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內(nèi)蒙古地區(qū)綿羊梅迪維斯納病鑒定及PCR檢測(cè)方法的建立

發(fā)布時(shí)間:2021-06-01 07:18
  綿羊梅迪維斯納。∕aedi visna disease,MVD)是由梅迪維斯納病毒(Maedi visna virus,MVV)引起的一種多器官損傷可傳播的疾病。該病可引起腦、肺臟、乳腺、關(guān)節(jié)等發(fā)生病變,一旦感染,最終引起死亡。MVD嚴(yán)重影響?zhàn)B羊業(yè)發(fā)展,給養(yǎng)羊業(yè)嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。為鑒定內(nèi)蒙古地區(qū)是否存在MVD,本試驗(yàn)從呼和浩特市周邊某屠宰場(chǎng)采集12份病肺組織進(jìn)行病理組織學(xué)和PCR鑒定。病理組織學(xué)結(jié)果顯示:3份肺臟組織均發(fā)生纖維化,并且肺泡腔內(nèi)Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞增生以及間質(zhì)增寬,支氣管和細(xì)支氣管周圍可見(jiàn)較多的淋巴濾泡增生;PCR檢測(cè)結(jié)果顯示:有3份肺組織為PCR陽(yáng)性,測(cè)序序列與GenBank已登錄的MVV KJ641278美國(guó)株同源率為87.4%;為了進(jìn)一步確定3份肺組織確實(shí)有MVV感染,依據(jù)MVV全序列(登錄號(hào)KJ641278)的LTR區(qū)設(shè)計(jì)1對(duì)引物,結(jié)果3份肺組織均為MVV陽(yáng)性。通過(guò)病理組織學(xué)和PCR鑒定,確定內(nèi)蒙古地區(qū)存在MVD。本試驗(yàn)為建立MVV特異性的巢式PCR檢測(cè)方法,根據(jù)GenBank上發(fā)表的MVV(登錄號(hào)KJ641278)基因序列設(shè)計(jì)合成巢式PCR引物,對(duì)采集的肺臟組織進(jìn)行... 

【文章來(lái)源】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】:56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

內(nèi)蒙古地區(qū)綿羊梅迪維斯納病鑒定及PCR檢測(cè)方法的建立


肺臟組織病理切片

肺組織,標(biāo)準(zhǔn)分,生物工程,同源性分析


2.3.2肺組織PCR鑒定??將病理組織切片觀察顯示有MVD病變的3份肺組織進(jìn)行PCR檢測(cè),擴(kuò)增產(chǎn)??物約800?bp,產(chǎn)物大小與預(yù)期片段大小相一致(圖2)。??M?I?2?^?4??■■■■■??2?OOO?bp?■…??1?OOO?bp?I??7SO?bp??500?bp??2?SO?b?p?氣、集??lOO?bp?■??圖2肺組織PCR擴(kuò)增的結(jié)果??Fig.2?Results?of?PCR?amplification?of?lung?tissue??標(biāo)準(zhǔn)分了?量DL2000;?1:陰性對(duì)照;2?4:病肺組織??M:DL2000?DNA?Markerl:?negative?control;?2?4:?diseased?lung?tissue??2.3.3同源性分析??選取經(jīng)PCR驗(yàn)證正確的PCR產(chǎn)物送往生工生物工程有限公司測(cè)序,利用??

測(cè)序,檢測(cè)結(jié)果


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【參考文獻(xiàn)】:
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碩士論文
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本文編號(hào):3209928

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