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解淀粉芽孢桿菌胞外多糖的結(jié)構(gòu)及其益生作用機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2021-05-06 10:30
  芽孢桿菌及其胞外多糖(Exopolysaccharide,EPS)可以調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡,改善機(jī)體免疫能力,然而,由于其益生作用機(jī)制尚未完全闡明,限制了芽孢桿菌及其EPS在動(dòng)物飼料生產(chǎn)中的精準(zhǔn)使用。本研究通過篩選獲得一株產(chǎn)抑制腸產(chǎn)毒素大腸桿菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)血凝性EPS的解淀粉芽孢桿菌,并對(duì)EPS的結(jié)構(gòu)進(jìn)行解析,研究EPS對(duì)典型腸道病原微生物ETEC的抑制作用與機(jī)理,探索EPS對(duì)定向增殖乳酸菌的調(diào)控作用,最后考察EPS對(duì)Pb2+誘導(dǎo)腸道氧化損傷的保護(hù)作用,闡明芽孢桿菌EPS的益生作用。本研究為芽孢桿菌EPS應(yīng)用于防治動(dòng)物應(yīng)激,取消養(yǎng)殖端抗生素的使用提供科學(xué)的理論依據(jù),并為其EPS作為新型飼料添加劑,實(shí)現(xiàn)其在養(yǎng)殖過程中的精準(zhǔn)調(diào)控提供新的思路。論文主要結(jié)論如下:(1)從健康仔豬糞便中分離獲得一株產(chǎn)抑制ETEC血凝性EPS的芽孢桿菌,采用基于16S rRNA測(cè)序和常規(guī)生理生化試驗(yàn),鑒定其為解淀粉芽孢桿菌JN4(Bacillus amyloliquefaciens JN4)。解淀粉芽孢桿菌JN4的EPS在4 g... 

