林麝Ⅱ類MHC基因分離與化膿性疾病的相關(guān)性研究
發(fā)布時(shí)間:2021-05-31 23:49
林麝是我國(guó)獸類中具有極高經(jīng)濟(jì)價(jià)值和社會(huì)價(jià)值的一種資源動(dòng)物。雄性林麝的麝香囊腺分泌的麝香在醫(yī)藥和香水行業(yè)具有非常重要的作用。近幾十年來(lái),隨著國(guó)際市場(chǎng)對(duì)麝香的需求量不斷增加以及人為的亂捕亂獵和棲息地破壞,林麝的數(shù)量不斷下降,已到了鄰近滅絕的邊緣。人工養(yǎng)殖林麝已有50多年,但圈養(yǎng)林麝的種群因疾病等多種限制因素的困擾而發(fā)展緩慢。因此,非常有必要對(duì)這一物種展開(kāi)科學(xué)研究,進(jìn)一步加大保護(hù)力度。主要組織相容性復(fù)合體(Major Histocompatibility Complex, MHC)是脊椎動(dòng)物中多態(tài)性最高的一個(gè)超基因家族,其編碼的細(xì)胞膜表面蛋白在識(shí)別、呈遞外來(lái)抗原并引發(fā)下游免疫應(yīng)答反應(yīng)的過(guò)程中發(fā)揮著非常重要的作用,是脊椎動(dòng)物適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的重要組成部分。一個(gè)有功能的MHCⅡ類分子是由一個(gè)α鏈和一個(gè)β鏈非共價(jià)結(jié)合形成的二聚體,其分別由MHCⅡ的A基因和B基因編碼。MHCⅡ類A基因和B基因exon2編碼的抗原結(jié)合區(qū)具有非常高的多態(tài)性,與物種抵抗病原體的能力及適應(yīng)復(fù)雜的環(huán)境直接相關(guān)。本研究以四川養(yǎng)麝研究所的115只林麝個(gè)體為對(duì)象,通過(guò)對(duì)MHCⅡ類經(jīng)典的DR和DQ座位的分離、遺傳變異分析和化膿性疾病相...
【文章來(lái)源】:浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:129 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
致謝
摘要
Abstract
目次
第一部分 文獻(xiàn)綜述
第1章 主要組織相容性復(fù)合體(MHC)及其應(yīng)用
1.1 MHC的分類、組織分布、結(jié)構(gòu)與功能
1.1.1 MHC的分類與組織分布
1.1.2 MHCⅠ類的結(jié)構(gòu)與功能
1.1.3 MHCⅡ類的結(jié)構(gòu)與功能
1.1.4 MHC基因多態(tài)性的維持機(jī)制
1.2 MHC在保護(hù)遺傳學(xué)中的應(yīng)用
第2章 林麝研究綜述
2.1 林麝的生物學(xué)特征
2.1.1 基本形態(tài)特征
2.1.2 分類與分布
2.1.3 食性與繁殖
2.2 林麝的行為、生態(tài)及相關(guān)研究
2.3 林麝的分子生物學(xué)相關(guān)研究
2.4 致危根源與養(yǎng)殖現(xiàn)狀
2.4.1 麝香及致危根源
2.4.2 人工養(yǎng)殖現(xiàn)狀
2.5 林麝化膿性疾病
2.5.1 林麝化膿疾病的癥狀
2.5.2 化膿疾病的病因及防治
第3章 本研究的理論依據(jù)、研究?jī)?nèi)容及研究目的
第二部分 實(shí)驗(yàn)材料與方法
第4章 林麝MHC Ⅱ DR位點(diǎn)的分離
4.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.1.1 樣品來(lái)源
4.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
4.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
4.2 實(shí)驗(yàn)方法及步驟
4.2.1 基因組DNA的提取
4.2.2 林麝DRA位點(diǎn)的分離和等位基因的獲取
4.2.3 林麝DRB位點(diǎn)的分離和等位基因的獲取
4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論
4.3.1 林麝基因組DNA的提取結(jié)果
4.3.2 林麝DRA基因exon 2通用引物調(diào)查結(jié)果
4.3.3 林麝DRA基因exon 2側(cè)翼序列的擴(kuò)增結(jié)果
4.3.4 林麝DRA座位特異性引物群體調(diào)查結(jié)果
4.3.5 林麝DRB基因exon 2通用引物調(diào)查結(jié)果
4.3.6 林麝DRB基因exon 2側(cè)翼序列的擴(kuò)增結(jié)果
4.3.7 林麝DRB座位特異性引物群體調(diào)查結(jié)果
4.4 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
第5章 林麝MHC Ⅱ DQ位點(diǎn)的分離
5.1 實(shí)驗(yàn)材料
5.1.1 樣品來(lái)源
5.1.2 主要的實(shí)驗(yàn)試劑
5.1.3 主要的實(shí)驗(yàn)儀器
