后期促進(jìn)復(fù)合物或周期體（The anaphase-promoting complex or cyclosome, APC/C）是一個泛素連接酶復(fù)合體,它控制著細(xì)胞分裂的中期向后期的轉(zhuǎn)換。在細(xì)胞中期,當(dāng)染色體與紡錘絲正確連接時,Cdc20激活A(yù)PC/C,進(jìn)而啟動一系列泛素化反應(yīng),染色體開始分離。這是一個保證細(xì)胞有絲分裂正常進(jìn)行的重要機(jī)制。同樣,其在減數(shù)分裂中也有著相同的作用。本研究中,我們分析了體外培養(yǎng)的卵母細(xì)胞中的Cdc20的表達(dá)情況,并對Cdc20進(jìn)行了表達(dá)調(diào)控。我們構(gòu)建了Myc-Cdc20載體,在將載體反轉(zhuǎn)錄成為cRNA之后通過顯微注射的方法進(jìn)行Cdc20的過量表達(dá)。此外,我們還通過western blot的方法檢測了正常體外培養(yǎng)條件下的GV、GVBD、MI和MII期卵母細(xì)胞的Cdc20的表達(dá)情況。首先,我們確定了在本實驗室體外培養(yǎng)條件下的絨山羊卵母細(xì)胞成熟率和細(xì)胞到達(dá)GVBD、MI和MII期所需的時間。結(jié)果顯示,在我們的培養(yǎng)條件下,卵母細(xì)胞成熟率為75%。8小時,卵母細(xì)胞發(fā)生GVBD,18小時到達(dá)MI期,24小時后,有75%的卵母細(xì)胞排出第一極體,到達(dá)MII期。然后,我們將Myc... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：44 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
前言
第一章 載體的構(gòu)建
    1 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果
        2.1 絨山羊卵巢總RNA的提取
        2.2 絨山羊卵巢組織Cdc20基因的PCR擴(kuò)增
        2.3 絨山羊Cdc20基因的TA克隆
        2.4 Cdc20-T及mMyc-Cdc20的酶切
        2.5 對重組載體gMyc-Cdc20的PCR鑒定
        2.6 GFP-Cdc20真核表達(dá)載體PCR鑒定
        2.7 GFP-Cdc20融合基因在3T3細(xì)胞的表達(dá)
第二章 Cdc20在絨山羊卵母細(xì)胞表達(dá)情況的研究
    1 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果
        2.1 絨山羊卵母細(xì)胞的體外成熟培養(yǎng)
        2.2 對重組載體gMyc-Cdc20的線性化
        2.3 Cdc20 cRNA的合成
        2.4 MYC-CDC20融合蛋白的表達(dá)檢測
        2.5顯微注射gMyc-Cdc20 cRNA后絨山羊卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)成熟情況
        2.6 正常絨山羊卵母細(xì)胞Cdc20在GV、GVBD、MI、MII期的表達(dá)情況
    3 討論
第三章 文獻(xiàn)綜述
    1 Cdc20基因的分子作用機(jī)制
    2 cdc20與癌癥
    3 Cdc20在減數(shù)分裂過程中的作用
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
碩士論文
[1]Cdc20基因突變與小鼠結(jié)腸癌的發(fā)展[D]. 馮聚玲.暨南大學(xué) 2011



本文編號：3175478