【文章來源】:江南大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:105 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 芽孢桿菌的胞外多糖
        1.1.1 胞外多糖的概述
        1.1.2 芽孢桿菌及其胞外多糖
    1.2 多糖的結(jié)構(gòu)解析與構(gòu)效關(guān)系
        1.2.1 多糖結(jié)構(gòu)的解析方法
        1.2.2 多糖結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系
    1.3 多糖的益生作用及其機(jī)制
        1.3.1 多糖對(duì)腸產(chǎn)毒素大腸桿菌的抑制作用
        1.3.2 多糖對(duì)乳酸菌的定向增殖作用
        1.3.3 多糖的抗氧化特性及其對(duì)動(dòng)物氧化應(yīng)激的保護(hù)作用
    1.4 胞外多糖益生作用研究存在的主要問題
    1.5 研究的背景、目標(biāo)與意義
    1.6 研究?jī)?nèi)容
第二章 抑制腸產(chǎn)毒素大腸桿菌血凝性多糖的篩選及其結(jié)構(gòu)解析
    2.1 前言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 主要菌株、試劑及培養(yǎng)基
        2.2.2 主要設(shè)備
        2.2.3 抑制ETEC血凝性芽孢桿菌EPS的篩選
        2.2.4 胞外多糖的分離純化
        2.2.5 胞外多糖的元素分析
        2.2.6 胞外多糖的分子量測(cè)定
        2.2.7 胞外多糖的單糖組成分析
        2.2.8 胞外多糖的紅外光譜分析
        2.2.9 胞外多糖的甲基化分析
        2.2.10 胞外多糖的核磁共振分析
        2.2.11 數(shù)據(jù)分析
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 抑制ETEC血凝性芽孢桿菌的篩選與鑒定
        2.3.2 解淀粉芽孢桿菌JN4胞外多糖的分離純化
        2.3.3 多糖EPS-JN4的分子量與單糖組成
        2.3.4 多糖EPS-JN4的紅外光譜分析
        2.3.5 多糖EPS-JN4的甲基化分析
        2.3.6 多糖EPS-JN4的核磁共振分析
        2.3.7 多糖EPS-JN4的結(jié)構(gòu)推定
        2.3.8 不同分子結(jié)構(gòu)果聚糖對(duì)ETEC血凝性抑制作用的影響
    2.4 本章小結(jié)
第三章 多糖EPS-JN4對(duì)腸產(chǎn)毒素大腸桿菌的抑制作用
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 主要材料及試劑
        3.2.2 主要設(shè)備
        3.2.3 多糖EPS-JN4的制備
        3.2.4 多糖EPS-JN4對(duì)ETEC黏附的影響
        3.2.5 多糖EPS-JN4 抑制ETEC黏附的作用方式
        3.2.6 多糖EPS-JN4對(duì)ETEC生長(zhǎng)和腸毒素產(chǎn)生的影響
        3.2.7 多糖EPS-JN4對(duì)ETEC生長(zhǎng)的抑制機(jī)制
        3.2.8 多糖EPS-JN4對(duì)ETEC介導(dǎo)的腸道細(xì)胞免疫的影響
        3.2.9 數(shù)據(jù)分析
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 多糖EPS-JN4對(duì)大腸桿菌黏附的抑制作用
        3.3.2 多糖EPS-JN4對(duì)ETEC生長(zhǎng)的影響
        3.3.3 多糖EPS-JN4對(duì)ETEC生長(zhǎng)抑制的作用機(jī)制
        3.3.4 多糖EPS-JN4對(duì)ETEC介導(dǎo)的腸道細(xì)胞免疫的影響
    3.4 本章小結(jié)
第四章 多糖EPS-JN4對(duì)小鼠腸道乳酸菌的定向增殖作用及機(jī)制
    4.1 前言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 主要材料及試劑
        4.2.2 主要設(shè)備
        4.2.3 多糖EPS-JN4的制備
        4.2.4 多糖EPS-JN4的體外抗消化能力的測(cè)定
        4.2.5 多糖EPS-JN4對(duì)腸道微生物的增殖作用
        4.2.6 多糖EPS-JN4對(duì)腸道主要乳酸菌的增殖作用
        4.2.7 多糖EPS-JN4 對(duì)羅伊氏乳桿菌JN101 生長(zhǎng)、代謝的調(diào)控作用
        4.2.8 多糖EPS-JN4 對(duì)羅伊氏乳桿菌JN101 細(xì)胞膜成分的影響
        4.2.9 多糖EPS-JN4 對(duì)羅伊氏乳桿菌JN101 的代謝組差異分析
        4.2.10 數(shù)據(jù)分析
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 多糖EPS-JN4的體外抗消化能力
        4.3.2 多糖EPS-JN4干預(yù)對(duì)腸道菌群結(jié)構(gòu)的影響
        4.3.3 多糖EPS-JN4對(duì)腸道主要乳酸菌的增殖作用
        4.3.4 多糖EPS-JN4 對(duì)羅伊氏乳桿菌JN101 生長(zhǎng)的影響
        4.3.5 多糖EPS-JN4 對(duì)羅伊氏乳桿菌JN101 腸道黏附能力的影響
        4.3.6 羅伊氏乳桿菌JN101腸道黏附性改變的機(jī)制
        4.3.7 多糖EPS-JN4 對(duì)羅伊氏乳桿菌JN101 代謝組的影響
    4.4 本章小結(jié)
第五章 多糖EPS-JN4的抗氧化性及其對(duì)細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用
    5.1 前言
    5.2 材料與方法
        5.2.1 主要材料及試劑
        5.2.2 主要設(shè)備
        5.2.3 多糖EPS-JN4的制備
        5.2.4 多糖EPS-JN4體外抗氧化力的測(cè)定
        5.2.5 多糖EPS-JN4對(duì)DNA損傷的保護(hù)作用
        5.2.6 多糖EPS-JN4對(duì)Pb~(2+)損傷IPEC-1 細(xì)胞的保護(hù)作用
        5.2.7 多糖EPS-JN4對(duì)Pb~(2+)的吸附作用
        5.2.8 多糖EPS-JN4對(duì)Pb~(2+)的吸附熱力學(xué)
        5.2.9 多糖EPS-JN4對(duì)Pb~(2+)吸附動(dòng)力學(xué)
        5.2.10 多糖EPS-JN4 吸附Pb~(2+)后的紅外光譜
        5.2.11 數(shù)據(jù)分析
    5.3 結(jié)果與討論
        5.3.1 多糖EPS-JN4的體外抗氧化特性
        5.3.2 多糖EPS-JN4對(duì)DNA損傷的保護(hù)作用
        5.3.3 多糖EPS-JN4對(duì)Pb~(2+)誘導(dǎo)IEPC-1 細(xì)胞氧化損傷的影響
        5.3.4 多糖EPS-JN4對(duì)Pb~(2+)的吸附作用
        5.3.5 多糖EPS-JN4對(duì)Pb~(2+)的吸附機(jī)制
    5.4 本章小結(jié)
主要結(jié)論與展望
主要?jiǎng)?chuàng)新點(diǎn)
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄 :作者在攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表的論文


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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博士論文
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[3]黑木耳剛性鏈β-葡聚糖及其復(fù)合物的抗癌活性和構(gòu)效關(guān)系[D]. 平兆華.武漢大學(xué) 2016
[4]解淀粉芽孢桿菌SC06介導(dǎo)豬腸道免疫機(jī)理的研究[D]. 計(jì)堅(jiān).浙江大學(xué) 2013
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[6]乳酸桿菌冷凍干燥生理?yè)p傷機(jī)制及保護(hù)策略的研究[D]. 李寶坤.江南大學(xué) 2011

碩士論文
[1]菊糖蔗糖酶的性質(zhì)鑒定及分子改造研究[D]. 倪大偉.江南大學(xué) 2019
[2]野葛根多糖的提取、分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定及對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7的免疫調(diào)節(jié)活性研究[D]. 董洲.華南理工大學(xué) 2018
[3]江蘇啤酒大麥麥芽麥汁中混濁物質(zhì)的初步研究[D]. 張辰東.江南大學(xué) 2014
[4]香菇多糖的結(jié)構(gòu)與抗腫瘤活性的關(guān)系研究[D]. 王俊.華中科技大學(xué) 2012



本文編號(hào):3171766

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