馬鼻肺炎（ER）是由同源性較高的兩種α皰疹病毒馬皰疹病毒1型（EHV-1）和馬皰疹病毒4型（EHV-4）引起的馬屬動(dòng)物高度接觸性傳染病的總稱�；荚摬〔粌H表現(xiàn)呼吸道癥狀，更嚴(yán)重的威脅是EHV-1導(dǎo)致妊娠馬的流產(chǎn)并給競(jìng)技馬、種用馬或娛樂(lè)馬造成神經(jīng)損傷。根據(jù)已發(fā)表的EHV-1型gB、gD基因序列，設(shè)計(jì)兩對(duì)特異性引物，擴(kuò)增目的基因，構(gòu)建了原核表達(dá)載體pET-30a-gB、pET-30a-gB-gD，轉(zhuǎn)入大腸桿菌BL21，SDS-PAGE分析表明，表達(dá)的gB、gB-gD分子量為26kD和50kD。Western blotting檢測(cè)顯示，可與馬皰疹病毒1型血清反應(yīng)，顯示出良好的反應(yīng)活性。將純化的gB、gD和gB-gD融合蛋白免疫六周齡健康小鼠，并通過(guò)ELISA及MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)免疫過(guò)的小鼠的血清中特異性抗體含量及脾淋巴細(xì)胞增殖程度。結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，蛋白組的各項(xiàng)指標(biāo)均有顯著提高（P <0.01），而gB-gD融合蛋白組效果最好。為了了解新疆馬鼻肺炎的流行情況，用間接ELISA檢測(cè)2012-2013年采自5個(gè)不同地區(qū)的新疆馬血清。結(jié)果顯示，在3195份樣品中共檢出陽(yáng)性1237份，陽(yáng)性率為... 

【文章來(lái)源】：新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略詞表
第1章 緒論
    1.1 病毒的概述
    1.2 歷史與危害
    1.3 流行病學(xué)
    1.4 致病機(jī)制
    1.5 臨床癥狀
    1.6 病理變化
    1.7 臨床診斷
    1.8 實(shí)驗(yàn)室診斷方法
    1.9 馬鼻肺炎的預(yù)防
    1.10 研究的目的和意義
第2章 馬皰疹病毒 I 型 gB 和 gB-gD 雙基因原核表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)
    2.1 材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.4 討論
第3章 gB、gD 和 gB-gD 雙基因原核表達(dá)蛋白的免疫效果評(píng)價(jià)
    3.1 材料和試劑
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.4 討論
第4章 新疆部分地區(qū)馬鼻肺炎流行病學(xué)調(diào)查
    4.1 材料
    4.2 檢測(cè)方法
    4.3 結(jié)果
    4.4 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]馬皰疹病毒1型gD基因主要中和抗原區(qū)原核表達(dá)載體的構(gòu)建和表達(dá)[J]. 孫建華,何晶,石明,徐全圓,楊夷平,冉多良.  新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2013(02)
[4]一種“高性價(jià)比”切膠純化原核表達(dá)蛋白的方法[J]. 高慎陽(yáng),查恩輝,王珅,周鐵忠,李慧.  中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2010(22)
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博士論文
[1]馬鼻肺炎病毒分子生物學(xué)快速檢測(cè)技術(shù)[D]. 朱來(lái)華.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



本文編號(hào)：3199336