本試驗對目前常用的梅花鹿精液冷凍稀釋液進行了優(yōu)化研究，探討了適于梅花鹿精液冷凍保存的平衡時間及解凍方法。試驗利用精子動力分析儀、低滲腫脹試驗（HOST）、姬姆薩染色法分別測定精子活率、運動參數(shù)、質(zhì)膜完整率和頂體完整率。試驗結(jié)果如下：1.為篩選梅花鹿精液冷凍稀釋液最佳甘油濃度，本試驗在梅花鹿常用冷凍稀釋液的基礎(chǔ)上設(shè)計4%、6%、8%三個甘油濃度梯度，分析不同濃度甘油對精子的冷凍保存效果。結(jié)果表明，稀釋液中添加6%甘油精子解凍后活率為62.00%，直線運動百分比為44.22%，質(zhì)膜完整率為40.00%，頂體完整率為59.50%，VCL為116.86μm/s，均顯著高于其他處理組（P<0.05）。2.甘油作為冷凍保護劑對精子有一定毒害作用，很多研究也在探討其他冷凍保護劑對精子的保護作用，以求找出新的低毒保護劑。本試驗用DMF（二甲基甲酰胺）、EG（乙二醇）兩種冷凍保護劑部分替代和全部替代甘油，甘油添加組為對照組，分析這兩種保護劑對梅花鹿精液的冷凍保護效果。結(jié)果表明，4%EG可以完全替代甘油，精子解凍后活率為42.33%，質(zhì)膜完整率為39.83%，頂體完整率為35.00%，存活指數(shù)為92... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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摘要
Abstract
英文縮略表
第一章 緒論
    1.1 家畜精液冷凍保存歷史及研究現(xiàn)狀
    1.2 鹿科動物精液冷凍保存研究進展
        1.2.1 國內(nèi)鹿科動物精液冷凍保存研究進展
        1.2.2 國外鹿科動物精液冷凍保存研究進展
    1.3 精子冷凍損傷
        1.3.1 冰晶損傷
        1.3.2 細胞膜損傷
        1.3.3 細胞冷休克
    1.4 精液稀釋液的成分及其作用
        1.4.1 冷凍保護劑
        1.4.2 低溫保護劑
        1.4.3 維持滲透壓物質(zhì)
        1.4.4 抑菌物質(zhì)
    1.5 精液冷凍形式
    1.6 精子質(zhì)量評價
        1.6.1 理化性質(zhì)
        1.6.2 精子活率
        1.6.3 質(zhì)膜完整率
        1.6.4 頂體完整率
        1.6.5 線粒體活性
        1.6.6 DNA 完整性
        1.6.7 受精能力
    1.7 本試驗的意義
第二章 不同甘油濃度對梅花鹿精液冷凍效果的影響
    2.1 前言
    2.2 材料及方法
        2.2.1 試驗動物
        2.2.2 主要藥品與試劑
        2.2.3 儀器設(shè)備
        2.2.4 溶液配制
    2.3 試驗方法
        2.3.1 冷凍稀釋液的配制
        2.3.2 精液采集與稀釋
        2.3.3 精液分裝、冷凍
        2.3.4 凍后精子質(zhì)量評價
        2.3.5 數(shù)據(jù)處理
    2.4 結(jié)果及分析
        2.4.1 不同甘油濃度對精子解凍后生理指標的影響
        2.4.2 不同甘油濃度對精子解凍后運動參數(shù)的影響
        2.4.3 不同甘油濃度對精子解凍后存活時間的影響
    2.5 討論
第三章 DMF、EG 對梅花鹿精液冷凍效果的影響
    3.1 前言
    3.2 材料及方法
        3.2.1 試驗動物
        3.2.2 主要藥品與試劑
    3.3 試驗方法
        3.3.1 冷凍稀釋液的配制
        3.3.2 精液采集與稀釋
        3.3.3 精液分裝、冷凍
        3.3.4 凍后精子質(zhì)量評價
        3.3.5 數(shù)據(jù)處理
    3.4 結(jié)果及分析
        3.4.1 EG 全部替代甘油對精子解凍后生理指標的影響
        3.4.2 EG 全部替代甘油對精子解凍后運動參數(shù)的影響
        3.4.3 EG 全部替代甘油對精子解凍后存活時間的影響
        3.4.4 DMF 部分替代甘油對精子解凍后生理指標的影響
        3.4.5 DMF 部分替代甘油對精子解凍后運動參數(shù)的影響
        3.4.6 DMF 部分替代甘油對精子解凍后存活時間的影響
    3.5 討論
第四章 不同糖對梅花鹿精液冷凍效果的影響
    4.1 前言
    4.2 材料及方法
        4.2.1 試驗動物
        4.2.2 主要藥品與試劑
    4.3 試驗方法
        4.3.1 冷凍稀釋液的配制
        4.3.2 精液采集與稀釋
        4.3.3 精液分裝、冷凍
        4.3.4 凍后精子質(zhì)量評價
        4.3.5 數(shù)據(jù)處理
    4.4 結(jié)果及分析
        4.4.1 不同糖對精子解凍后生理指標的影響
        4.4.2 不同糖對精子解凍后運動參數(shù)的影響
        4.4.3 不同糖對精子解凍后存活時間的影響
    4.5 討論
第五章 平衡時間對梅花鹿精液冷凍效果的影響
    5.1 前言
    5.2 材料及方法
        5.2.1 試驗動物
        5.2.2 主要藥品與試劑
    5.3 試驗方法
        5.3.1 冷凍稀釋液的配制
        5.3.2 精液采集與稀釋
        5.3.3 精液平衡
        5.3.4 精液分裝、冷凍
        5.3.5 凍后精子質(zhì)量評價
        5.3.6 數(shù)據(jù)處理
    5.4 結(jié)果及分析
        5.4.1 不同平衡時間對精子解凍后生理指標的影響
        5.4.2 不同平衡時間對精子解凍后運動參數(shù)的影響
        5.4.3 不同平衡時間對精子解凍后存活時間的影響
    5.5 討論
第六章 不同解凍方法對梅花鹿精液冷凍效果的影響
    6.1 前言
    6.2 材料及方法
        6.2.1 試驗動物
        6.2.2 主要藥品與試劑
    6.3 試驗方法
        6.3.1 冷凍稀釋液的配制
        6.3.2 精液采集與稀釋
        6.3.3 精液分裝、冷凍
        6.3.4 精液解凍
        6.3.5 凍后精子質(zhì)量評價
        6.3.6 數(shù)據(jù)處理
    6.4 結(jié)果及分析
        6.4.1 不同解凍方法對精子解凍后生理指標的影響
        6.4.2 不同解凍方法對精子解凍后運動參數(shù)的影響
        6.4.3 不同解凍方法對精子解凍后存活時間的影響
    6.5 討論
第七章 結(jié)論
參考文獻
附錄
致謝
作者簡介


