綿羊肺腺瘤病毒（Jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV）為β逆轉(zhuǎn)錄病毒,屬于Retroviridae家族和Othoretrovirinae亞家族。JSRV是綿羊肺腺瘤�。∣PA）的病原,OPA是一種傳染性的綿羊肺癌。JSRV囊膜蛋白（Envelope,Env）主要激活細(xì)胞中的PI3K/Akt和MAPK信號(hào)通路。研究表明,細(xì)胞自噬在很多種類型的癌癥中均受到抑制。細(xì)胞的自噬活性往往和腫瘤的惡性發(fā)展程度相反。但是仍沒(méi)有關(guān)于自噬形成過(guò)程與OPA腫瘤的發(fā)展過(guò)程,以及JSRV Env誘導(dǎo)細(xì)胞轉(zhuǎn)化的過(guò)程之間關(guān)聯(lián)的研究。自噬在JSRV Env轉(zhuǎn)化的細(xì)胞中是怎樣受到信號(hào)通路調(diào)控的,以及激活的信號(hào)通路是否調(diào)控細(xì)胞自噬,均值得我們深入探討。本研究檢測(cè)了 Akt/mTOR信號(hào)通路和MAPK信號(hào)通路在自然感染OPA病肺組織、JSRV Env轉(zhuǎn)化的NIH3T3細(xì)胞和綿羊絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞中的激活情況。接著檢測(cè)了自噬因子Beclin-1和LC3 Ⅱ/Ⅰ在自然感染OPA肺組織、JSRV Env誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化的NIH3T3細(xì)胞和綿羊絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞中的表達(dá)水平,并進(jìn)一步研究了 Beclin-1和LC3... 

【文章來(lái)源】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞表
1 引言
    1.1 綿羊肺腺瘤概述
        1.1.1 綿羊肺腺瘤病的臨床癥狀、病理學(xué)特征以及流行病學(xué)概括
        1.1.2 綿羊肺腺瘤病的致瘤機(jī)制
    1.2 EGFR簡(jiǎn)介
        1.2.1 EGFR信號(hào)通路
        1.2.3 EGFR與JSRV的關(guān)系
    1.3 MAPK信號(hào)通路簡(jiǎn)介
        1.3.1 Ras-Raf-ERK信號(hào)通路
        1.3.2 p38 MAPK信號(hào)通路
        1.3.3 JNK信號(hào)通路
        1.3.4 MAPK信號(hào)通路與JSRV的關(guān)系
    1.4 PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路簡(jiǎn)介
        1.4.1 Akt信號(hào)通路
        1.4.2 mTOR信號(hào)通路
        1.4.3 Akt/mTOR信號(hào)通路與JSRV的關(guān)系
    1.5 細(xì)胞自噬簡(jiǎn)介
        1.5.1 PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路調(diào)控自噬
        1.5.2 MAPK信號(hào)通路調(diào)控自噬
        1.5.3 自噬與JSRV的關(guān)系
    1.6 研究目的及意義
    1.7 技術(shù)路線
2 試驗(yàn)一 自然感染OPA病肺的組織病理學(xué)觀察與免疫組織化學(xué)檢測(cè)
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗(yàn)材料
        2.1.2 儀器設(shè)備
        2.1.3 試驗(yàn)試劑
        2.1.4 試驗(yàn)方法
    2.2 試驗(yàn)結(jié)果
        2.2.1 OPA病肺的組織病理學(xué)觀察結(jié)果
        2.2.2 OPA病肺組織中JSRV Env的表達(dá)定位結(jié)果
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
3 試驗(yàn)二 EGFR在自然感染OPA病肺組織中表達(dá)的檢測(cè)
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗(yàn)材料
        3.1.2 儀器設(shè)備
        3.1.3 試驗(yàn)試劑
        3.1.4 試驗(yàn)方法
    3.2 試驗(yàn)結(jié)果
        3.2.1 OPA病肺組織中EGFR的表達(dá)定位結(jié)果
        3.2.2 OPA病肺組織中EGFR的蛋白表達(dá)檢測(cè)結(jié)果
        3.2.3 討論
        3.2.4 小結(jié)
4 試驗(yàn)三 MAPK和Akt/mTOR通路在自然感染OPA病肺組織中表達(dá)的檢測(cè)
    4.1 材料與方法
        4.1.1 試驗(yàn)材料
