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重組綿羊甘露聚糖結(jié)合凝集素(MBL)的制備及其對(duì)綿羊抗病效果的分析

發(fā)布時(shí)間:2021-04-29 22:53
  甘露聚糖結(jié)合凝集素(mannan-binding lectin, MBL)又稱作甘露糖結(jié)合凝集素(mannose-bindinglectin, MBL),在有機(jī)體天然免疫系統(tǒng)起著至關(guān)重要的作用,通過(guò)不依賴抗體的補(bǔ)體激活作用,該蛋白將有機(jī)體的補(bǔ)體系統(tǒng)啟動(dòng),繼而發(fā)揮免疫調(diào)理的作用,因此,它在抵抗病原體感染中具有重要作用。研究發(fā)現(xiàn)MBL生物學(xué)功能的實(shí)現(xiàn)有賴于其完整的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),MBL結(jié)構(gòu)基因突變影響了蛋白多聚體的功能性和穩(wěn)定性,使得MBL血清濃度明顯降低,機(jī)體的免疫防御和監(jiān)視能力削弱,導(dǎo)致機(jī)體對(duì)多種病原的易感。此外,由于綿羊支原體肺炎難于控制和消滅,并且在新疆較為嚴(yán)重。因此本研究以MBL和綿羊肺炎支原體(Mycoplasma Ovipneumoniae,MO)為研究對(duì)象進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn),以探究MBL與綿羊支原體肺炎及其他傳染性疾病的相關(guān)性,為今后研發(fā)治療綿羊支原體肺炎的藥物提供了理論依據(jù),研究結(jié)果如下:(1) ELISA檢測(cè)中國(guó)美利奴羊感染綿羊肺炎支原體的免疫應(yīng)答變化:選擇3只羔羊作為對(duì)照組,13只為實(shí)驗(yàn)組,在相同飼養(yǎng)條件下人工感染綿羊肺炎支原體,采集攻毒前1d、攻毒后1d、7d、14d、21... 

【文章來(lái)源】:石河子大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū) 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
主要符號(hào)表
引言
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 甘露聚糖結(jié)合凝集素的研究
        1.1.1 甘露聚糖結(jié)合凝集素的結(jié)構(gòu)
        1.1.2 甘露聚糖結(jié)合凝集素的生物功能
    1.2 重組蛋白藥物的研究
        1.2.1 重組干擾素的研究
        1.2.2 重組藍(lán)藻抗病毒蛋白-N 的研究
        1.2.3 重組白介素-2 的研究
        1.2.4 重組蛋白開(kāi)發(fā)新技術(shù)
    1.3 甘露糖結(jié)合凝集素與病原相關(guān)性研究
        1.3.1 MBL 與腫瘤關(guān)系的研究
        1.3.2 MBL 與自身免疫性疾病
        1.3.3 MBL 與綿羊支原體肺炎的研究
    1.4 研究目的及意義
第二章 不同個(gè)體感染綿羊肺炎支原體后免疫因子變化規(guī)律
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 主要試劑和儀器
        2.1.3 試驗(yàn)方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 血清中 TNF-α、IFN-γ、補(bǔ)體 C1、C3 檢測(cè)結(jié)果
    2.3 討論
    2.4 結(jié)論
第三章 人工感染綿羊肺炎支原體后綿羊甘露糖結(jié)合凝集素變化及組織病理學(xué)分析
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
        3.1.2 主要試劑和儀器
        3.1.3 試驗(yàn)方法
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 ELISA 標(biāo)準(zhǔn)曲線
        3.2.2 攻毒效果及臨床實(shí)驗(yàn)觀察結(jié)果
        3.2.3 組織病理學(xué)評(píng)分結(jié)果
        3.2.4 MBL 與 MO 關(guān)系的驗(yàn)證
    3.3 討論
    3.4 結(jié)論
第四章 重組、天然綿羊 MBL 的制備
    4.1 材料與方法
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.2.1 綿羊血清 MBL 的提取
        4.2.2 重組表達(dá)載體 pPIC9K-MBL 的雙酶切鑒定
        4.2.3 重組菌株 GS115/pPIC9K-MBL 的鑒定
        4.2.4 重組菌株 GS115/pPIC9K-MBL 表達(dá)產(chǎn)物的 SDS-PAGE 分析
    4.3 討論
    4.4 結(jié)論
第五章 MBL 在細(xì)胞、個(gè)體中對(duì)免疫因子水平的影響
    5.1 材料與方法
        5.1.1 試驗(yàn)材料
        5.1.2 試驗(yàn)方法
    5.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.2.1 感染 MO 的 16HBE 生長(zhǎng)情況
        5.2.2 MBL 對(duì) 16HBE 細(xì)胞分泌 TNF-α、IL-2 的影響
        5.2.3 MBL 對(duì)個(gè)體中 TNF-α、IL-2 水平的影響
    5.3 討論
    5.4 結(jié)論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄
作者簡(jiǎn)介
導(dǎo)師評(píng)閱表


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 占今舜,邢月騰,張彬.  飼料博覽. 2013(01)
[3]甘露聚糖結(jié)合凝集素與疾病相關(guān)性研究進(jìn)展[J]. 田群.  現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2012(24)
[4]綿羊支原體肺炎中不同甘露(聚)糖結(jié)合凝集素基因型對(duì)肺組織病變的影響[J]. 張慧,趙宗勝,趙鳳,余鵬.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2012(04)
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[6]山羊支原體山羊肺炎亞種湖北株的鑒定及其外膜蛋白的免疫原性研究[J]. 趙萍,郭晗,賀英,高鵬程,張念章,逯忠新.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2011(04)
[7]綿羊痘病的診治[J]. 韓杰.  中國(guó)畜禽種業(yè). 2011(04)
[8]熱毒寧對(duì)RSV感染人支氣管上皮細(xì)胞分泌TSLP的影響[J]. 藍(lán)丹,檀衛(wèi)平,陳環(huán),吳葆菁,麥賢弟,黃花榮.  中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版). 2011(02)
[9]藍(lán)藻抗病毒蛋白-N基因的克隆、表達(dá)、純化及活性鑒定[J]. 陳偉,韓波,錢垂文,劉秋英,熊盛.  生物工程學(xué)報(bào). 2010(04)
[10]重組白細(xì)胞介素2對(duì)固始雞空腸黏膜免疫增強(qiáng)作用的研究[J]. 趙珊珊,張懷,徐亞平,李超,肖傳斌.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2010(03)

博士論文
[1]綿羊甘露糖結(jié)合凝集素基因(MBL)與支原體肺炎的相關(guān)性研究[D]. 趙鳳.石河子大學(xué) 2011

碩士論文
[1]牛甘露聚糖結(jié)合凝集素遺傳特征的研究[D]. 李明濤.哈爾濱師范大學(xué) 2013
[2]綿羊肺炎支原體的分離鑒定及全基因組序列的測(cè)定和分析[D]. 郝瑞霞.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[3]遼西地區(qū)綿羊布魯氏菌病流行病學(xué)調(diào)查研究[D]. 于國(guó)慶.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2010



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