對豬繁殖與呼吸綜合征病毒易感的Marc-145細胞克隆株的篩選
發(fā)布時間:2021-05-16 18:14
為了提高豬繁殖與呼吸綜合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)在Marc-145細胞中的增殖效價,本研究旨在篩選出一株對該病毒易感度高的Marc-145細胞株。采用有限稀釋法從母代細胞中分離單細胞克隆株,通過RT-PCR的方法測定毒株在克隆細胞上的核酸量,通過TCID50檢測毒株對克隆細胞株的易感性,同時進行細胞生長曲線繪制。結(jié)果表明,獲得2-D4、2-E6、 2-C8、2-G9、2-H11株共5株Marc-145克隆細胞。接毒72 h后,2-D4、2-E6、2-C8和2-H11株細胞出現(xiàn)明顯細胞病變,2-G9株和母代細胞培養(yǎng)上清液核酸檢測呈陽性,但未出現(xiàn)細胞病變。同時,2-D4株對PRRSV毒株高度易感,該克隆細胞的分裂增殖能力要強于其他克隆株。綜合上述試驗結(jié)果,2-D4株更適宜于PRRSV培養(yǎng),因此采用有限稀釋法篩選對PRRSV易感的Marc-145細胞是一種可行的科學研究方法。
【文章來源】:畜牧與獸醫(yī). 2020,52(11)北大核心
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 單細胞克隆
1.3 RT-PCR的檢測
1.4 病毒核酸的定量 PCR 比較
1.5 測定PRRSV在各克隆株上的增殖情況
1.6 Marc-145細胞各克隆株生長曲線繪制
2 結(jié)果
2.1 細胞克隆
2.2 PRRSV在各克隆株上的增殖情況
2.3 單克隆細胞病毒滴度檢測
2.4 Marc-145細胞可用克隆株及原始株生長情況
3 討論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]適用于生產(chǎn)H5N1流感疫苗的MDCK亞克隆細胞的篩選及檢定[J]. 黃曉媛,張家友,劉洋,趙巍,施金榮,樂欣如,喻剛,韓錫鑫,楊曉明. 中華微生物學和免疫學雜志. 2019 (02)
[2]豬瘟兔化弱毒株(C株)ST敏感細胞的克隆和鑒別[J]. 商曉桂,韓志玲,畢力格,高永偉,閆聰,郝鵬,張貴剛,劉國英. 現(xiàn)代畜牧獸醫(yī). 2019(01)
[3]牛病毒性腹瀉/黏膜病毒敏感MDBK細胞克隆與鑒定[J]. 劉國英,范秀麗,韓志玲,閆聰,楊波,郝鵬,張貴剛,陳九連,商曉桂. 畜牧獸醫(yī)科學(電子版). 2019(01)
[4]益于豬圓環(huán)病毒2型增殖的PK-15細胞系的克隆篩選與應用[J]. 白滿元,柳海云,張韻,孫世琪,郭慧琛. 中國獸醫(yī)科學. 2018(12)
[5]豬細小病毒H株ST細胞系高敏感性細胞的克隆[J]. 任德強,張立恒,宋新剛. 畜牧獸醫(yī)科技信息. 2018(03)
[6]BHK-21單細胞克隆敏感株篩選及日本腦炎病毒分離[J]. 向衛(wèi)軍,楊濤濤,李潤成,余興龍. 動物醫(yī)學進展. 2017(05)
[7]現(xiàn)代商品仔豬傳代腎細胞株的培育與應用研究[J]. 胡鴻惠,吳靜波,黃健強,南文金,于文濤. 中國畜牧獸醫(yī). 2017(02)
[8]PCV2-PRV-PRRSV-CSFV多重PCR檢測方法的建立[J]. 左奕,王建永,袁萬哲,孫繼國. 中國獸醫(yī)科學. 2015(08)
[9]適合豬圓環(huán)病毒2生長的PK15均質(zhì)細胞株的構(gòu)建[J]. 羅維,趙墩,蔣大良,余興龍. 湖南農(nóng)業(yè)大學學報(自然科學版). 2013(04)
