白細(xì)胞介素15（Interleukin-15, IL-15）是一種多功能細(xì)胞因子,在免疫系統(tǒng)和非免疫系統(tǒng)中具有重要的作用。在免疫系統(tǒng)中,參與免疫應(yīng)答和免疫調(diào)節(jié),包括刺激NK細(xì)胞、B細(xì)胞和T細(xì)胞的產(chǎn)生、激活；在非免疫系統(tǒng)中,可引起肌肉萎縮性刺激和肌肉收縮性反應(yīng),因其在骨骼肌中表達(dá)尤為豐富,而且在運(yùn)動(dòng)的肌肉中表達(dá)量有上升的趨勢(shì),被認(rèn)為是一種重要的肌肉內(nèi)分泌因子,或稱(chēng)為肌因子（myokine）。又因其毒性小,易吸收等特點(diǎn),亦可作為一種新型的免疫佐劑而備受關(guān)注。在生產(chǎn)養(yǎng)殖過(guò)程中,高產(chǎn)仔的遺傳機(jī)制一直是繁殖研究過(guò)程當(dāng)中的熱點(diǎn)。胎盤(pán)作為胎兒成長(zhǎng)的臨時(shí)器官,對(duì)其生長(zhǎng)有重要的影響。在通過(guò)表型選擇來(lái)提高產(chǎn)仔數(shù)未獲得很大進(jìn)展的情況下,胎盤(pán)效率（placental efficiency, PE）作為產(chǎn)仔數(shù)育種的一種重要指標(biāo)越來(lái)越受到重視。本研究首先以山羊?yàn)檠芯繉?duì)象,根據(jù)山羊IL-15基因預(yù)測(cè)的mRNA序列（XM₀05691220）設(shè)計(jì)并合成特異性引物。運(yùn)用RT-PCR方法對(duì)山羊IL-15開(kāi)放閱讀框（ORF）進(jìn)行克隆,擴(kuò)增,鑒定及生物信息學(xué)分析；獲得的成熟肽段與pET-32a（+）連接,... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 白介素-15的研究進(jìn)展
    1.2 IL-15的生物學(xué)功能
    1.3. 胎盤(pán)效率與繁殖性狀的相關(guān)性
    1.4 SNP的定義
第2章 引言
    2.1 研究的背景及意義
    2.2 研究技術(shù)路線
第3章 材料與方法
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 引物設(shè)計(jì)
        3.2.2 總RNA的提取及cDNA的制備
        3.2.3 山羊IL-15生物信息學(xué)分析
    3.3 PET32A-IL-15表達(dá)菌株的構(gòu)建
        3.3.1 大足黑山羊IL?15成熱肽基因的擴(kuò)增與鑒定
        3.3.2 質(zhì)粒的抽提、瘸切與回收
        3.3.3 IL15成熟肽段與pET32a (+)構(gòu)建原核表達(dá)載體pET32a-IL-15
        3.3.4 重組質(zhì)粒pET32a-IL-15轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株大腸桿菌BL21(DE3)
        3.3.5 重組菌的誘導(dǎo)表達(dá)
            3.3.5.1 重組菌的培養(yǎng)及表達(dá)
            3.3.5.2 SDS-PAGE電泳鑒定
        3.3.6 融合蛋白的Western blot分析
        3.3.7 融合蛋白的可溶性分析
    3.4 IL-15基因組織表達(dá)譜的構(gòu)建
    3.5 榮昌豬胎盤(pán)繁殖記錄及性狀分析
    3.6 榮昌豬IL-15基因多態(tài)性及其與胎盤(pán)性狀、繁殖性能的關(guān)聯(lián)分析
第4章 結(jié)果與分析
    4.1 山羊IL-15基因克隆、序列分析與表達(dá)
    4.2 組織表達(dá)譜分析
        4.2.1 制作熒光定量標(biāo)準(zhǔn)曲線
        4.2.2 豬和山羊IL-15組織表達(dá)譜分析
        4.2.3 基因多態(tài)性與胎盤(pán)性狀、繁殖性能的相關(guān)分析
        4.2.4 豬IL-15基因多態(tài)性位點(diǎn)分析
        4.2.5 不同位點(diǎn)的群體遺傳學(xué)分析
        4.2.6 IL-15基因不同基因型與豬胎盤(pán)性狀、繁殖性能的關(guān)聯(lián)分析
第5章 討論
    5.1 山羊IL-15基因的克隆及分析
    5.2 山羊IL-15的誘導(dǎo)表達(dá)
    5.3 IL-15組織表達(dá)熒光定量分析
    5.4 豬IL-15基因多態(tài)性與胎盤(pán)性狀、繁殖性能的相關(guān)性
參考文獻(xiàn)
縮寫(xiě)詞表
致謝
發(fā)表的論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]豬IL-15 cDNA真核表達(dá)載體的構(gòu)建、表達(dá)及其免疫佐劑效應(yīng)[J]. 何謙,陳鉅豪,房紅瑩,盧俊鵬,張欣,崔敏,曾小娜,劉健,羅滿林.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2011(08)
[2]榮昌豬白細(xì)胞介素15成熟肽基因的克隆、表達(dá)及其表達(dá)產(chǎn)物活性檢測(cè)[J]. 駱愛(ài)芳,郭萬(wàn)柱,韓國(guó)全,宋振輝.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2007(12)
[3]豬白細(xì)胞介素15基因的克隆及在大腸桿菌中的表達(dá)[J]. 江云波,方六榮,肖少波,張輝,潘永飛,羅銳,李彬,陳煥春.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2007(08)
[4]長(zhǎng)大母豬胎盤(pán)效率與繁殖性能關(guān)系的研究[J]. 曾書(shū)琴,薛立群,田允波.  中國(guó)畜牧雜志. 2006(11)
[5]長(zhǎng)白、大白母豬胎盤(pán)效率與產(chǎn)仔數(shù)關(guān)系的研究[J]. 張守全,陳文廣,馮定遠(yuǎn),吳同山,陳運(yùn)棣,曹鏡溪.  養(yǎng)豬. 2002(02)



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