基因Ⅶ型新城疫病毒重組沙門氏菌微環(huán)DNA疫苗的構(gòu)建及免疫效應(yīng)研究
發(fā)布時間:2021-05-19 22:10
新城疫(Newcastle disease,ND)是嚴(yán)重危害禽類養(yǎng)殖的疾病之一。作為我國一類動物疫病,目前防止該病主要手段以疫苗為主,然而目前商品化疫苗依然存在生產(chǎn)成本高、免疫方式繁瑣等缺點。因此研究針對基因Ⅶ型新城疫病毒的新型疫苗具有重要的意義。DNA疫苗由于其不受母源抗體干擾等獨特優(yōu)勢,近年來引起了研究人員極大興趣。然而傳統(tǒng)DNA疫苗由于尺寸等因素的限制減弱了其向細(xì)胞核轉(zhuǎn)移的能力,降低了抗原蛋白的表達(dá)效率,減弱了免疫反應(yīng)。為了克服以上缺點,本研究應(yīng)用微環(huán)DNA(minicircle DNA,mcDNA)作為抗原表達(dá)框。mcDNA是傳統(tǒng)質(zhì)粒在大腸桿菌中通過位點特異性重組得到的一種新穎的小環(huán)超螺旋表達(dá)框,其缺乏抗性標(biāo)記基因、復(fù)制原點等細(xì)菌序列,提高了在臨床應(yīng)用中的安全性。同時利用一種延遲裂解型減毒沙門菌作為疫苗活載體,進(jìn)一步提高疫苗的遞送效率,為新型基因Ⅶ型新城疫疫苗的研發(fā)提供思路。本研究的主要內(nèi)容及結(jié)果如下。1.微環(huán)質(zhì)粒的構(gòu)建本研究選取Cre/loxP系統(tǒng)介導(dǎo)mcDNA的產(chǎn)生,并通過嚴(yán)格真核表達(dá)啟動子PGK來調(diào)控Cre在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá),避免其在進(jìn)入細(xì)胞之前的表達(dá),影響疫苗效果。將片段P...
【文章來源】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省
【文章頁數(shù)】:53 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
1.1 新城疫
1.2 微環(huán)DNA
1.3 位點特異性重組酶系統(tǒng)
1.4 重組減毒沙門菌載體
第二篇 研究內(nèi)容
第一章 微環(huán)質(zhì)粒的構(gòu)建及效果評價
1.1 材料
1.2 方法
1.3 結(jié)果
1.4 討論
1.5 小結(jié)
第二章 基因Ⅶ型新城疫病毒的重組沙門氏菌mc DNA疫苗的構(gòu)建及免疫效果評價
2.1 材料
2.2 方法
2.3 結(jié)果
2.4 討論
2.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
英文縮寫詞表
作者簡介
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]表達(dá)H9N2亞型禽流感病毒HA2蛋白的延遲裂解型沙門菌DNA疫苗載體的構(gòu)建[J]. 王占楠,劉晶,王棋,姚心茹,王成宇,胡譯文,楊桂連,姜延龍,王春鳳. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2017(07)
[2]HBV微環(huán)DNA重組質(zhì)粒的構(gòu)建及初步藥效學(xué)實驗[J]. 饒桂榮,張換敬,黃彬,陳光明,王洪敏,楊富強(qiáng). 傳染病信息. 2015(02)
[3]豬LIAS基因微環(huán)表達(dá)載體的構(gòu)建[J]. 高會貞,王曉婷,郭豫杰,韓立強(qiáng),魯維飛,楊國宇. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2014(03)
[4]小環(huán)載體介導(dǎo)的siRNA穩(wěn)定抑制乙肝病毒的復(fù)制和表達(dá)[J]. 劉曉曼,楊倬,馮濤. 微生物學(xué)報. 2012(02)
[5]新城疫疫苗的研究進(jìn)展[J]. 葛鑫,路學(xué)華,劉懷然,閆麗輝,劉培欣,孔憲剛,馮新暢. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2008(02)
[6]雞新城疫病毒HeB02分離株F基因的克隆及其DNA疫苗的研究[J]. 李楠,孫一敏,趙寶華. 生物工程學(xué)報. 2006(03)
[7]攜帶新城疫病毒DNA疫苗的鼠傷寒沙門氏菌及其安全性與免疫效力[J]. 潘志明,焦新安,黃金林,殷月蘭,唐麗華,張輝,張曉明,張小榮,劉秀梵. 微生物學(xué)報. 2005(06)
[8]雞新城疫口服DNA疫苗的安全性、穩(wěn)定性與免疫效力[J]. 梁雪芽,方維煥,江玲麗. 生物工程學(xué)報. 2003(01)
[9]新城疫病毒的研究現(xiàn)狀[J]. 劉長梅. 山東家禽. 2002(03)
本文編號:3196523
【文章來源】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省
【文章頁數(shù)】:53 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
1.1 新城疫
1.2 微環(huán)DNA
1.3 位點特異性重組酶系統(tǒng)
1.4 重組減毒沙門菌載體
第二篇 研究內(nèi)容
第一章 微環(huán)質(zhì)粒的構(gòu)建及效果評價
1.1 材料
1.2 方法
1.3 結(jié)果
1.4 討論
1.5 小結(jié)
第二章 基因Ⅶ型新城疫病毒的重組沙門氏菌mc DNA疫苗的構(gòu)建及免疫效果評價
2.1 材料
2.2 方法
2.3 結(jié)果
2.4 討論
2.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
英文縮寫詞表
作者簡介
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]表達(dá)H9N2亞型禽流感病毒HA2蛋白的延遲裂解型沙門菌DNA疫苗載體的構(gòu)建[J]. 王占楠,劉晶,王棋,姚心茹,王成宇,胡譯文,楊桂連,姜延龍,王春鳳. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2017(07)
[2]HBV微環(huán)DNA重組質(zhì)粒的構(gòu)建及初步藥效學(xué)實驗[J]. 饒桂榮,張換敬,黃彬,陳光明,王洪敏,楊富強(qiáng). 傳染病信息. 2015(02)
[3]豬LIAS基因微環(huán)表達(dá)載體的構(gòu)建[J]. 高會貞,王曉婷,郭豫杰,韓立強(qiáng),魯維飛,楊國宇. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2014(03)
[4]小環(huán)載體介導(dǎo)的siRNA穩(wěn)定抑制乙肝病毒的復(fù)制和表達(dá)[J]. 劉曉曼,楊倬,馮濤. 微生物學(xué)報. 2012(02)
[5]新城疫疫苗的研究進(jìn)展[J]. 葛鑫,路學(xué)華,劉懷然,閆麗輝,劉培欣,孔憲剛,馮新暢. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2008(02)
[6]雞新城疫病毒HeB02分離株F基因的克隆及其DNA疫苗的研究[J]. 李楠,孫一敏,趙寶華. 生物工程學(xué)報. 2006(03)
[7]攜帶新城疫病毒DNA疫苗的鼠傷寒沙門氏菌及其安全性與免疫效力[J]. 潘志明,焦新安,黃金林,殷月蘭,唐麗華,張輝,張曉明,張小榮,劉秀梵. 微生物學(xué)報. 2005(06)
[8]雞新城疫口服DNA疫苗的安全性、穩(wěn)定性與免疫效力[J]. 梁雪芽,方維煥,江玲麗. 生物工程學(xué)報. 2003(01)
[9]新城疫病毒的研究現(xiàn)狀[J]. 劉長梅. 山東家禽. 2002(03)
本文編號:3196523
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