[10]病毒感染對細胞周期調(diào)控影響的研究進展[J]. 周雪紅,李凱. 微生物學免疫學進展. 2012(06)
碩士論文
[1]豬瘟病毒高感染性PK-15細胞單克隆細胞株的篩選[D]. 孔令蕓.河南科技學院 2015
[2]Marc-145細胞周期同步化及PRRSV細胞受體表達與病毒感染的關(guān)系[D]. 孔寧.山東農(nóng)業(yè)大學 2013
本文編號:3190164
【文章來源】:畜牧與獸醫(yī). 2020,52(11)北大核心
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 單細胞克隆
1.3 RT-PCR的檢測
1.4 病毒核酸的定量 PCR 比較
1.5 測定PRRSV在各克隆株上的增殖情況
1.6 Marc-145細胞各克隆株生長曲線繪制
2 結(jié)果
2.1 細胞克隆
2.2 PRRSV在各克隆株上的增殖情況
2.3 單克隆細胞病毒滴度檢測
2.4 Marc-145細胞可用克隆株及原始株生長情況
3 討論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]適用于生產(chǎn)H5N1流感疫苗的MDCK亞克隆細胞的篩選及檢定[J]. 黃曉媛,張家友,劉洋,趙巍,施金榮,樂欣如,喻剛,韓錫鑫,楊曉明. 中華微生物學和免疫學雜志. 2019 (02)
[2]豬瘟兔化弱毒株(C株)ST敏感細胞的克隆和鑒別[J]. 商曉桂,韓志玲,畢力格,高永偉,閆聰,郝鵬,張貴剛,劉國英. 現(xiàn)代畜牧獸醫(yī). 2019(01)
[3]牛病毒性腹瀉/黏膜病毒敏感MDBK細胞克隆與鑒定[J]. 劉國英,范秀麗,韓志玲,閆聰,楊波,郝鵬,張貴剛,陳九連,商曉桂. 畜牧獸醫(yī)科學(電子版). 2019(01)
[4]益于豬圓環(huán)病毒2型增殖的PK-15細胞系的克隆篩選與應用[J]. 白滿元,柳海云,張韻,孫世琪,郭慧琛. 中國獸醫(yī)科學. 2018(12)
[5]豬細小病毒H株ST細胞系高敏感性細胞的克隆[J]. 任德強,張立恒,宋新剛. 畜牧獸醫(yī)科技信息. 2018(03)
[6]BHK-21單細胞克隆敏感株篩選及日本腦炎病毒分離[J]. 向衛(wèi)軍,楊濤濤,李潤成,余興龍. 動物醫(yī)學進展. 2017(05)
[7]現(xiàn)代商品仔豬傳代腎細胞株的培育與應用研究[J]. 胡鴻惠,吳靜波,黃健強,南文金,于文濤. 中國畜牧獸醫(yī). 2017(02)
[8]PCV2-PRV-PRRSV-CSFV多重PCR檢測方法的建立[J]. 左奕,王建永,袁萬哲,孫繼國. 中國獸醫(yī)科學. 2015(08)
[9]適合豬圓環(huán)病毒2生長的PK15均質(zhì)細胞株的構(gòu)建[J]. 羅維,趙墩,蔣大良,余興龍. 湖南農(nóng)業(yè)大學學報(自然科學版). 2013(04)
[10]病毒感染對細胞周期調(diào)控影響的研究進展[J]. 周雪紅,李凱. 微生物學免疫學進展. 2012(06)
碩士論文
[1]豬瘟病毒高感染性PK-15細胞單克隆細胞株的篩選[D]. 孔令蕓.河南科技學院 2015
[2]Marc-145細胞周期同步化及PRRSV細胞受體表達與病毒感染的關(guān)系[D]. 孔寧.山東農(nóng)業(yè)大學 2013
本文編號:3190164
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