綿羊梅迪維斯納�。∕aedi visna disease,MVD）是由梅迪維斯納病毒（Maedi visna virus,MVV）引起的一種多器官損傷可傳播的疾病。該病可引起腦、肺臟、乳腺、關(guān)節(jié)等發(fā)生病變,一旦感染,最終引起死亡。MVD嚴(yán)重影響?zhàn)B羊業(yè)發(fā)展,給養(yǎng)羊業(yè)嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。為鑒定內(nèi)蒙古地區(qū)是否存在MVD,本試驗(yàn)從呼和浩特市周邊某屠宰場采集12份病肺組織進(jìn)行病理組織學(xué)和PCR鑒定。病理組織學(xué)結(jié)果顯示:3份肺臟組織均發(fā)生纖維化,并且肺泡腔內(nèi)Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞增生以及間質(zhì)增寬,支氣管和細(xì)支氣管周圍可見較多的淋巴濾泡增生;PCR檢測結(jié)果顯示:有3份肺組織為PCR陽性,測序序列與GenBank已登錄的MVV KJ641278美國株同源率為87.4%;為了進(jìn)一步確定3份肺組織確實(shí)有MVV感染,依據(jù)MVV全序列（登錄號(hào)KJ641278）的LTR區(qū)設(shè)計(jì)1對(duì)引物,結(jié)果3份肺組織均為MVV陽性。通過病理組織學(xué)和PCR鑒定,確定內(nèi)蒙古地區(qū)存在MVD。本試驗(yàn)為建立MVV特異性的巢式PCR檢測方法,根據(jù)GenBank上發(fā)表的MVV（登錄號(hào)KJ641278）基因序列設(shè)計(jì)合成巢式PCR引物,對(duì)采集的肺臟組織進(jìn)行... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

肺臟組織病理切片

２．３．２肺組織ＰＣＲ鑒定??將病理組織切片觀察顯示有ＭＶＤ病變的３份肺組織進(jìn)行ＰＣＲ檢測，擴(kuò)增產(chǎn)??物約８００?ｂｐ，產(chǎn)物大小與預(yù)期片段大小相一致（圖２）。??Ｍ?Ｉ?２?＾?４??■■■■■??２?ＯＯＯ?ｂｐ?■…??１?ＯＯＯ?ｂｐ?Ｉ??７ＳＯ?ｂｐ??５００?ｂｐ??２?ＳＯ?ｂ?ｐ?氣、集??ｌＯＯ?ｂｐ?■??圖２肺組織ＰＣＲ擴(kuò)增的結(jié)果??Ｆｉｇ．２?Ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｌｕｎｇ?ｔｉｓｓｕｅ??標(biāo)準(zhǔn)分了？量ＤＬ２０００；?１：陰性對(duì)照；２？４：病肺組織??Ｍ：ＤＬ２０００?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒｌ：?ｎｅｇａｔｉｖｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ；?２？４：?ｄｉｓｅａｓｅｄ?ｌｕｎｇ?ｔｉｓｓｕｅ??２．３．３同源性分析??選取經(jīng)ＰＣＲ驗(yàn)證正確的ＰＣＲ產(chǎn)物送往生工生物工程有限公司測序，利用??

３?１５－３?Ｊ８．８４?３８６．０?１８．．１?］８５．９３３．９８３－３Ｊ?４．３＾８３－?；?３?］?４?＾１２?７＊１８５＾８０?８７?８?＇?Ｓ５?７?＾?＾０?Ｓ?＇?ＳＢ?４?＾?８８?９?＂?８４?１?＾?８８?７?＊?８Ｓ?３?４?＇?ＫＣ１５５７９６??６?＾１１．４?°１９．５?｛１５．０?Ｉｌ６．１?（１３．１?ＳＨＨ｜８７．４］８８．５?１８４．７?（８１．１?；８４．９?｜８４．４?Ｊ?６?；?ＫＪ６４１２９６??７?！?１０７?Ｊ８ｊ?［ｌ７ｉ３?［１０４?９０７?［８９．３?｜８３．１?＊９０＾〇＇［８５．２！?７?：ＨＱ１５８１３４??８以．１?１〇石１（（（（（｜５＇１４＾＾４?８?；?ＨＲ０１１７５７??９?１３．６?＾２０．３?ｊ?１８：６?｜１２．２?Ｍ３４?［ｌ７．５｜?ｌ１．８?ｊ?１２．０?９０７ｊ?８６．？］?９?｜?ＫＣ１５５７８５??１０?Ｗ．８?＊?１?ｓｉ?ｈ９．３?１１８＾２?１１９．３?Ｔ２２．３?（１９＾５?；?１７＊３?ｈ８．１?ＩＩＰ，?８４．２?＊?８４．５?［＇?１０?］?ＥＶ１－Ｓ５１３９２??１１?ｈ４．０?Ｊ９．１?Ｉｌ８ｉ?｜ｌ￡ｓ?Ｍ２ｉ?｛ｌ７ｉ?ｈｌｉ｜ｌ�。�?ｊｉｏｉ?Ｊ８．０?ｌＢ＾８７．４?Ｉ?１１?Ｉ?ＫＪ６４１２７８??１２?Ｍ６．９?°２０．０?１１９．１?［ｌ６．１?（１７．０?１１Ｔ８?｜１７．０?Ｈａｉ?；?１４．９?°１７．９?１４，１?１２?｜?ＭＶＶ－ＮＭ２０１８???；一１?�。�?２?＂；?３工４＇．［＇５?：?６?］?７＂?｜?８?；…９?１０?＊?１２?：?ｊ??圖３?ＭＶＶ測序的

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]小反芻動(dòng)物慢病毒實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測方法的建立和初步應(yīng)用[D]. 楊義琴.石河子大學(xué) 2018
[2]綿羊肺腺瘤病PCR檢測技術(shù)的建立及exJSRV與enJSRV載量相關(guān)性分析[D]. 郭文慶.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[3]豬流行性腹瀉病毒傳統(tǒng)毒株和變異毒株P(guān)CR鑒別診斷方法的建立與應(yīng)用[D]. 張夢(mèng)巖.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016



本文編號(hào)：3209928