發(fā)布時(shí)間：2021-05-25 15:03

　　哺乳動(dòng)物精子通過(guò)附睪的運(yùn)輸、保護(hù)和儲(chǔ)存過(guò)程中,獲得受精能力,是精子成熟和儲(chǔ)存的主要場(chǎng)所。精子也和其他任何一種細(xì)胞一樣面對(duì)氧化損傷。精子對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化、DNA損傷的進(jìn)攻極為敏感,從而影響活力及受精能力。附睪為精子提供免受外界壓力的環(huán)境并促進(jìn)其成熟。附睪含有一系列抗氧化劑,包括谷胱甘肽過(guò)氧化物酶5（GPx5）,GPx5可以保護(hù)精子免受氧化應(yīng)激,維持公畜生殖道內(nèi)自由基正常水平,促進(jìn)精子發(fā)育成熟,其在提高雄性動(dòng)物繁殖力上發(fā)揮著重要作用。國(guó)內(nèi)現(xiàn)沒(méi)有關(guān)于GPx5基因在駱駝附睪中的研究,因此,本研究以駱駝為研究對(duì)象,檢測(cè)了不同年齡段（三歲、五歲、六歲）駱駝附睪不同部位GPx5的表達(dá)規(guī)律。研究結(jié)果如下:1.采用熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)GPx5基因在不同年齡駱駝附睪不同部位上的mRNA水平表達(dá)情況。結(jié)果表明:各年齡階段（三歲、五歲、六歲）駱駝附睪表達(dá)量存在差異。在三歲駱駝、五歲駱駝及六歲駱駝附睪頭部為GPx5 mRNA的主要表達(dá)部位,表達(dá)量極顯著高于附睪體部和附睪尾部（P<0.01）。五歲駱駝附睪頭部表達(dá)量極顯著高于三歲駱駝和六歲駱駝（P<0.01）,三歲駱附睪頭部表達(dá)量與六歲頭部表達(dá)量無(wú)顯著差... 

【文章來(lái)源】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：48 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語(yǔ)表
1 引言
    1.1 附睪的概述
    1.2 附睪的功能
    1.3 附睪蛋白分泌特點(diǎn)
    1.4 附睪氧化應(yīng)激
        1.4.1 精子與活性氧
        1.4.2 附睪中的主要抗氧化劑
    1.5 附睪特異谷胱甘肽過(guò)氧化物酶-5(GPx5)
        1.5.1 附睪特異谷胱甘肽氧化物酶的結(jié)構(gòu)
        1.5.2 谷胱甘肽過(guò)氧化物酶-5(GPx5)的作用
        1.5.3 GPx5表達(dá)特性
        1.5.4 GPx5表達(dá)調(diào)控
        1.5.5 GPx5基因的功能研究
        1.5.6 GPx5和頂體反應(yīng)的關(guān)系
    1.6 研究目的和意義
2 技術(shù)路線
3 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
    3.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
    3.3 主要儀器
    3.4 實(shí)驗(yàn)方法
        3.4.1 總RNA的提取
        3.4.2 總RNA反轉(zhuǎn)錄
        3.4.3 目的基因熒光定量PCR
        3.4.4 總蛋白的提取
        3.4.5 Western Blot
        3.4.6 石蠟切片
        3.4.7 免疫組化
4 結(jié)果與分析
    4.1 組織總RNA電泳檢測(cè)
    4.2 RT-qPCR產(chǎn)物檢測(cè)
    4.3 GPx5與GAPDH基因RT-qPCR結(jié)果
    4.4 GPx5基因的時(shí)空表達(dá)特異性
    4.5 蛋白濃度測(cè)定
    4.6 GPx5蛋白在不同年齡駱駝附睪上的表達(dá)
    4.7 GPx5蛋白在不同年齡駱駝附睪上的定位
5 討論
6 結(jié)論
7 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]牦牛GPX5基因CDS區(qū)的克隆和表達(dá)研究[J]. 朱江江,袁夢(mèng),李鵬程,趙旺生.  中國(guó)畜牧雜志. 2019(10)
[2]哺乳動(dòng)物附睪特異GPx5功能及其調(diào)節(jié)機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 欒兆進(jìn),張家新.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2018(09)
[3]GPx5在內(nèi)蒙古絨山羊附睪中的表達(dá)[J]. 范曉梅,栗瑞蘭,張通,邊小娜,張家新.  中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(10)
[4]GPx5基因在綿羊附睪上的時(shí)空表達(dá)特性[J]. 烏亞罕,史振丹,烏麗雅蘇,愛(ài)倫高娃,扎木嘎,烏云斯欽,恩和瑪日特,哈斯高娃,娜仁花.  西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2017(04)
[5]人谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的生物信息學(xué)分析[J]. 郭笑,陳冬雪,韓笑,魏景艷,孫晶波,徐廣宇,盛瑜,安麗萍.  北華大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2016(06)
[6]GPX5在成年綿羊附睪中的表達(dá)與蛋白定位[J]. 栗瑞蘭,張通,范曉梅,歐陽(yáng)效晴,張春強(qiáng),曹俊偉,張家新.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2015(24)
[7]綿羊GPx5基因克隆、生物信息學(xué)分析及表達(dá)特性的研究[J]. 張春香,郭云雁,白元生,楊子森,張國(guó)林,焦光月,任有蛇.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2014(07)
[8]谷胱甘肽過(guò)氧化物酶及其合成機(jī)制[J]. 于揚(yáng),魏景艷.  生物物理學(xué)報(bào). 2013(10)
[9]附睪特異谷胱甘肽過(guò)氧化物酶基因調(diào)控的研究進(jìn)展[J]. 張國(guó)林,李振,高晉生,曹寧賢,張春香.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2013(09)
[10]哺乳動(dòng)物Gpx基因家族進(jìn)化選擇和功能分歧研究[J]. 楊紅文,金丹.  重慶師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2012(02)

博士論文
[1]谷胱甘肽過(guò)氧化物酶5在內(nèi)蒙古絨山羊附睪的表達(dá)與調(diào)控[D]. 范曉梅.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[2]綿羊附睪GPx5基因表達(dá)調(diào)控的分子機(jī)制[D]. 烏亞罕.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016

碩士論文
[1]永生化綿羊附睪上皮細(xì)胞系的建立及其生物學(xué)特性分析[D]. 宋慧子.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019
[2]綿羊附睪特異谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GPx5）基因的克隆與表達(dá)[D]. 程彩虹.山西農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013



本文編號(hào)：3205548