        4.1.2 儀器設(shè)備
        4.1.3 試驗(yàn)試劑
        4.1.4 試驗(yàn)方法
    4.2 試驗(yàn)結(jié)果
        4.2.1 OPA病肺組織中MAPK通路的表達(dá)定位結(jié)果
        4.2.2 OPA病肺組織中MAPK通路的磷酸化水平檢測(cè)結(jié)果
        4.2.3 OPA病肺組織中Akt/mTOR通路的表達(dá)定位結(jié)果
        4.2.4 OPA病肺組織中Akt/mTOR通路的磷酸化水平檢測(cè)結(jié)果
        4.2.5 討論
        4.2.6 小結(jié)
5 試驗(yàn)四 Beclin-1和LC31Ⅱ/Ⅰ在自然感染OPA病肺組織中表達(dá)的檢測(cè)
    5.1 材料與方法
        5.1.1 試驗(yàn)材料
        5.1.2 儀器設(shè)備
        5.1.3 試驗(yàn)試劑
        5.1.4 試驗(yàn)方法
    5.2 試驗(yàn)結(jié)果
        5.2.1 OPA病肺組織中Beclin-1和LC3基因表達(dá)檢測(cè)結(jié)果
        5.2.2 OPA病肺組織中Beclin-1和LC3表達(dá)定位結(jié)果
        5.2.3 OPA病肺組織中Beclin-1和LC3蛋白表達(dá)檢測(cè)結(jié)果
        5.2.4 討論
        5.2.5 小結(jié)
6 試驗(yàn)五 EGFR在JSRV Env誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系中表達(dá)的檢測(cè)
    6.1 材料與方法
        6.1.1 試驗(yàn)材料
        6.1.2 儀器設(shè)備
        6.1.3 試驗(yàn)試劑
        6.1.4 試驗(yàn)方法
    6.2 試驗(yàn)結(jié)果
        6.2.1 重組表達(dá)質(zhì)粒最佳轉(zhuǎn)染效率的測(cè)定結(jié)果
        6.2.2 NIH3T3細(xì)胞中env基因表達(dá)檢測(cè)結(jié)果
        6.2.3 NIH3T3細(xì)胞中Env蛋白表達(dá)檢測(cè)結(jié)果
        6.2.4 NIH3T3細(xì)胞中EGFR的蛋白表達(dá)檢測(cè)結(jié)果
        6.2.5 絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞中env基因表達(dá)檢測(cè)結(jié)果
        6.2.6 絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞中Env蛋白表達(dá)檢測(cè)結(jié)果
        6.2.7 絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞中EGFR的蛋白表達(dá)檢測(cè)結(jié)果
        6.2.8 討論
        6.2.9 小結(jié)
7 試驗(yàn)六 MAPK和Akt/mTOR通路在JSRV Env誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系中的表達(dá)
    7.1 材料與方法
        7.1.1 試驗(yàn)材料
        7.1.2 儀器設(shè)備
        7.1.3 試驗(yàn)試劑
        7.1.4 試驗(yàn)方法
    7.2 試驗(yàn)結(jié)果
        7.2.1 NIH3T3細(xì)胞中MAPK通路的檢測(cè)結(jié)果
        7.2.2 NIH3T3細(xì)胞中Akt/mTOR通路的檢測(cè)結(jié)果
        7.2.3 滋養(yǎng)層細(xì)胞中MAPK通路的檢測(cè)結(jié)果
        7.2.4 滋養(yǎng)層細(xì)胞中Akt/mTOR通路的檢測(cè)結(jié)果
        7.2.5 討論
        7.2.6 小結(jié)
8 試驗(yàn)七 Beclin-1和LC3Ⅱ/Ⅰ在JSRV-Env誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系中表達(dá)的檢測(cè)
    8.1 材料與方法
        8.1.1 試驗(yàn)材料
        8.1.2 儀器設(shè)備
        8.1.3 試驗(yàn)試劑
        8.1.4 試驗(yàn)方法
    8.2 試驗(yàn)結(jié)果
        8.2.1 NIH3T3細(xì)胞中Beclin-1和LC3Ⅱ/Ⅰ的表達(dá)檢測(cè)結(jié)果
        8.2.2 滋養(yǎng)層細(xì)胞中Beclin-1和LC3Ⅱ/Ⅰ的表達(dá)檢測(cè)結(jié)果
        8.2.3 討論
        8.2.4 小結(jié)
9 試驗(yàn)八 MAPK和Akt/mTOR通路調(diào)控Beclin-1和LC3Ⅱ/Ⅰ的表達(dá)機(jī)制