【參考文獻】：
期刊論文
[1]不同濃度乙二醇和甘油對犬精液冷凍效果的影響[J]. 高雅,羅桂河,李衛(wèi)東,李復(fù)煌,孟丹娜,康蕊,秦秀蕊,倪和民.  中國農(nóng)學(xué)通報. 2010(08)
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[3]解凍速度對馬鹿精子參數(shù)的影響[J]. 周佳勃,岳順利,朱赫,毛冠平,付春暉,高利.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2008(08)
[4]天山馬鹿細管凍精的制備和應(yīng)用[J]. 高慶華,韓春梅,魏海軍,周虛.  中國獸醫(yī)學(xué)報. 2008(07)
[5]塔里木馬鹿冷凍精液稀釋液的試驗報告[J]. 李建梅,宮國令,苗德成.  當(dāng)代畜牧. 2007(06)
[6]馬鹿電刺激采精及精液冷凍保存[J]. 李昊幫,李武.  養(yǎng)殖技術(shù)顧問. 2006(02)
[7]影響山羊體外受精的因素[J]. 周佳勃,吳延光,羅明久,韓東,劉麗清,常仲樂,譚景和.  動物學(xué)報. 2004(02)
[8]梅花鹿人工授精配套新技術(shù)研究[J]. 王柏林,趙裕方,張殿宇,李占武,楊立祥,馬殿臣,艾永利.  特產(chǎn)研究. 2002(04)
[9]乙二醇對綿羊凍精效果的研究[J]. 劉玉峰,李武,蘭翠.  中國草食動物. 2002(06)
[10]中國梅花鹿地史分布、種和亞種的劃分及演化歷史[J]. 郭延蜀,鄭惠珍.  獸類學(xué)報. 2000(03)

博士論文
[1]豬精液冷凍保存研究[D]. 胡建宏.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2006

碩士論文
[1]低密度脂蛋白、大豆卵磷脂和海藻糖對豬精液冷凍保存效果的影響[D]. 呂瑞凱.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2011
[2]二甲基甲酰胺與兩種多糖對豬精液冷凍保存效果的研究[D]. 劉宏.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2010
[3]兩種多糖和低密度脂蛋白對牛精液冷凍保存效果的研究[D]. 周圣賢.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2009
[4]三種糖類和抗氧化劑對豬精子冷凍保存效果的研究[D]. 李文燁.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2007



本文編號：3196439