本試驗(yàn)旨在優(yōu)化減毒豬霍亂沙門氏菌C500抗凍保護(hù)劑,提高工程菌C500的存活率。通過(guò)單因素試驗(yàn)考察了4種類型的抗凍保護(hù)劑（滲透性、半滲透性、非滲透性保護(hù)劑及抗氧化劑）對(duì)工程菌C500冷凍保存前后存活率的影響,各保護(hù)劑設(shè)置不同的濃度并與工程菌C500等體積混合,于液氮中保存2周后進(jìn)行平板計(jì)數(shù)以計(jì)算其成活率,初步篩選出最有利于菌種保存的滲透性保護(hù)劑、半滲透性保護(hù)劑、非滲透性保護(hù)劑和抗氧化劑及其最佳保護(hù)濃度,最后將篩選出的4種保護(hù)劑進(jìn)行四因素三水平的正交試驗(yàn)以得出最佳的組合配方。單因素試驗(yàn)的結(jié)果表明,滲透性保護(hù)劑中乙二醇、半滲透性保護(hù)劑中蔗糖、非滲透性保護(hù)劑中聚乙烯吡絡(luò)烷酮（PVP）及抗氧化劑中甘氨酸對(duì)工程菌C500的保護(hù)作用最佳,最佳保存濃度分別為15%、6%、6%和0.25%;正交試驗(yàn)結(jié)果表明,各因素均對(duì)工程菌C500的存活率有顯著影響,篩選出的最佳組合配方為17%乙二醇、9.0%蔗糖、6.0%PVP、0.35%甘氨酸,最佳組合在-80℃的保存效果最佳,此溫度下保存6周存活率可達(dá)88.34%,其次為液氮組、-20℃組及4℃組。這表明本試驗(yàn)得到的保護(hù)劑配方極大地提高了工程菌C500的抗凍能... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2020,47(11)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：9 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 菌種
        1.1.2 主要試劑
    1.2 方法
        1.2.1 工程菌的制備
        1.2.2 單一性保護(hù)劑的配制
        1.2.3 菌種的冷凍保存
        1.2.4 平板計(jì)數(shù)
        1.2.5 正交設(shè)計(jì)
        1.2.6 驗(yàn)證試驗(yàn)
2 結(jié) 果
    2.1 滲透性保護(hù)劑對(duì)工程菌C500存活率的影響
    2.2 半滲透性保護(hù)劑對(duì)工程菌C500存活率的影響
    2.3 非滲透性保護(hù)劑對(duì)工程菌C500存活率的影響
    2.4 抗氧化劑保護(hù)劑對(duì)工程菌C500存活率的影響
    2.5 正交試驗(yàn)結(jié)果
    2.6 驗(yàn)證試驗(yàn)
3 討 論
4 結(jié) 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]肝癌細(xì)胞Hep-G2凍結(jié)過(guò)程中凍干保護(hù)劑熱物性和效果研究[J]. 李維杰,宋萍,劉寶林.  生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志. 2019(05)
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博士論文
[1]豬霍亂沙門氏菌C500株crpˉ、asdˉ缺失株平衡致死系統(tǒng)的構(gòu)建及應(yīng)用[D]. 徐引弟.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006

碩士論文
[1]生長(zhǎng)抑素DNA疫苗C500（pVGS/2SS-asd）對(duì)于育肥豬的生產(chǎn)性試驗(yàn)研究[D]. 周子超.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019
[2]甘氨酸/褪黑素對(duì)水貂GV期卵母細(xì)胞冷凍保存的影響[D]. 曹俊國(guó).中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2019
[3]非抗性篩選KISS1基因疫苗構(gòu)建及其免疫效果的研究[D]. 趙家宇.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[4]豬A病減毒活疫苗凍干工藝過(guò)程優(yōu)化[D]. 李鍵.上海交通大學(xué) 2017



本文編號(hào)：3171104