肌內(nèi)脂肪含量是影響豬肉品質(zhì)的重要因素。而育種過程中對高瘦肉率的長期選擇,導(dǎo)致了肌內(nèi)脂肪含量以及豬肉品質(zhì)的下降。因此,提高肌內(nèi)脂肪含量,同時不影響其它部位脂肪的沉積,特別是皮下脂肪,成為豬育種的一個重要目標(biāo)。由于不同部位的脂肪在脂肪代謝與脂肪細(xì)胞分化能力上存在著差異,這為尋找調(diào)控脂肪在不同組織差異沉積的分子機理提供了可能性。為了解肌內(nèi)脂肪與皮下脂肪差異沉積的機制,我們比較了源于皮下脂肪與肌內(nèi)脂肪的前體脂肪細(xì)胞的分化能力,并對脂肪分化與沉積起關(guān)鍵調(diào)控作用的PPARy基因在兩種細(xì)胞中的表達(dá)量進(jìn)行了檢測。隨后預(yù)測了靶向PPARy的miRNA,并對其在兩種細(xì)胞中的表達(dá)量進(jìn)行了比較,最后通過雙熒光報告系統(tǒng)對差異表達(dá)的miRNA進(jìn)行靶向性驗證。主要實驗結(jié)果如下：1、在體外環(huán)境下,源于肌內(nèi)脂肪組織的前體脂肪細(xì)胞在分化能力上強于皮下脂肪組織來源的前體脂肪細(xì)胞。DMI誘導(dǎo)分化9天后,肌內(nèi)前體脂肪細(xì)胞脂質(zhì)積聚水平顯著高于皮下脂肪細(xì)胞（P<0.05）。對兩種脂肪細(xì)胞中脂質(zhì)代謝相關(guān)基因進(jìn)行比較,結(jié)果表明,脂肪合成關(guān)鍵基因乙酰-CoA羧化酶（Acetyl-CoA Carboxylase, ACC）、脂肪酸合... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 肌內(nèi)脂肪的研究進(jìn)展
        1 肌內(nèi)脂肪
            1.1 肌內(nèi)脂肪的成分
            1.2 肌內(nèi)脂肪的分布與發(fā)生發(fā)展
            1.3 肌內(nèi)脂肪的沉積
        2 影響肌內(nèi)脂肪的基因調(diào)控
            2.1 影響脂肪沉寂的候選基因
            2.2 對肌內(nèi)脂肪沉積相關(guān)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的研究
        3 肌內(nèi)脂肪與其他部位脂肪的差異
    第二章 miRNA與脂肪沉積的研究進(jìn)展
        1 miRNA概述
        2 miRNA與siRNA的區(qū)別
        3 miRNA與脂肪沉積的調(diào)控
            3.1 miRNA與脂肪分化
            3.2 miRNA與脂肪能量代謝
            3.3 miRNA與肝臟脂類代謝
            3.4 miRNA與胰島素分泌
        4 miRNA與脂肪分布
第二篇 實驗部分
    第三章 皮下與肌內(nèi)脂肪細(xì)胞分化能力及PPARγ表達(dá)水平的差異研究
        1 實驗儀器與試劑
            1.1 主要儀器
            1.2 主要試劑
        2 實驗方法
            2.1 實驗動物及樣品采集
            2.2 前體脂肪細(xì)胞復(fù)蘇
            2.3 細(xì)胞的傳代培養(yǎng)與凍存
            2.4 前體脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化
            2.5 油紅O染色
            2.6 RNA提取
        3 實驗結(jié)果
            3.1 皮下脂肪前體細(xì)胞與肌內(nèi)脂肪前體細(xì)胞分化能力的比較
            3.2 PPAR7在成熟皮下脂肪細(xì)胞與肌內(nèi)脂肪細(xì)胞中表達(dá)的差異
        4 討論
    第四章 靶向PPAR7的miRNA鑒定及其在皮下與肌內(nèi)脂肪細(xì)胞中的差異表達(dá)
        1 實驗儀器與試劑
            1.1 主要儀器
            1.2 主要試劑
        2 實驗方法
            2.1 miRNA預(yù)測
            2.2 miRNA的RT-qPCR
            2.3 質(zhì)粒構(gòu)建
            2.4 miRNA靶向性驗證
            2.5 miRNA與PPARγ3'-UTR的二級結(jié)構(gòu)預(yù)測
            2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計
        3 實驗結(jié)果
            3.1 預(yù)測的靶向PPARγ的miRNA
            3.2 候選miRNA的篩選
            3.3 候選miRNA的靶向性驗證
            3.4 RNA二級結(jié)構(gòu)分析
        4 討論
參考文獻(xiàn)
全文結(jié)論
創(chuàng)新點
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3171061