豬精子非常容易受到冷休克的傷害,并且對過氧化物損傷非常敏感,其原因是由于豬精子細(xì)胞膜上的磷脂質(zhì)含有大量不飽和脂肪酸,并且精液自身存在相對較低的抗氧化能力的結(jié)果,本研究主要目的是評價豬精液在低溫儲存期間,在豬精液中添加不同濃度的鴿蛋LDL,冷凍解凍后采用SDS-PAGE、Western Blot、PCR擴(kuò)增和DNA電泳等試驗(yàn)方法研究其對不同處理組豬精子活力的特性：平均曲線運(yùn)動速度（VCL）、平均直線運(yùn)動速度（VSL）、平均路徑運(yùn)動速度（VAP）、精子頂體完整性、熱應(yīng)激蛋白（HSP70）表達(dá)、抗凋亡基因（Bcl-21和Bcl-xl）以及促凋亡基因Bak表達(dá)的影響,得到以下結(jié)果：1、無論是冷休克還是快速冷凍解凍后,添加LDL組的精子活力特性：平均曲線運(yùn)動速度（VCL）、平均直線運(yùn)動速度（VSL）、平均路徑運(yùn)動速度（VAP）均高于未添加組,9%LDL冷休克組、9%LDL（-196℃）凍融精子組效果最好。2、用考馬斯亮藍(lán)染色法評價冷休克和凍融豬精子頂體完整性,結(jié)果顯示：9%LDL冷休克組、9%LDL（-196℃）凍融精子組頂體完整性分別好于其他組。3、對不同處理組樣本進(jìn)行10%SDS-PAGE和... 

【文章來源】：延邊大學(xué)吉林省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 豬精液冷凍保存研究進(jìn)展、技術(shù)意義及研究原理
    1.2 影響因素-豬精子細(xì)胞的特殊性
    1.3 HSP70研究進(jìn)展及意義
    1.4 HSP70的家族特征及功能
        1.4.1 HSP70的特征
        1.4.2 HSP70家族的功能
    1.5 相關(guān)凋亡基因表達(dá)的研究
        1.5.1 細(xì)胞凋亡定義及生物學(xué)意義
        1.5.2 促凋亡基因Bax參與凋亡的機(jī)制與Bcl-2之間關(guān)系
        1.5.3 影響B(tài)ax參與細(xì)胞凋亡的因素
        1.5.4 Bak基因功能與機(jī)制以及影響參與細(xì)胞凋亡因素
        1.5.5 Bcl-21和Bcl-xl基因相關(guān)研究
    1.6 LDL冷凍保護(hù)作用
    1.7 精子狀態(tài)的評定
    1.8 總灰度測量
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動物
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)藥品、試劑
        2.1.3 主要儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 主要藥品配置
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
    2.3 數(shù)據(jù)分析
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 不同處理對豬精子生物學(xué)性狀的影響
    3.2 頂體完整性評估
        3.2.1 凍融豬精子頂體完整性評估
        3.2.2 冷休克豬精子頂體完整性評估
    3.3 不同處理對凍融后豬精子HSP70蛋白SDS-PAGE凝膠電泳分析
    3.4 不同處理對HSP70蛋白表達(dá)量影響的Western blot分析
    3.5 抗凋亡基因Bcl-xl在不同處理組中PCR擴(kuò)增結(jié)果
    3.6 抗凋亡基因Bcl-21在不同處理組中PCR擴(kuò)增結(jié)果
    3.7 促凋亡基因Bak在不同處理組中PCR擴(kuò)增結(jié)果
第四章 討論
    4.1 溫度和鴿蛋LDL對豬精子生物學(xué)性狀的影響
    4.2 溫度和鴿蛋LDL對豬精子頂體完整性的影響
    4.3 溫度和鴿蛋LDL對HSP70表達(dá)的影響
    4.4 溫度和鴿蛋LDL對豬精子抗凋亡基因Bcl-21、Bcl-x1凋亡基因Bak基因表達(dá)的影響
第五章 結(jié)論
作者簡介
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]5種禽類卵黃低密度脂蛋白對豬精子冷凍效果的影響[J]. 呂瑞凱,胡建宏,王紅,程亮,江中良,李青旺,姚俊,張鵬飛.  西北農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2011(09)
[2]熱應(yīng)激對反芻動物HSP70表達(dá)影響的研究進(jìn)展[J]. 許嘯,李燕,齊智利.  中國奶牛. 2011(16)
[3]抗凋亡因子Bcl-2/Bcl-XL蛋白小分子抑制劑研究進(jìn)展[J]. 王汝冰,周珊珊,周文,李紹順.  中國藥物化學(xué)雜志. 2011(02)
[4]不同精液解凍液和解凍速率對豬顆粒凍精品質(zhì)的影響[J]. 潘紅梅,麻常勝,劉文,王可甜,陳主平,王金勇.  畜牧與獸醫(yī). 2010(09)
[5]羥基喜樹堿對人白血病K562細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J]. 邵淑麗,吳敏,武廣慧.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(09)
[6]Bcl-2家族和Bcl-xl對細(xì)胞凋亡調(diào)控的研究進(jìn)展[J]. 孫懷宇,王軍,王鵬.  中國煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志. 2009(04)
[7]海帶多糖在誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡機(jī)制方面的研究[J]. 王琪琳,桑青,曲愛琴.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(09)
[8]熱休克蛋白70（HSP70）研究進(jìn)展[J]. 程維杰,李秋玲,孫延鳴,王洪梅,李建斌,仲躋峰.  畜牧獸醫(yī)雜志. 2008(06)
[9]哺乳動物HSP70及其與精子發(fā)生相關(guān)關(guān)系研究進(jìn)展[J]. 李俊杰,桑潤滋,張國磊,趙駐軍,田樹軍.  中國畜牧雜志. 2008(19)
[10]凋亡抑制基因Bcl-xL的研究進(jìn)展[J]. 郭文娟,王愛英.  世界華人消化雜志. 2008(25)

博士論文
[1]LDL和多糖在豬精液冷凍保存中的作用研究[D]. 江中良.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2010
[2]豬精液冷凍保存研究[D]. 胡建宏.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2006

碩士論文
[1]豬精液冷凍保存的研究[D]. 周鑫.內(nèi)蒙古大學(xué) 2012
[2]松滋市養(yǎng)豬業(yè)現(xiàn)狀調(diào)查與發(fā)展戰(zhàn)略研究[D]. 陳雙勝.長江大學(xué) 2012
[3]熱應(yīng)激對鼠精液品質(zhì)的影響及其與HSP70相關(guān)性分析[D]. 楊柳.吉林大學(xué) 2009
[4]豬精液冷凍保存技術(shù)研究[D]. 張樹山.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2006



本文編號：3156528