IFN-τ和BoLA-Ⅰ在奶牛妊娠早期提高母體子宮對(duì)胎兒的容受性,提供子宮內(nèi)免疫抑制環(huán)境,在建立妊娠穩(wěn)定著床等妊娠免疫問(wèn)題上發(fā)揮了關(guān)鍵性作用。IFN-τ是反芻動(dòng)物的特征性物質(zhì),又被定義為抗黃體溶解蛋白,在妊娠早期被胚胎滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌。由于從IFN-τ出現(xiàn)到消失的時(shí)間非常短暫,所以有關(guān)IFN-τ在反芻動(dòng)物妊娠早期的特異性調(diào)節(jié)功能還不是很清楚。主要組織相容性復(fù)合體（MHC）Ⅰ類抗原在妊娠早期發(fā)揮著在胚胎植入時(shí)抑制免疫排斥的作用,在牛被命名為BoLA-Ⅰ。奶牛子宮對(duì)胎兒的容受性和Bo LA-Ⅰ密切相關(guān)。IFN-τ調(diào)節(jié)BoLA-Ⅰ的機(jī)制尚不明確,妊娠早期母體-胎兒界面的妊娠免疫問(wèn)題需要研究。本研究確認(rèn)了胚胎滋養(yǎng)層分泌的IFN-τ通過(guò)作用于子宮內(nèi)膜腔上皮細(xì)胞表達(dá)Bo LA-Ⅰ,進(jìn)而調(diào)節(jié)早期妊娠免疫的潛在機(jī)制,主要研究?jī)?nèi)容和實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:（1）為了研究妊娠早期的子宮內(nèi)膜變化,我們選取妊娠早期9-20天內(nèi)的三頭奶牛子宮內(nèi)膜組織進(jìn)行組織學(xué)分析,結(jié)果顯示懷孕早期奶牛子宮內(nèi)膜組織明顯增生變厚,且子宮內(nèi)膜腔上皮之間的間隙增寬、血管增多,有利于胚胎對(duì)子宮內(nèi)膜的侵襲與附著以及生長(zhǎng)和發(fā)育;此際子宮內(nèi)膜幾乎沒(méi)有中性... 

【文章來(lái)源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：84 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮寫詞表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 研究背景——奶牛妊娠免疫
    2 IFN-τ——反芻動(dòng)物的“hCG”
    3 BoLA-Ⅰ——牛的Ⅰ型主要組織相容性復(fù)合體
    4 妊娠相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子及信號(hào)通路
    5 研究的目的意義
    6 研究的主要內(nèi)容
第二章 妊娠早期奶牛子宮內(nèi)膜組織檢測(cè)
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 試驗(yàn)材料
            2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
            2.1.2 主要儀器
            2.1.3 主要試劑及耗材
            2.1.4 主要溶液及培養(yǎng)基的配制
        2.2 試驗(yàn)方法
            2.2.1 樣品的采集及預(yù)處理
            2.2.2 引物設(shè)計(jì)
            2.2.3 總RNA的提取與反轉(zhuǎn)錄
            2.2.4 RT-qPCR檢測(cè)
            2.2.5 細(xì)胞蛋白的提取及Western Blot分析
            2.2.6 組織學(xué)檢測(cè)
            2.2.8 數(shù)據(jù)處理分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 奶牛子宮內(nèi)膜組織學(xué)變化
        3.2 奶牛子宮內(nèi)膜組織IL-6 及IL-10 的表達(dá)變化
        3.3 奶牛子宮內(nèi)膜組織IFN-τ 及Bo LA-Ⅰ的表達(dá)變化
        3.4 奶牛子宮內(nèi)膜組織相關(guān)核轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)變化
    4 討論
第三章 奶牛子宮內(nèi)膜腔上皮細(xì)胞的培養(yǎng)及鑒定
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 試驗(yàn)材料
            2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
            2.1.2 主要儀器
            2.1.3 主要試劑及耗材
            2.1.4 主要溶液及培養(yǎng)基的配制
        2.2 試驗(yàn)方法
            2.2.1 樣品的采集及預(yù)處理
            2.2.2 奶牛子宮內(nèi)膜腔上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)及傳代
            2.2.3 奶牛子宮內(nèi)膜腔上皮細(xì)胞的純化
            2.2.4 免疫組化檢測(cè)
            2.2.5 激光共聚焦
    3 結(jié)果
        3.1 奶牛子宮內(nèi)膜腔上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)及傳代
        3.2 奶牛子宮內(nèi)膜腔上皮細(xì)胞免疫組織化學(xué)鑒定
        3.3 奶牛子宮內(nèi)膜腔上皮細(xì)胞激光共聚焦鑒定。
    4 討論
第四章 IFN-τ 對(duì)奶牛子宮內(nèi)膜腔上皮細(xì)胞Bo LA-Ⅰ表達(dá)的影響
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 試驗(yàn)材料
            2.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
            2.1.2 主要儀器
            2.1.3 主要試劑及耗材
            2.1.4 主要溶液及培養(yǎng)基的配制
        2.2 試驗(yàn)方法
            2.2.1 樣品的采集及預(yù)處理
            2.2.2 引物設(shè)計(jì)
            2.2.3 總RNA的提取與反轉(zhuǎn)錄
            2.2.4 RT-qPCR檢測(cè)
            2.2.5 細(xì)胞蛋白的提取及Western Blot分析
            2.2.6 ELISA檢測(cè)
            2.2.7 數(shù)據(jù)處理分析
    3 結(jié)果
        3.1 IFN-τ 對(duì)奶牛子宮內(nèi)膜腔上皮細(xì)胞IL-6 和IL-10 表達(dá)的影響
        3.2 IFN-τ 對(duì)奶牛子宮內(nèi)膜腔上皮細(xì)胞BoLA-Ⅰ表達(dá)的影響
        3.3 IFN-τ 對(duì)奶牛子宮內(nèi)膜腔上皮細(xì)胞妊娠相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的影響
    4 討論
第五章 結(jié)論與展望
    1 結(jié)論
    2 展望
參考文獻(xiàn)
發(fā)表文章
致謝



本文編號(hào)：3203225