粘菌素是一種環(huán)狀多肽類抗菌素,主要用于治療畜禽胃腸道感染,在我國、歐洲等世界多個國家也長期作為促生長劑添加于飼料中。2016年,我國學者首次報道在大腸桿菌中發(fā)現質粒攜帶的粘菌素耐藥基因（mcr-1）,這種可水平傳播的粘菌素耐藥基因的報道突破了長期以來認為粘菌素不存在可轉移耐藥機制的觀點。截至目前,世界范圍內共發(fā)現八種粘菌素耐藥基因（mcr-1,mcr-2,mcr-3,mcr-4,wcr-5,mcr-6,mcr-7,wcr-8）。作為治療多重耐藥革蘭氏陰性菌感染的最后一道防線,這些粘菌素耐藥基因和粘菌素耐藥菌株的出現,極大地降低了粘菌素的使用有效性,同時也給人和動物的健康帶來巨大的威脅。本研究首先建立了檢測八個質粒介導的粘菌素耐藥基因的熒光定量PCR（qPCR）方法,并使用該方法對來自我國9省市的1,552份豬拭子,24省市的3,343份家禽拭子以及134份人拭子樣本進行了八種mcr基因的流行現狀調查,同時還在我國禁止粘菌素用于促生長劑兩年后,對mcr-1的持續(xù)性影響進行了評估,最后對來自食源性動物和非食源性動物來源的mcr-1陽性大腸桿菌進行了耐藥特征分析,分子遺傳比較以及大腸桿茵mc... 

【文章來源】：揚州大學江蘇省

【文章頁數】：170 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
符號說明
第一部分 文獻綜述 多粘菌素的研究進展
    1 多粘菌素概述
        1.1 多粘菌素的化學結構
        1.2 多粘菌素的化學穩(wěn)定性
        1.3 多粘菌素的作用機理
        1.4 多粘菌素的抗菌譜
        1.5 多粘菌素的敏感性分析方法
        1.6 多粘菌素的耐藥監(jiān)測情況
    2 多粘菌素的使用
        2.1 多粘菌素在人類醫(yī)學上的使用
        2.2 多粘菌素在動物中的使用
    3 多粘菌素的耐藥機制
        3.1 細菌的固有耐藥
        3.2 脂多糖修飾
        3.3 異質性耐藥
        3.4 質粒介導的多粘菌素耐藥基因
    4 多粘菌素耐藥菌的相關研究
        4.1 多粘菌素耐藥的鮑曼不動桿菌的流行現狀
        4.2 多粘菌素耐藥的銅綠假單胞菌的流行現狀
        4.3 多粘菌素耐藥的腸桿菌科細菌的流行現狀
    5 質粒介導的粘菌素耐藥基因
        5.1 質粒介導的粘菌素耐藥基因的發(fā)現
        5.2 質粒介導的粘菌素耐藥基因的種類
        5.3 質粒介導的粘菌素耐藥基因的流行現狀
    參考文獻
第二部分 研究內容
    第一章 檢測八個粘菌素耐藥基因(mcr-1-mcr-8)的熒光定量PCR方法的建立
        1 材料與方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結果
            2.1 特異性的mcr基因(mcr-1-mcr-8)的qPCR方法建立
        3 討論
        參考文獻
    第二章 粘菌素耐藥基因(mcr-1-mcr-8)在我國豬體內的分子流行病學調查
        1 材料與方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結果
            2.1 八種不同粘菌素耐藥基因(mcr-1-mcr-8)在我國豬體內的流行現狀
            2.2 八種粘菌素耐藥基因在豬的鼻腔和肛門中的流行現狀
            2.3 不同的粘菌素耐藥基因在豬體內共感染的流行現狀
            2.4 系統(tǒng)進化樹分析
        3 討論
        參考文獻
    第三章 粘菌素耐藥基因(mcr-1-mcr-8)在我國家禽體內的分子流行病學調查
        1 材料與方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結果
            2.1 八種不同粘菌素耐藥基因(mcr-1-mcr-8)在我國家禽中的流行現狀
            2.2 八種粘菌素耐藥基因在家禽的咽喉和泄殖腔的流行現狀
            2.3 不同粘菌素耐藥基因在家禽體內共感染的流行現狀
            2.4 系統(tǒng)進化樹分析
        3 討論
        參考文獻
    第四章 粘菌素耐藥基因(mcr-1-mcr-8)在不孕癥患者陰道拭子中的分子流行病學調查
        1 材料與方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結果
            2.1 粘菌素耐藥基因(mcr-1-mcr-8)在不孕癥女性陰道拭子中的流行現狀
            2.2 系統(tǒng)進樹分析
        3 討論
        參考文獻
    第五章 質粒介導的粘菌素耐藥基因(mcr-1)的持續(xù)性影響
        1 材料與方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結果
            2.1 mcr-1的陽性率比較
            2.2 mcr-1陽性樣本拷貝數的比較
            2.3 系統(tǒng)進化樹分析
            2.4 mcr-1的體外轉移模擬
        3 討論
        參考文獻
    第六章 攜帶mcr-1基因的大腸桿菌分離株的耐藥特性研究
        1 材料與方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結果
            2.1 攜帶mcr-1的大腸桿菌PCR鑒定
            2.2 攜帶mcr-1的大腸桿菌對粘菌素的耐藥性
            2.3 攜帶mcr-1的大腸桿菌的藥物敏感性測定
            2.4 攜帶mcr-1的食源性動物大腸桿菌與非食源性動物大腸桿菌的耐藥性比較
            2.5 攜帶mcr-1的大腸桿菌耐藥譜及多重耐藥分析
        3 討論
        參考文獻
    第七章 大腸桿菌mcr-1傳播機制的研究
        1 材料與方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結果
            2.1 攜帶mcr-1的大腸桿菌的MLST分析
            2.2 攜帶mcr-1的大腸桿菌的PFGE分型
            2.3 攜帶mcr-1的大腸桿菌質粒的接合轉移
            2.4 攜帶mcr-1的大腸桿菌質粒圖譜
            2.5 質粒接合轉移成功菌株的藥物敏感性實驗
        3 討論
        參考文獻
全文總結
致謝
攻讀博士學位期間取得的科研成果


