布魯氏菌�。˙rucellosis）是一種由布魯氏菌（Brucella）引起的烈性人畜共患傳染病,廣泛流行于全球160多個(gè)國(guó)家和地區(qū),給世界范圍內(nèi)畜牧業(yè)的發(fā)展和人類的健康帶來(lái)了巨大的威脅。目前,布魯氏菌病的診斷方法主要可以分為病原學(xué)診斷和血清學(xué)診斷,但兩類方法各自存在著一些缺點(diǎn)與不足:病原學(xué)診斷存在病原分離操作難度大,分離成功率低,病原培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)以及存在一定生物安全風(fēng)險(xiǎn)等問題;血清學(xué)診斷則存在凝集抗原容易和多種與布魯氏菌存在相似抗原表位的細(xì)菌抗血清（大腸桿菌O157、耶爾森菌O9等）發(fā)生交叉反應(yīng)、不能區(qū)分免疫抗體和感染抗體等問題。microRNA（簡(jiǎn)稱miRNA）是一類長(zhǎng)約22nt的內(nèi)源性非編碼小分子RNA,廣泛存在于線蟲、果蠅、植物和包括人在內(nèi)的真核生物中。隨著對(duì)其研究的深入,人們發(fā)現(xiàn)miRNA可以從細(xì)胞內(nèi)釋放,廣泛而穩(wěn)定的存在于包括血清、血漿、唾液、尿液甚至牛奶等細(xì)胞外液中,人們將這類miRNA統(tǒng)稱為循環(huán)miRNA（circulating20microRNA）。循環(huán)miRNA具有存在穩(wěn)定、物種間進(jìn)化保守、檢測(cè)方法多樣等特點(diǎn),并且循環(huán)miRNA作為一種新的疾病診斷標(biāo)志物已經(jīng)在人類醫(yī)學(xué)... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所北京市

【文章頁(yè)數(shù)】：59 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
第一章 引言
    1.1 布魯氏菌及布魯氏菌病概述
        1.1.1 布魯氏菌及布魯氏菌病
        1.1.2 布魯氏菌病的診斷方法
        1.1.3 布魯氏菌病的防治
    1.2 轉(zhuǎn)錄組學(xué)及轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)概述
    1.3 循環(huán)miRNA概述
        1.3.1 循環(huán)miRNA的發(fā)現(xiàn)
        1.3.2 循環(huán)miRNA的特點(diǎn)
        1.3.3 循環(huán)miRNA的形成與功能
        1.3.4 循環(huán)miRNA的提取與檢測(cè)
        1.3.5 循環(huán)miRNA與疾病的診斷
    1.4 本研究目的和意義
第二章 布魯氏菌感染小鼠模型的建立及血清轉(zhuǎn)錄組測(cè)序
    2.1 引言
    2.2 材料
        2.2.1 菌株及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.2.2 主要試劑及耗材
        2.2.3 主要儀器及設(shè)備
    2.3 方法
        2.3.1 細(xì)菌的復(fù)蘇和計(jì)數(shù)
        2.3.2 布魯氏菌感染BALB/c小鼠
        2.3.3 小鼠脾臟重量和脾臟含菌量測(cè)定
        2.3.4 小鼠血清抗體滴度的測(cè)定
        2.3.5 小鼠血清轉(zhuǎn)錄組測(cè)序
    2.4 結(jié)果
        2.4.1 不同感染時(shí)間小鼠脾臟重量變化
        2.4.2 不同感染時(shí)間小鼠脾臟含菌量變化
        2.4.3 不同感染時(shí)間小鼠血清抗體水平變化
        2.4.4 小鼠血清轉(zhuǎn)錄組測(cè)序
    2.5 討論
第三章 小鼠血清轉(zhuǎn)錄組測(cè)序數(shù)據(jù)驗(yàn)證
    3.1 引言
    3.2 材料
        3.2.1 菌株、細(xì)胞株及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        3.2.2 主要試劑及耗材
        3.2.3 主要儀器及設(shè)備
    3.3 方法
        3.3.1 S1330 感染組與空白對(duì)照組小鼠血清轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)驗(yàn)證
        3.3.2 S2 感染組與空白對(duì)照組小鼠血清轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)驗(yàn)證
        3.3.3 S1330 感染組與S2 感染組小鼠血清轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)驗(yàn)證
        3.3.4 擴(kuò)大樣本量驗(yàn)證mmu-miR-10b-5p
        3.3.5 mmu-miR-10b-5p在小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7 中表達(dá)水平的探究
        3.3.6 mmu-miR-10b-5p在小鼠巨噬細(xì)胞中下游靶點(diǎn)的預(yù)測(cè)及驗(yàn)證
        3.3.7 bta-miR-10b-5p在牛血清中表達(dá)水平的探究
    3.4 結(jié)果
        3.4.1 S1330 感染組與空白對(duì)照組小鼠血清轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)驗(yàn)證
        3.4.2 S2 感染組與空白對(duì)照組小鼠血清轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)驗(yàn)證
        3.4.3 S1330 感染組與S2 感染組小鼠血清轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)驗(yàn)證
        3.4.4 擴(kuò)大樣本量驗(yàn)證mmu-miR-10b-5p
        3.4.5 mmu-miR-10b-5p在小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7 中表達(dá)水平的探究
        3.4.6 mmu-miR-10b-5p在小鼠巨噬細(xì)胞中下游靶點(diǎn)的預(yù)測(cè)及驗(yàn)證
        3.4.7 bta-miR-10b-5p在牛血清中表達(dá)水平的探究
    3.5 討論
第四章 結(jié)論
    4.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)論
    4.2 創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]循環(huán)miRNA內(nèi)參的篩選及驗(yàn)證[D]. 向夢(mèng)琴.南華大學(xué) 2015



本文編號(hào)：3178422