5.2 實(shí)驗(yàn)方法和步驟
5.2.1 林麝DQA位點(diǎn)的分離和等位基因的獲取
5.2.2 林麝DQB位點(diǎn)的分離和等位基因的獲取
5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果和討論
5.3.1 林麝DQA基因exon 2-intron 2-exon 3序列的擴(kuò)增結(jié)果
5.3.2 林麝DQA基因exon 2側(cè)翼intron 1序列的擴(kuò)增結(jié)果
5.3.3 林麝DQA1座位特異性引物群體調(diào)查結(jié)果
5.3.4 林麝DQA2座位特異性引物群體調(diào)查結(jié)果
5.3.5 林麝DQB基因exon 2通用引物調(diào)查結(jié)果
5.3.6 林麝DQB基因exon 2側(cè)翼序列擴(kuò)增結(jié)果
5.3.7 林麝DQB1座位特異性引物群體調(diào)查結(jié)果
5.3.8 林麝DQB2座位特異性引物群體調(diào)查結(jié)果
5.4 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
第6章 林麝MHC Ⅱ類基因多態(tài)性及維持機(jī)制
6.1 數(shù)據(jù)處理
6.1.1 序列的處理和分析
6.1.2 系統(tǒng)發(fā)育分析
6.2 基因多態(tài)性及維持機(jī)制
6.2.1 林麝DR基因的遺傳多樣性及維持機(jī)制
6.2.2 林麝DQA基因的遺傳多樣性及維持機(jī)制
6.2.3 林麝DQB基因的遺傳多樣性及維持機(jī)制
6.3 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
第7章 林麝化膿性疾病與MHC Ⅱ基因多態(tài)性的相關(guān)分析
7.1 實(shí)驗(yàn)材料
7.1.1 樣品來(lái)源
7.1.2 主要的實(shí)驗(yàn)試劑
7.1.3 主要的實(shí)驗(yàn)儀器
7.2 實(shí)驗(yàn)方法和步驟
7.2.1 林麝糞便gDNA的提取
7.2.2 林麝糞便基因組DNA的純化
7.2.3 林麝MHC DR & DQ基因的座位特異性PCR
7.2.4 林麝MHC DR & DQ基因exon 2種群變異的SSCP分析
7.3 數(shù)據(jù)處理
7.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果和討論
7.4.1 林麝糞樣基因組的提取結(jié)果
7.4.2 林麝各個(gè)位點(diǎn)的糞樣擴(kuò)增及分型結(jié)果
7.4.3 林麝MHCⅡ基因的基因型、等位基因頻率統(tǒng)計(jì)
7.4.4 林麝MHCⅡ基因易感組和抗病組的X
2適合性檢驗(yàn)
7.4.5 林麝MHCⅡ基因多態(tài)性與膿腫病的關(guān)聯(lián)分析
7.5 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
第三部分 結(jié)論
第8章 主要結(jié)論、創(chuàng)新內(nèi)容及展望
8.1 本研究的主要結(jié)論
8.2 本研究的創(chuàng)新點(diǎn)
8.3 展望
參考文獻(xiàn)
博士期間科研經(jīng)歷
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]麝化膿病細(xì)菌性病原診斷鑒定[J]. 李秋波,顏其貴,康紀(jì)平,李萍,熊衛(wèi)平. 野生動(dòng)物. 2012(04)
[2]發(fā)情周期圈養(yǎng)雌性林麝糞樣孕酮的變化[J]. 郎冬梅,胡德夫,鄒青,王毅花. 特產(chǎn)研究. 2011(04)
[3]林麝疾病預(yù)防與治療[J]. 李亞紅,趙玲愛(ài). 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2011(17)
[4]圈養(yǎng)林麝膿腫病病原菌分離鑒定及藥敏分析[J]. 趙克雷,李旭鑫,帕哈爾定·帕拉哈提,曾博,張修月,岳碧松. 四川動(dòng)物. 2011(04)
[5]四川圍欄養(yǎng)殖林麝采食植物種類調(diào)查[J]. 楊營(yíng),馮達(dá)永,王承旭,王建明,廖婷彬. 四川動(dòng)物. 2011(03)
[6]林麝保護(hù)的現(xiàn)狀及研究進(jìn)展[J]. 吳民耀,王念,惠董娜,王曉雯. 重慶理工大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2011(01)
[7]林麝的人工繁殖技術(shù)[J]. 呂樹(shù)臣,王春清,山宇. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2010(19)
[8]麝香藥用價(jià)值研究[J]. 安談紅. 吉林農(nóng)業(yè). 2010(08)
[9]黃麂Mhc-DRB基因多態(tài)性及其維持機(jī)制[J]. 虞健,梁文明,朱飛虎,徐思,吳海龍. 獸類學(xué)報(bào). 2010(01)