【參考文獻】：
期刊論文
[1]細菌耐藥性——全球矚目的焦點[J]. 陳代杰.  藥學進展. 2018(06)
[2]mcr-1基因介導黏菌素耐藥性研究進展[J]. 周洋,劉秋云,李玉寧,張丹艷.  動物醫(yī)學進展. 2018(03)
[3]mcr-1介導多黏菌素耐藥性的研究進展[J]. 趙菲菲,呂曉菊.  中國抗生素雜志. 2017(12)
[4]革蘭陰性菌異質性耐藥的研究進展[J]. 孫坤玲,徐繡宇,賈曉炯,張莉萍.  基因組學與應用生物學. 2017(09)
[5]多黏菌素異質性耐藥鮑曼不動桿菌的研究[J]. 錢鎏佳,陳代杰,林惠敏.  中國抗生素雜志. 2017(03)
[6]質粒介導的黏菌素耐藥基因mcr-1研究進展[J]. 易靈嫻,劉藝云,吳仁杰,梁梓森,劉健華.  遺傳. 2017(02)
[7]多粘菌素耐藥性的研究進展[J]. 王影,李艷然,韓鐫竹,高鐸,李欣南.  微生物學通報. 2017(01)
[8]肺炎克雷伯菌脈沖場凝膠電泳分型能力評價[J]. 杜小莉,周海健.  疾病監(jiān)測. 2015(11)

博士論文
[1]mcr-1基因在腸道病原菌中的分布特征與傳播規(guī)律研究[D]. 梁蓓蓓.軍事科學院 2018

碩士論文
[1]質粒介導的黏菌素耐藥基因mcr-1的發(fā)現[D]. 劉藝云.華南農業(yè)大學 2016
[2]禽致病性大腸桿菌脂多糖突變株的構建及其生物學特性研究[D]. 韓月.中國農業(yè)科學院 2014



本文編號：3175834