    9.1 材料與方法
        9.1.1 試驗(yàn)材料
        9.1.2 儀器設(shè)備
        9.1.3 試驗(yàn)試劑
        9.1.4 試驗(yàn)方法
    9.2 試驗(yàn)結(jié)果
        9.2.1 抑制劑條件摸索結(jié)果
        9.2.2 NIH3T3細(xì)胞中Beclin-1和LC3的基因表達(dá)檢測(cè)結(jié)果
        9.2.3 NIH3T3細(xì)胞中Beclin-1和LC3Ⅱ/Ⅰ的蛋白表達(dá)檢測(cè)結(jié)果
        9.2.4 絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞中Beclin-1和LC3Ⅱ/Ⅰ的基因表達(dá)檢測(cè)結(jié)果
        9.2.5 絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞中Beclin-1和LC3Ⅱ/Ⅰ的蛋白表達(dá)檢測(cè)結(jié)果
        9.2.6 討論
        9.2.7 小結(jié)
10 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Ras/Raf/MEK/ERK信號(hào)通路參與自噬調(diào)控作用的研究進(jìn)展[J]. 王雪,張?jiān)u滸.  中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(01)
[2]PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路與自噬及腫瘤的關(guān)系[J]. 舒婷,萬(wàn)福生.  中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 2016(11)
[3]細(xì)胞自噬與腫瘤發(fā)生關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 崔丹蕊,劉波,劉偉.  中國(guó)科學(xué):生命科學(xué). 2015(06)
[4]新疆綿羊肺腺瘤病理學(xué)診斷與全基因組序列分析[J]. 楊素芳,梁田,趙慶亮,張殿卿,司俊強(qiáng),張靜,楊霞,盛金良.  病毒學(xué)報(bào). 2015(03)
[5]綿羊肺腺瘤病毒pEGFP-C1/exJSRV-env構(gòu)建及引起NIH3T3細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的研究[J]. 張宇飛,劉月,王專家,孫曉林,劉淑英.  病毒學(xué)報(bào). 2014(03)
[6]綿羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白致癌作用的研究進(jìn)展[J]. 張亞坤,劉淑英.  中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2012(12)
[7]綿羊肺腺瘤病毒的巢式RT-PCR技術(shù)檢測(cè)[J]. 趙澤赟,劉淑英,羅學(xué)東.  中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào). 2011(06)
[8]MAPK信號(hào)通路研究進(jìn)展[J]. 陳建勇,王聰,王娟,曹禮榮.  中國(guó)醫(yī)藥科學(xué). 2011(08)
[9]Real-Time PCR和組織原位雜交法檢測(cè)enJSRV在綿羊胎兒免疫器官及肺臟中的表達(dá)[J]. 吳曉莉,齊景偉,劉淑英,徐萌杰.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2010(08)
[10]Molecular regulation of vasculogenic mimicry in tumors and potential tumor-target therapy[J]. Yue-Zu Fan,Wei Sun,Department of Surgery,Tongji Hospital,Tongji University School of Medicine,Shanghai 200065,China.  World Journal of Gastrointestinal Surgery. 2010(04)

博士論文
[1]JSRV囊膜蛋白及其亞基誘導(dǎo)NIH 3T3細(xì)胞轉(zhuǎn)化與分子發(fā)生機(jī)制的研究[D]. 劉暢.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]JSRV檢測(cè)及JSRV轉(zhuǎn)錄起始調(diào)節(jié)基因LTR致瘤機(jī)制相關(guān)性研究[D]. 羅軍榮.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009

碩士論文
[1]RN181通過(guò)p38-MAPK對(duì)肝癌細(xì)胞HepG2凋亡及自噬的影響[D]. 謝瑤.南華大學(xué) 2016



本文編號(hào)：3173591