脂肪代謝性狀屬于多基因控制的復雜性狀。目前有關脂肪分解的研究大多著眼于幾個甚至單一基因，難以發(fā)現基因之間的互作，應用于育種實踐時具有一定的局限性。HSL是一種重要的脂肪分解酶，已有研究證實CB1可以影響HSL基因的表達，但是調控機制并不清楚。本文采用文獻挖掘方法，構建了與脂肪分解有關的基因網絡，闡明脂解基因之間的作用機理；推測CB1通過CB1→PPARγ2→perilipinA→HSL通路對HSL起調控作用，并通過試驗對CB1對HSL基因表達的調控進行驗證，可為今后進一步開展脂肪分解通路的研究提供理論依據。本研究分析了脂肪動員、線粒體與過氧化物酶體內脂肪酸的β氧化和甘油代謝三個環(huán)節(jié)中相關酶及其編碼基因的性質特征，并解釋了調控通路的作用機制；運用生物信息學方法分析CB1→PPARγ2→perilipinA→HSL通路中4個基因編碼的蛋白質的理化性質與結構；選取了4、5、6、7月齡15頭美系大白豬屠宰采樣，對CB1、PPARγ2和HSL基因表達進行相對定量。結果顯示：興奮性G蛋白偶聯受體通路、抑制性G蛋白偶聯受體通路和Gq/PLC/PKC通路屬于G蛋白偶聯通路，調控機制相似；酪氨酸激酶受體... 

【文章來源】：河北農業(yè)大學河北省

【文章頁數】：56 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 脂肪組織和脂肪細胞
        1.1.1 脂肪組織和脂肪細胞的構成
        1.1.2 脂肪組織和脂肪細胞的起源和發(fā)育
        1.1.3 脂肪因子
    1.2 脂肪的分解過程及相關脂肪酶
        1.2.1 脂肪的動員
        1.2.2 甘油的代謝
        1.2.3 脂肪酸的 β 氧化
        1.2.4 其他調節(jié)脂肪分解的基因
    1.3 脂肪分解的信號機制
        1.3.1 興奮性 G 蛋白偶聯受體通路
        1.3.2 抑制性 G 蛋白偶聯受體通路
        1.3.3 酪氨酸激酶受體通路
        1.3.4 Gq/PLC/PKC 通路
        1.3.5 JAK‐STATs 通路
    1.4 脂肪分解代謝的研究方法
    1.5 有待解決的問題
    1.6 本研究的內容
    1.7 本研究的意義
2 材料與方法
    2.1 試驗材料
        2.1.1 生物信息學分析材料
        2.1.2 提取總 RNA 試驗材料
        2.1.3 主要的試驗試劑
        2.1.4 試劑的配制
    2.2 試驗方法
        2.2.1 調控網絡的構建
        2.2.2 生物信息學分析
        2.2.3 主要的試驗儀器
        2.2.4 總 RNA 的提取
        2.2.5 RNA 純度和質量的檢測
        2.2.6 RNase free DNaseⅠ處理總 RNA
        2.2.7 引物設計
        2.2.8 PCR 鑒定 gDNA
        2.2.9 反轉錄成 cDNA
        2.2.10 Real‐time PCR
        2.2.11 數據處理
3 結果與分析
    3.1 脂肪降解通路中主要基因的網絡構建
        3.1.1 豬脂肪分解調控網絡
        3.1.2 G 蛋白偶聯受體介導的調控通路
    3.2 CB1/ PPARΓ2/HSL 通路中蛋白質的生物信息學分析
        3.2.1 蛋白質的理化性質
        3.2.2 蛋白質的信號肽和亞細胞定位
        3.2.3 蛋白質的二級結構
    3.3 CB1 調控 HSL 表達研究
        3.3.1 RNA 純度和質量的檢測結果
        3.3.2 反應曲線
        3.3.3 CB1、PPARγ2 和 HSL 基因的組織表達譜
        3.3.4 豬不同體重階段 CB1、PPARγ2 和 HSL 基因的表達趨勢
4 討論
    4.1 豬脂肪分解通路中的基因網絡
    4.2 脂解通路之間的關系
    4.3 CB1/ PPARΓ2/HSL 通路的推測
        4.3.1 CB1/ PPARγ2/HSL 通路中蛋白質的生物信息學分析
        4.3.2 CB1 對 HSL 表達的調控
    4.4 有待進一步研究的問題
5 結論
參考文獻
縮略詞表
在讀期間發(fā)表的論文
作者簡歷
致謝



本文編號：3188514