為了提高豬繁殖與呼吸綜合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）在Marc-145細(xì)胞中的增殖效價(jià),本研究旨在篩選出一株對(duì)該病毒易感度高的Marc-145細(xì)胞株。采用有限稀釋法從母代細(xì)胞中分離單細(xì)胞克隆株,通過(guò)RT-PCR的方法測(cè)定毒株在克隆細(xì)胞上的核酸量,通過(guò)TCID₅₀檢測(cè)毒株對(duì)克隆細(xì)胞株的易感性,同時(shí)進(jìn)行細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)繪制。結(jié)果表明,獲得2-D4、2-E6、 2-C8、2-G9、2-H11株共5株Marc-145克隆細(xì)胞。接毒72 h后,2-D4、2-E6、2-C8和2-H11株細(xì)胞出現(xiàn)明顯細(xì)胞病變,2-G9株和母代細(xì)胞培養(yǎng)上清液核酸檢測(cè)呈陽(yáng)性,但未出現(xiàn)細(xì)胞病變。同時(shí),2-D4株對(duì)PRRSV毒株高度易感,該克隆細(xì)胞的分裂增殖能力要強(qiáng)于其他克隆株。綜合上述試驗(yàn)結(jié)果,2-D4株更適宜于PRRSV培養(yǎng),因此采用有限稀釋法篩選對(duì)PRRSV易感的Marc-145細(xì)胞是一種可行的科學(xué)研究方法。 

【文章來(lái)源】：畜牧與獸醫(yī). 2020,52(11)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 單細(xì)胞克隆
    1.3 RT-PCR的檢測(cè)
    1.4 病毒核酸的定量 PCR 比較
    1.5 測(cè)定PRRSV在各克隆株上的增殖情況
    1.6 Marc-145細(xì)胞各克隆株生長(zhǎng)曲線(xiàn)繪制
2 結(jié)果
    2.1 細(xì)胞克隆
    2.2 PRRSV在各克隆株上的增殖情況
    2.3 單克隆細(xì)胞病毒滴度檢測(cè)
    2.4 Marc-145細(xì)胞可用克隆株及原始株生長(zhǎng)情況
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3190164