發(fā)布時間：2021-05-26 13:36

　　野鳥一直被認(rèn)為是禽流感病毒（Avian influenza virus,AIV）的自然宿主。野鳥在眾多亞型AIV的保存、傳播和變異中發(fā)揮極其重要的作用。從家禽以及包括人等哺乳動物體內(nèi)分離到的流感病毒均直接或間接來源于野鳥。為了解我國野鳥種群中AIV的流行情況及其生物學(xué)特性,本研究在2017-2019年期間,從全國主要野鳥棲息地采集新鮮糞便樣品6356份,共分離到25株AIV,AIV分離率約為0.39%。亞型鑒定顯示HA亞型5種,NA亞型4種,形成了7種不同組合,包括3株H3N8、3株H6N1、3株H6N2、1株H6N8、12株H9N2、1株H13N8和2株H16N3。其中,本研究分離的2株H16N3是該亞型AIV在我國西部首次分離。HA基因裂解位點分析發(fā)現(xiàn),本研究所有分離株均為低致病性禽流感病毒,但1株H3N8亞型AIV出現(xiàn)了對哺乳動物致病性增加的分子標(biāo)志（PB2蛋白E627K突變）。遺傳進(jìn)化分析結(jié)果顯示:H3N8、H6、H9N2（12株中的2株）、H13N8和H16N3多亞型共15株病毒的HA基因?qū)儆跉W亞分支,10株H9N2病毒劃分為北美分支;除1株H6N8和1株H9N2病毒的NA基... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
主要符號對照表
第一章 緒論
    1.1 AIV概述
    1.2 AIV病原學(xué)
        1.2.1 AIV的基本結(jié)構(gòu)及理化特性
        1.2.2 AIV的基因組結(jié)構(gòu)特征
        1.2.3 AIV的遺傳變異
    1.3 野鳥在AIV進(jìn)化和傳播中的作用
    1.4 野鳥中AIV流行情況
        1.4.1 亞洲地區(qū)野鳥 AIV 的流行情況
        1.4.2 歐洲地區(qū)野鳥AIV流行情況
        1.4.3 北美地區(qū)野鳥AIV流行情況
    1.5 研究目的及意義
第二章 我國野鳥AIV流行病學(xué)調(diào)查
    2.1 材料
        2.1.1 實驗主要試劑
        2.1.2 SPF雞胚及SPF雞紅細(xì)胞
        2.1.3 實驗主要儀器
    2.2 方法
        2.2.1 樣品采集
        2.2.2 病毒分離鑒定
        2.2.3 病毒純化
        2.2.4 病毒RNA提取及反轉(zhuǎn)錄
        2.2.5 目的片段擴(kuò)增及膠回收
        2.2.6 病毒全基因組序列測定
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 病毒分離
        2.3.2 AIV分離株HA和 NA亞型組合
    2.4 討論
第三章 我國野鳥源AIV遺傳進(jìn)化分析
    3.1 材料與方法
        3.1.1 病毒株挑選
        3.1.2 遺傳進(jìn)化樹繪制
        3.1.3 基因型劃分
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 H3亞型AIV分離株序列及遺傳演化分析
        3.2.2 H6亞型AIV分離株序列及遺傳演化分析
        3.2.3 H9亞型AIV分離株序列及遺傳演化分析
        3.2.4 H13亞型AIV分離株序列及遺傳演化分析
        3.2.5 H16亞型AIV分離株序列及遺傳演化分析
        3.2.6 N1亞型AIV分離株序列及遺傳演化分析
        3.2.7 N2亞型AIV分離株序列及遺傳演化分析
        3.2.8 N3亞型AIV分離株序列及遺傳演化分析
        3.2.9 N8亞型AIV分離株序列及遺傳演化分析
        3.2.10 PB2基因序列及遺傳演化分析
        3.2.11 PB1基因序列及遺傳演化分析
        3.2.12 PA基因序列及遺傳演化分析
        3.2.13 NP基因序列及遺傳演化分析
        3.2.14 M基因序列及遺傳演化分析
        3.2.15 NS基因序列及遺傳演化分析
        3.2.16 基因型劃分
    3.3 討論
第四章 我國野鳥源 H9N2 亞型 AIV 跨種感染家禽致病性研究
    4.1 材料與方法
        4.1.1 病毒株
        4.1.2 實驗動物
        4.1.3 生物安全
        4.1.4 病毒純化
        4.1.5 病毒 EID_(50) 測定
        4.1.6 病毒對SPF雞致病性實驗
    4.2 結(jié)果
        4.2.1病毒EID_(50)
        4.2.2 病毒對SPF雞致病性實驗
    4.3 討論
第五章 我國野鳥源AIV跨種感染哺乳動物致病性研究
    5.1 材料與方法
        5.1.1 病毒株
        5.1.2 實驗動物
        5.1.3 生物安全
        5.1.4 病毒純化
        5.1.5 病毒EID_(50)測定
        5.1.6 病毒對BALB/c小鼠致病性實驗
    5.2 結(jié)果
        5.2.1病毒EID_(50)
        5.2.2 病毒在小鼠體內(nèi)的復(fù)制
        5.2.3 小鼠感染病毒后體重變化
    5.3 討論
第六章 PB2 蛋白自然突變的627K對 H3N8 亞型AIV小鼠致病性的影響
    6.1 材料與方法
        6.1.1 病毒株與主要實驗材料
        6.1.2 實驗主要試劑
        6.1.3 實驗動物
        6.1.4 點突變及反向遺傳重組質(zhì)粒構(gòu)建
        6.1.5 病毒拯救
        6.1.6 救獲病毒EID_(50)測定
        6.1.7 救獲病毒對BALB/c小鼠致病性實驗
    6.2 結(jié)果
        6.2.1 拯救病毒及其序列測定
        6.2.2 救獲病毒 EID50 結(jié)果
        6.2.3 病毒在小鼠體內(nèi)的復(fù)制
        6.2.4 小鼠感染病毒后體重變化
    6.3 討論
第七章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
博士論文
[1]2009-2013年中國H3N8亞型禽流感病毒生物學(xué)特性研究[D]. 崔鵬飛.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016



本文編號：3206461