為研究不同濃度的芒硝對(duì)體外培養(yǎng)的驢皮成纖維細(xì)胞增殖、凋亡的影響,本試驗(yàn)采用組織塊法體外培養(yǎng)驢皮成纖維細(xì)胞,并用HE、Masson染色鑒定;再添加高（2 000、1 500μg/mL）、中（1 000、500、250μg/mL）和低濃度（100、50、10μg/mL）芒硝體外培養(yǎng)驢皮成纖維細(xì)胞,用MTT和Caspase-3法分別檢測(cè)成纖維細(xì)胞增殖率和凋亡率;最后用實(shí)時(shí)熒光定量PCR、ELISA法檢測(cè)不同濃度（1 500、250、10μg/mL）芒硝培養(yǎng)液中影響驢皮成纖維細(xì)胞膠原蛋白合成的相關(guān)基因表達(dá)量及蛋白濃度。結(jié)果顯示,培養(yǎng)5 d時(shí),驢皮成纖維細(xì)胞開始從組織塊邊緣爬出,25 d后長滿培養(yǎng)皿;HE染色呈典型的梭形,驢皮成纖維細(xì)胞中膠原纖維經(jīng)Masson染色呈藍(lán)色。中濃度芒硝培養(yǎng)液組成纖維細(xì)胞的增殖率顯著高于高、低濃度組（P<0.05）,相應(yīng)地,中濃度組的凋亡因子Caspase-3活性顯著低于其他兩組（P<0.05）。相比于24 h,芒硝作用于成纖維細(xì)胞48 h能顯著提高膠原蛋白合成相關(guān)基因的表達(dá)量（P<0.05）,250μg/mL濃度的效果最佳。綜合上述結(jié)果,組織塊培養(yǎng)... 

【文章來源】：中國畜牧獸醫(yī). 2020,47(07)北大核心

【文章頁數(shù)】：12 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
    1.2 主要試劑及儀器
    1.3 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.4 細(xì)胞鑒定
        1.4.1 細(xì)胞HE染色
        1.4.2 細(xì)胞Masson染色
    1.5 MTT法檢測(cè)不同濃度芒硝對(duì)成纖維細(xì)胞的影響
    1.6 Caspase-3法檢測(cè)不同濃度芒硝對(duì)成纖維細(xì)胞的影響
    1.7 實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)各基因mRNA的表達(dá)量
    1.8 ELISA法檢測(cè)各蛋白濃度
    1.9 數(shù)據(jù)分析
2 結(jié) 果
    2.1 細(xì)胞培養(yǎng)與鑒定
        2.1.1 組織塊法培養(yǎng)成纖維細(xì)胞
        2.1.2 成纖維細(xì)胞HE染色鑒定
        2.1.3 成纖維細(xì)胞Masson染色鑒定
    2.2 芒硝對(duì)成纖維細(xì)胞增殖、凋亡的影響
        2.2.1 成纖維細(xì)胞增殖率
        2.2.2 Caspase-3蛋白活性
    2.3 芒硝對(duì)成纖維細(xì)胞合成膠原蛋白相關(guān)基因表達(dá)的影響
        2.3.1 TGF-β1、Smad3及Smad7基因
        2.3.2 COL1A1、COL1A2及COL3A1基因
    2.4 芒硝對(duì)成纖維細(xì)胞TGF-β1、COL1A1、COL1A2蛋白濃度的影響
3 討 論
4 結(jié) 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]驢皮成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)研究[J]. 王艷萍,高帥,劉迥,曾維斌.  中國畜牧獸醫(yī). 2017(08)
[2]芒硝外敷治療腹膜透析患者皮下隧道感染的護(hù)理[J]. 王蕓,王赟.  中華護(hù)理雜志. 2013(11)
[3]SiRNA-Smad3沉默人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞中Smad3對(duì)纖維連接蛋白及Ⅰ型膠原表達(dá)的影響[J]. 劉波,果磊.  重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2010(04)
[4]人心房成纖維細(xì)胞體外組織塊貼壁培養(yǎng)與鑒定[J]. 張建成,黃宇堅(jiān).  莆田學(xué)院學(xué)報(bào). 2010(02)
[5]中藥芒硝外敷對(duì)腹部手術(shù)后患者胃腸功能恢復(fù)的影響[J]. 覃梅梅,盤雪瑩.  護(hù)理學(xué)報(bào). 2009(15)
[6]機(jī)械破碎法分離奶牛乳腺上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)研究[J]. 林桂娟,王恬,陳才勇.  畜牧與獸醫(yī). 2004(07)
[7]牛乳腺上皮細(xì)胞的分離培養(yǎng)[J]. 李震,王英,劉惠莉,張德福.  上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2000(03)

碩士論文
[1]芒硝外用在創(chuàng)面愈合中的作用及機(jī)制的研究[D]. 劉飛.西南醫(yī)科大學(xué) 2018
[2]芒硝溶液對(duì)于大鼠機(jī)械性皮損作用的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 劉莎.長春中醫(yī)藥大學(xué) 2015



本文編號(hào)：3161121