肌內(nèi)脂肪含量是影響豬肉品質(zhì)的重要因素。而育種過程中對高瘦肉率的長期選擇,導致了肌內(nèi)脂肪含量以及豬肉品質(zhì)的下降。因此,提高肌內(nèi)脂肪含量,同時不影響其它部位脂肪的沉積,特別是皮下脂肪,成為豬育種的一個重要目標。由于不同部位的脂肪在脂肪代謝與脂肪細胞分化能力上存在著差異,這為尋找調(diào)控脂肪在不同組織差異沉積的分子機理提供了可能性。為了解肌內(nèi)脂肪與皮下脂肪差異沉積的機制,我們比較了源于皮下脂肪與肌內(nèi)脂肪的前體脂肪細胞的分化能力,并對脂肪分化與沉積起關(guān)鍵調(diào)控作用的PPARy基因在兩種細胞中的表達量進行了檢測。隨后預測了靶向PPARy的miRNA,并對其在兩種細胞中的表達量進行了比較,最后通過雙熒光報告系統(tǒng)對差異表達的miRNA進行靶向性驗證。主要實驗結(jié)果如下：1、在體外環(huán)境下,源于肌內(nèi)脂肪組織的前體脂肪細胞在分化能力上強于皮下脂肪組織來源的前體脂肪細胞。DMI誘導分化9天后,肌內(nèi)前體脂肪細胞脂質(zhì)積聚水平顯著高于皮下脂肪細胞（P<0.05）。對兩種脂肪細胞中脂質(zhì)代謝相關(guān)基因進行比較,結(jié)果表明,脂肪合成關(guān)鍵基因乙酰-CoA羧化酶（Acetyl-CoA Carboxylase, ACC）、脂肪酸合... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞
第一篇 文獻綜述
    第一章 肌內(nèi)脂肪的研究進展
        1 肌內(nèi)脂肪
            1.1 肌內(nèi)脂肪的成分
            1.2 肌內(nèi)脂肪的分布與發(fā)生發(fā)展
            1.3 肌內(nèi)脂肪的沉積
        2 影響肌內(nèi)脂肪的基因調(diào)控
            2.1 影響脂肪沉寂的候選基因
            2.2 對肌內(nèi)脂肪沉積相關(guān)的信號轉(zhuǎn)導通路的研究
        3 肌內(nèi)脂肪與其他部位脂肪的差異
    第二章 miRNA與脂肪沉積的研究進展
        1 miRNA概述
        2 miRNA與siRNA的區(qū)別
        3 miRNA與脂肪沉積的調(diào)控
            3.1 miRNA與脂肪分化
            3.2 miRNA與脂肪能量代謝
            3.3 miRNA與肝臟脂類代謝
            3.4 miRNA與胰島素分泌
        4 miRNA與脂肪分布
第二篇 實驗部分
    第三章 皮下與肌內(nèi)脂肪細胞分化能力及PPARγ表達水平的差異研究
        1 實驗儀器與試劑
            1.1 主要儀器
            1.2 主要試劑
        2 實驗方法
            2.1 實驗動物及樣品采集
            2.2 前體脂肪細胞復蘇
            2.3 細胞的傳代培養(yǎng)與凍存
            2.4 前體脂肪細胞誘導分化
            2.5 油紅O染色
            2.6 RNA提取
        3 實驗結(jié)果
            3.1 皮下脂肪前體細胞與肌內(nèi)脂肪前體細胞分化能力的比較
            3.2 PPAR7在成熟皮下脂肪細胞與肌內(nèi)脂肪細胞中表達的差異
        4 討論
    第四章 靶向PPAR7的miRNA鑒定及其在皮下與肌內(nèi)脂肪細胞中的差異表達
        1 實驗儀器與試劑
            1.1 主要儀器
            1.2 主要試劑
        2 實驗方法
            2.1 miRNA預測
            2.2 miRNA的RT-qPCR
            2.3 質(zhì)粒構(gòu)建
            2.4 miRNA靶向性驗證
            2.5 miRNA與PPARγ3'-UTR的二級結(jié)構(gòu)預測
            2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計
        3 實驗結(jié)果
            3.1 預測的靶向PPARγ的miRNA
            3.2 候選miRNA的篩選
            3.3 候選miRNA的靶向性驗證
            3.4 RNA二級結(jié)構(gòu)分析
        4 討論
參考文獻
全文結(jié)論
創(chuàng)新點
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3171061