豬圓環(huán)病毒2型（porcine circovirus2, PCV2）是無囊膜的小單鏈環(huán)形DNA病毒,其大小約為1.8kb,屬于圓環(huán)病毒科、圓環(huán)病毒屬。根據(jù)PCV2序列分析顯示,PCV2可以分為3個主要的基因型（PCV2a、PCV2b和PCV2c）。PCV2a可以進(jìn)一步分為六個亞型（2A至2F）；PCV2b又可以分為三個亞型（1A1B和1C）。該病毒能引起PCV2相關(guān)疾病（porcine circovirus type2-associated diseases, PCVAD）,臨床癥狀為全身感染、肺炎、腸炎、繁殖障礙與豬皮炎和腎病綜合癥及斷奶仔豬多系統(tǒng)消耗綜合征等癥狀。PCV2已經(jīng)對包括我國在內(nèi)的世界各國養(yǎng)豬業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。豬細(xì)環(huán)病毒（Torque teno sus virus, TTSuV）包含一個單鏈、環(huán)形、無囊膜的DNA,其基因組大小為2.8kb,為指環(huán)病毒亞科,細(xì)環(huán)病毒屬,TTSuV主要包括TTSuVl和TTSuV2。TTSuV1和TTSuV2都有較高的流行率,并且在臨床患病動物中的發(fā)生率要高,與PCVAD和PCV2有明顯聯(lián)系。為了解2012年我國部分地區(qū)臨床患病豬和健康... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
CONTENTS
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 PCV2的分子特征
    1.2 PCV2和其它豬源病毒的混合感染
        1.2.1 豬細(xì)環(huán)病毒
        1.2.2 豬細(xì)小病毒
        1.2.3 豬繁殖與呼吸綜合征病毒
        1.2.4 豬流行性腹瀉病毒
        1.2.5 豬流感病毒
        1.2.6 豬圓環(huán)病毒Ⅰ型
        1.2.7 豬博卡樣病毒
    1.3 PCV2的自然重組
    1.4 PCV2與免疫之間的關(guān)系
        1.4.1 PCV2感染與先天性免疫的關(guān)系
        1.4.2 PCV2核酸的免疫調(diào)節(jié)作用
        1.4.3 PCV2的免疫平衡機(jī)制
        1.4.4 PCV2感染與體液免疫應(yīng)答的關(guān)系
        1.4.5 PCV2感染與細(xì)胞免疫反應(yīng)的關(guān)系
    1.5 研究的目的與意義
2 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 樣品的采集
        2.1.2 實驗動物、細(xì)胞和菌株
        2.1.3 常用的生化試劑
        2.1.4 主要的儀器設(shè)備
    2.2 PCV2感染的分子流行病學(xué)調(diào)查
        2.2.1 樣品總DNA的提取
        2.2.2 引物設(shè)計
        2.2.3 PCR的擴(kuò)增
        2.2.4 PCV2 ORF2的克隆
        2.2.5 PCV-2的序列分析
    2.3 PCV2分離株的基因型分析
        2.3.1 引物設(shè)計
        2.3.2 全基因組的PCR擴(kuò)增
        2.3.3 全基因組的克隆
        2.3.4 基因型分析
        2.3.5 PCV2分離株的重組分析
    2.4 PCV2嵌合病毒的建立
        2.4.1 引物設(shè)計
        2.4.2 PCV嵌合株感染性克隆的構(gòu)建
        2.4.3 PCV嵌合感染性克隆的轉(zhuǎn)染
        2.4.4 嵌合重組病毒的連續(xù)傳代
        2.4.5 嵌合重組病毒的PCR檢測
        2.4.6 間接免疫熒光(IFA)檢測
        2.4.7 嵌合重組病毒TCID50的測定
        2.4.8 嵌合重組PCV的小鼠接種實驗
3 結(jié)果
    3.1 PCV2與TTSUV混合感染的分子流行病學(xué)調(diào)查分析
        3.1.1 PCV2感染的檢測結(jié)果
        3.1.2 PCV2 ORF2基因的序列同源性分析
    3.2 現(xiàn)地PCV2分離株全基因組的克隆與序列分析
        3.2.1 現(xiàn)地PCV2分離株的全基因組的擴(kuò)增、克隆及鑒定
        3.2.2 Cap基因的聚類分析結(jié)果
        3.2.3 Rep基因的聚類分析結(jié)果
        3.2.4 AHF13、AHF14和AHF9的全基因組序列分析
        3.2.5 AHF13、AHF14和AHF9的重組分析結(jié)果
    3.3 PCV嵌合病毒的建立
        3.3.1 重組pcDNA-PCV1-2、pcDNA-PCV2-1和pcNA-PCV2的鑒定
        3.3.2 感染性嵌合克隆株的RT-PCR檢測
        3.3.3 嵌合病毒復(fù)制動力學(xué)的病毒TCID50的測定
        3.3.4 嵌合病毒體外穩(wěn)定性的檢測
        3.3.5 嵌合病毒體內(nèi)組織學(xué)分布的檢測
        3.3.6 嵌合病毒體內(nèi)穩(wěn)定性的檢測
        3.3.7 特異性抗體的檢測
4 討論
    4.1 PCV2感染的調(diào)查
    4.2 PCV2的自然重組
    4.3 PCV嵌合病毒的建立
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3205775