[10]林麝肺炎及化膿性疾病的病理組織學(xué)觀察[J]. 羅燕,程建國(guó),王建明,康紀(jì)平,蔡永華,李秋波,賈煉. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2009(11)
博士論文
[1]大熊貓Ⅱ類MHC功能基因的分離及適應(yīng)性進(jìn)化研究[D]. 陳藝燕.浙江大學(xué) 2009
[2]林麝Moschus berezovskii養(yǎng)殖種群死亡原因及其生命生理特征研究[D]. 劉春燕.華東師范大學(xué) 2008
碩士論文
[1]崇明圈養(yǎng)林麝(Moschus berezovskii)的行為學(xué)研究[D]. 薛程.華東師范大學(xué) 2008
[2]林麝AFLP的多態(tài)性研究及產(chǎn)麝性能的標(biāo)記分析[D]. 陳軒.浙江大學(xué) 2007
本文編號(hào):3209219
【文章來(lái)源】:浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:129 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
致謝
摘要
Abstract
目次
第一部分 文獻(xiàn)綜述
第1章 主要組織相容性復(fù)合體(MHC)及其應(yīng)用
1.1 MHC的分類、組織分布、結(jié)構(gòu)與功能
1.1.1 MHC的分類與組織分布
1.1.2 MHCⅠ類的結(jié)構(gòu)與功能
1.1.3 MHCⅡ類的結(jié)構(gòu)與功能
1.1.4 MHC基因多態(tài)性的維持機(jī)制
1.2 MHC在保護(hù)遺傳學(xué)中的應(yīng)用
第2章 林麝研究綜述
2.1 林麝的生物學(xué)特征
2.1.1 基本形態(tài)特征
2.1.2 分類與分布
2.1.3 食性與繁殖
2.2 林麝的行為、生態(tài)及相關(guān)研究
2.3 林麝的分子生物學(xué)相關(guān)研究
2.4 致危根源與養(yǎng)殖現(xiàn)狀
2.4.1 麝香及致危根源
2.4.2 人工養(yǎng)殖現(xiàn)狀
2.5 林麝化膿性疾病
2.5.1 林麝化膿疾病的癥狀
2.5.2 化膿疾病的病因及防治
第3章 本研究的理論依據(jù)、研究?jī)?nèi)容及研究目的
第二部分 實(shí)驗(yàn)材料與方法
第4章 林麝MHC Ⅱ DR位點(diǎn)的分離
4.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.1.1 樣品來(lái)源
4.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
4.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
4.2 實(shí)驗(yàn)方法及步驟
4.2.1 基因組DNA的提取
4.2.2 林麝DRA位點(diǎn)的分離和等位基因的獲取
4.2.3 林麝DRB位點(diǎn)的分離和等位基因的獲取
4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論
4.3.1 林麝基因組DNA的提取結(jié)果
4.3.2 林麝DRA基因exon 2通用引物調(diào)查結(jié)果
4.3.3 林麝DRA基因exon 2側(cè)翼序列的擴(kuò)增結(jié)果
4.3.4 林麝DRA座位特異性引物群體調(diào)查結(jié)果
4.3.5 林麝DRB基因exon 2通用引物調(diào)查結(jié)果
4.3.6 林麝DRB基因exon 2側(cè)翼序列的擴(kuò)增結(jié)果
4.3.7 林麝DRB座位特異性引物群體調(diào)查結(jié)果
4.4 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
第5章 林麝MHC Ⅱ DQ位點(diǎn)的分離
5.1 實(shí)驗(yàn)材料
5.1.1 樣品來(lái)源
5.1.2 主要的實(shí)驗(yàn)試劑
5.1.3 主要的實(shí)驗(yàn)儀器
5.2 實(shí)驗(yàn)方法和步驟
5.2.1 林麝DQA位點(diǎn)的分離和等位基因的獲取
5.2.2 林麝DQB位點(diǎn)的分離和等位基因的獲取
5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果和討論
5.3.1 林麝DQA基因exon 2-intron 2-exon 3序列的擴(kuò)增結(jié)果
5.3.2 林麝DQA基因exon 2側(cè)翼intron 1序列的擴(kuò)增結(jié)果
5.3.3 林麝DQA1座位特異性引物群體調(diào)查結(jié)果
5.3.4 林麝DQA2座位特異性引物群體調(diào)查結(jié)果
5.3.5 林麝DQB基因exon 2通用引物調(diào)查結(jié)果
5.3.6 林麝DQB基因exon 2側(cè)翼序列擴(kuò)增結(jié)果
5.3.7 林麝DQB1座位特異性引物群體調(diào)查結(jié)果
5.3.8 林麝DQB2座位特異性引物群體調(diào)查結(jié)果
