原性
        2.5 家兔免疫保護(hù)試驗(yàn)
    3 討論
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)歷
導(dǎo)師簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]綿羊腦多頭蚴病45m基因在多頭絳蟲和細(xì)粒棘球絳蟲不同發(fā)育階段同源性的比較[J]. 由弘,張壯志,趙莉,石保新,吐爾洪·依米提,王進(jìn)成,張文寶,崔德勝,艾爾肯,郭金梁.  中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào). 2009(09)
[2]豆?fàn)钅椅豺嗜斯じ腥炯彝每贵w水平的消長(zhǎng)[J]. 王曉霞,駱學(xué)農(nóng),孫曉林,于三科,才學(xué)鵬.  中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2009(04)
[3]兔豆?fàn)钅椅豺屎投範(fàn)顜Ы{蟲頭節(jié)的組織結(jié)構(gòu)觀察[J]. 孫曉林,駱學(xué)農(nóng),王曉霞,才學(xué)鵬.  中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2008(09)
[4]多頭蚴病保護(hù)性基因的分離與表達(dá)[J]. 由弘,張壯志,趙莉,石保新,吐爾洪·依米提,王進(jìn)成,張文寶,崔德勝,艾爾肯,郭金梁.  中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào). 2008(09)
[5]豬囊尾蚴DNA疫苗pVAX1/TSOL18的安全性評(píng)估[J]. 劉斌,才學(xué)鵬,郭愛疆,駱學(xué)農(nóng),陳曉宇,丁軍濤,劉英.  中國(guó)獸醫(yī)寄生蟲病. 2008(05)
[6]家兔豆?fàn)钅椅豺什〉慕M織病理學(xué)研究[J]. 孫曉林,陳懷濤,才學(xué)鵬.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2008(08)
[7]豬帶絳蟲六鉤蚴TSOL18基因疫苗表達(dá)載體的構(gòu)建及其免疫原性研究[J]. 郭愛疆,才學(xué)鵬,房永祥,賈萬(wàn)忠,駱學(xué)農(nóng),劉紅霞.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2008(07)
[8]肉兔豆?fàn)钅椅豺什〉奈：π匝芯縖J]. 周永學(xué),杜愛芳,張雪娟,吳永明,童鳳英,吳廣運(yùn).  浙江農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(03)
[9]細(xì)粒棘球絳蟲轉(zhuǎn)基因植物載體重組pBI-Eg95-EgA31質(zhì)粒構(gòu)建及鑒定[J]. 周輝,李文桂.  中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào). 2008(04)
[10]細(xì)粒棘球絳蟲重組BCG-Eg95疫苗的構(gòu)建及其表達(dá)效率研究[J]. 李文桂,朱佑明.  免疫學(xué)雜志. 2007(05)

博士論文
[1]豬帶絳蟲六鉤蚴45W-4B和TSO18重組基因工程疫苗的研究[D]. 駱學(xué)農(nóng).中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2005



本文編號(hào)：3211059