發(fā)布時(shí)間：2021-05-09 15:37

　　獺兔原產(chǎn)于法國，又名力克斯兔（Rex20rabbit）是一種皮肉兼用兔，由于獺兔皮毛酷似水貂而得名。獺兔體型明顯小于肉兔體型，所以獺兔皮張面積將小于肉兔皮張面積。通過改變獺兔生長發(fā)育性能期望提高獺兔體型，從而在不改變獺兔皮毛優(yōu)質(zhì)的情況下提高獺兔的生長速度與體型大小。由于獺兔與肉兔進(jìn)行傳統(tǒng)遺傳育種雜交時(shí)會(huì)破壞后代的皮毛質(zhì)量，產(chǎn)生大量針毛，大幅度降低獺兔皮用價(jià)值。所以獺兔在生產(chǎn)管理及遺傳育種培養(yǎng)時(shí)堅(jiān)決不能與肉兔進(jìn)行雜交培養(yǎng)。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，轉(zhuǎn)基因獺兔必將成為生產(chǎn)皮用獺兔的一個(gè)必然發(fā)展趨勢(shì)。GH20（Growth20hormone）基因已經(jīng)在多種動(dòng)物體上取得了許多研究成果。生長激素（GH）是動(dòng)物腦垂體前葉嗜酸性細(xì)胞所分泌的一種激素，它主要作用是刺激骨、軟骨細(xì)胞的生長和分化，調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)、糖以及脂肪的代謝。生長激素（GH）基因是生長激素（GH）的遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)，是重要的生理機(jī)能基因，所以對(duì)GH基因的相關(guān)研究一直為人們所關(guān)注。本研究采用RT-PCR技術(shù)克隆得到獺兔GH基因。通過載體pMD18-T轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α，經(jīng)過測(cè)序證明成功克隆得到獺兔GH基因，長651bp，可編碼216個(gè)氨基酸（含... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 獺兔的簡介
        1.1.1 獺兔的起源
        1.1.2 獺兔的經(jīng)濟(jì)價(jià)值
        1.1.3 內(nèi)蒙古獺兔發(fā)展
    1.2 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物研究進(jìn)展
        1.2.1 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的研究歷史
        1.2.2 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的研究優(yōu)勢(shì)
        1.2.3 轉(zhuǎn)基因克隆的研究方法
        1.2.4 PCR 的原理及過程
        1.2.5 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的研究意義
        1.2.6 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的發(fā)展前景
    1.3 生長激素 GH 基因及研究情況
        1.3.1 生長激素 GH
        1.3.2 生長激素 GH 基因及其他相關(guān)研究
    1.4 基因打靶技術(shù)
        1.4.1 tetR和 ampR抗性基因的插入失活檢驗(yàn)
        1.4.2 α -互補(bǔ)乳糖操縱子模型篩選
        1.4.3 聚果糖蔗糖轉(zhuǎn)移酶基因篩選
2 獺兔生長激素基因的克隆及鑒定
    2.1 研究背景
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)獺兔及組織細(xì)胞采樣
        2.2.2 引物設(shè)計(jì)
        2.2.3 質(zhì)粒及菌株
        2.2.4 主要試劑
    2.3 試驗(yàn)方法及步驟
        2.3.1 引物設(shè)計(jì)
        2.3.2 提取 RNA
        2.3.3 基因克隆
        2.3.4 PCR 產(chǎn)物檢驗(yàn)
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 生長激素基因擴(kuò)增結(jié)果
        2.4.2 質(zhì)粒 PCR 檢測(cè)結(jié)果
        2.4.3 陽性克隆測(cè)序結(jié)果
        2.4.4 獺兔 GH 基因 CDS 與幾種動(dòng)物對(duì)比分析
    2.5 討論
    2.6 小結(jié)
3 獺兔 GH 基因原核表達(dá)
    3.1 研究背景
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.1 載體及菌株
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
    3.3 方法、步驟
        3.3.1 GH 基因與表達(dá)載體連接
        3.3.2 連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌 BL21（DE3）
        3.3.3 誘導(dǎo)表達(dá)
        3.3.4 優(yōu)化誘導(dǎo)靶蛋白表達(dá)
        3.3.5 提純表達(dá)蛋白
        3.3.6 表達(dá)產(chǎn)物的 Western-blotting 檢測(cè)
    3.4 結(jié)果
        3.4.1 重組質(zhì)粒 pET-32a（+）GH 構(gòu)建
        3.4.2 不同 ITPG 誘導(dǎo)結(jié)果
    3.5 討論
    3.6 小結(jié)
4 結(jié)論
5 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)研究進(jìn)展及其應(yīng)用[J]. 陳旭,齊鳳坤,康立功,李景富.  東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2010(08)
[4]牛生長激素BGH基因的克隆及其真核表達(dá)載體pEGFP-N1-BGH的構(gòu)建[J]. 韋光輝,徐廷生,雷雪芹,索劍飛.  河南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(01)
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博士論文
[1]不同被毛密度獺兔皮膚組織的差異表達(dá)基因篩選和CCNA2基因的多態(tài)性檢測(cè)及其與被毛密度的相關(guān)性研究[D]. 陳賽娟.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[2]山羊產(chǎn)羔和牛精液品質(zhì)與卵泡發(fā)育性狀主基因鑒定及功能研究[D]. 滑國華.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009

碩士論文
[1]豬和小鼠生長激素核心啟動(dòng)子的鑒定及調(diào)控差異的研究[D]. 阮楠.吉林大學(xué) 2012
[2]二花臉豬生長激素基因表達(dá)的發(fā)育性變化及其與大白豬的比較研究[D]. 徐金先.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2001



本文編號(hào)：3177566