布魯氏菌�。╞rucellosis，簡稱布�。┦怯刹剪斒暇鸬囊环N人獸共患病。該病廣泛分布于世界各地，有170多個國家存在人畜布病。2000年以后，我國人畜布病的發(fā)病率呈逐年上升的趨勢，給人類健康和畜牧業(yè)發(fā)展帶來了巨大的危害。布魯氏菌屬中的牛、羊、豬、犬種布魯氏菌不但可以感染家畜，而且均可以感染人類，是危害最為嚴重的種型。我國人畜布病中多種型感染的現(xiàn)象較為常見。牧區(qū)牛羊的養(yǎng)殖量大，人畜布病的疫情尤為嚴重。豬布病引起的感染現(xiàn)象不如牛羊布病疫情嚴重，不過豬布病引起人感染的報道也不少。我國犬的飼養(yǎng)量巨大，犬感染布魯氏菌已得到證實。由于犬與人的接觸密切，犬布病對人類構成了潛在威脅。目前，我國現(xiàn)有的布病病原學診斷方法均不能有效地區(qū)別牛、羊、豬、犬種布魯氏菌。因此，研究一種能同時檢測牛、羊、豬、犬種布魯氏菌的多重PCR方法并組裝出試劑盒，對于布病的流行病學調查和防控均具有重要的意義。本研究首先對牛、羊、豬、犬種布魯氏菌的基因序列進行了生物信息學分析，根據(jù)牛、羊種布魯氏菌在ABC轉運結合蛋白（BR0951-BR0955）上缺失2653個堿基，犬種布魯氏菌在wbkF-wbkD區(qū)域缺失351個堿基，以... 

【文章來源】：中國人民解放軍軍事科學院北京市

【文章頁數(shù)】：96 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略詞表
中文摘要
Abstract
前言
第一篇 研究內容
    第一章 牛羊豬犬種布魯氏菌多重 PCR 檢測方法的建立
        1 材料與方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結果
            2.1 單對引物的 PCR 擴增
            2.2 單對引物 PCR 擴增產(chǎn)物的序列驗證
            2.3 單對引物 PCR 的特異性
            2.4 多重 PCR 反應的建立
            2.5 多重 PCR 反應的優(yōu)化
            2.6 多重 PCR 反應的特異性
            2.7 多重 PCR 反應的靈敏度
            2.8 多重 PCR 反應的重復性
            2.9 混合病原菌的檢測
        3 討論
            3.1 引物的設計
            3.2 多重 PCR 的影響因素
            3.3 多重 PCR 的初步評價
        4 小結
    第二章 牛羊豬犬種布魯氏菌檢測試劑盒的組裝及初步應用
        1 材料與方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結果
            2.1 陽性質控品的制備
            2.2 試劑盒的性能評價
            2.3 樣本檢測
        3 討論
            3.1 試劑盒的組裝
            3.2 試劑盒的性能評價
            3.3 試劑盒的應用
        4 小結
    結論
第二篇 文獻綜述
    第一章 布魯氏菌病概述
        1 布魯氏菌病的流行病學
        2 布魯氏菌病的病原體
        3 布魯氏菌病的傳播
        4 布魯氏菌病的臨床癥狀
        5 布魯氏菌病的防控
    第二章 布魯氏菌病檢測方法的研究進展
        1 細菌學檢測
        2 血清學檢測
            2.1 試管凝集試驗
            2.2 虎紅平板凝集試驗
            2.3 微量凝集試驗
            2.4 乳汁環(huán)狀凝集試驗
            2.5 抗人免疫球蛋白試驗
            2.6 免疫捕獲凝集試驗
            2.7 補體結合試驗
            2.8 免疫膠體金層析法
            2.9 酶聯(lián)免疫吸附試驗
            2.10 熒光偏振測定法
        3 分子生物學檢測法
            3.1 PCR 技術
            3.2 PCR 衍生技術
參考文獻
附錄
個人簡歷
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]全國布氏菌病干預試點縣布氏菌病經(jīng)濟損失調查[J]. 劉鳳岐,王大力,王季秋,李鐵鋒,趙永利,冮森林.  中國地方病防治雜志. 2008(06)
[2]多重PCR特異檢測布魯氏菌方法的建立[J]. 杜昕穎,陳澤良,王玉飛,喬鳳,趙瑾,苑錫銅,黃留玉.  解放軍預防醫(yī)學雜志. 2008(05)
[3]布魯氏菌VirB8-PCR方法的建立[J]. 鐘旗,范偉興,吳冬玲,蔡一非,何倩倪,熱合木江 達吾提,谷文喜,趙兵,吐爾洪.  中國人獸共患病學報. 2008(01)

碩士論文
[1]食源性致病菌快速檢測方法的建立及其試劑盒的研制與應用[D]. 周明東.山東農(nóng)業(yè)大學 2012



本文編號：3189631