5.4 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
第6章 林麝MHC Ⅱ類基因多態(tài)性及維持機(jī)制
6.1 數(shù)據(jù)處理
6.1.1 序列的處理和分析
6.1.2 系統(tǒng)發(fā)育分析
6.2 基因多態(tài)性及維持機(jī)制
6.2.1 林麝DR基因的遺傳多樣性及維持機(jī)制
6.2.2 林麝DQA基因的遺傳多樣性及維持機(jī)制
6.2.3 林麝DQB基因的遺傳多樣性及維持機(jī)制
6.3 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
第7章 林麝化膿性疾病與MHC Ⅱ基因多態(tài)性的相關(guān)分析
7.1 實(shí)驗(yàn)材料
7.1.1 樣品來(lái)源
7.1.2 主要的實(shí)驗(yàn)試劑
7.1.3 主要的實(shí)驗(yàn)儀器
7.2 實(shí)驗(yàn)方法和步驟
7.2.1 林麝糞便gDNA的提取
7.2.2 林麝糞便基因組DNA的純化
7.2.3 林麝MHC DR & DQ基因的座位特異性PCR
7.2.4 林麝MHC DR & DQ基因exon 2種群變異的SSCP分析
7.3 數(shù)據(jù)處理
7.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果和討論
7.4.1 林麝糞樣基因組的提取結(jié)果
7.4.2 林麝各個(gè)位點(diǎn)的糞樣擴(kuò)增及分型結(jié)果
7.4.3 林麝MHCⅡ基因的基因型、等位基因頻率統(tǒng)計(jì)
7.4.4 林麝MHCⅡ基因易感組和抗病組的X
2適合性檢驗(yàn)
7.4.5 林麝MHCⅡ基因多態(tài)性與膿腫病的關(guān)聯(lián)分析
7.5 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
第三部分 結(jié)論
第8章 主要結(jié)論、創(chuàng)新內(nèi)容及展望
8.1 本研究的主要結(jié)論
8.2 本研究的創(chuàng)新點(diǎn)
8.3 展望
參考文獻(xiàn)
博士期間科研經(jīng)歷
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]麝化膿病細(xì)菌性病原診斷鑒定[J]. 李秋波,顏其貴,康紀(jì)平,李萍,熊衛(wèi)平. 野生動(dòng)物. 2012(04)
[2]發(fā)情周期圈養(yǎng)雌性林麝糞樣孕酮的變化[J]. 郎冬梅,胡德夫,鄒青,王毅花. 特產(chǎn)研究. 2011(04)
[3]林麝疾病預(yù)防與治療[J]. 李亞紅,趙玲愛(ài). 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2011(17)
[4]圈養(yǎng)林麝膿腫病病原菌分離鑒定及藥敏分析[J]. 趙克雷,李旭鑫,帕哈爾定·帕拉哈提,曾博,張修月,岳碧松. 四川動(dòng)物. 2011(04)
[5]四川圍欄養(yǎng)殖林麝采食植物種類調(diào)查[J]. 楊營(yíng),馮達(dá)永,王承旭,王建明,廖婷彬. 四川動(dòng)物. 2011(03)
[6]林麝保護(hù)的現(xiàn)狀及研究進(jìn)展[J]. 吳民耀,王念,惠董娜,王曉雯. 重慶理工大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2011(01)
[7]林麝的人工繁殖技術(shù)[J]. 呂樹(shù)臣,王春清,山宇. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2010(19)
[8]麝香藥用價(jià)值研究[J]. 安談紅. 吉林農(nóng)業(yè). 2010(08)
[9]黃麂Mhc-DRB基因多態(tài)性及其維持機(jī)制[J]. 虞健,梁文明,朱飛虎,徐思,吳海龍. 獸類學(xué)報(bào). 2010(01)
[10]林麝肺炎及化膿性疾病的病理組織學(xué)觀察[J]. 羅燕,程建國(guó),王建明,康紀(jì)平,蔡永華,李秋波,賈煉. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2009(11)
博士論文
[1]大熊貓Ⅱ類MHC功能基因的分離及適應(yīng)性進(jìn)化研究[D]. 陳藝燕.浙江大學(xué) 2009
[2]林麝Moschus berezovskii養(yǎng)殖種群死亡原因及其生命生理特征研究[D]. 劉春燕.華東師范大學(xué) 2008
碩士論文
[1]崇明圈養(yǎng)林麝(Moschus berezovskii)的行為學(xué)研究[D]. 薛程.華東師范大學(xué) 2008
[2]林麝AFLP的多態(tài)性研究及產(chǎn)麝性能的標(biāo)記分析[D]. 陳軒.浙江大學(xué) 2007
本文編號(hào):3209219
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