豬精子非常容易受到冷休克的傷害,并且對(duì)過氧化物損傷非常敏感,其原因是由于豬精子細(xì)胞膜上的磷脂質(zhì)含有大量不飽和脂肪酸,并且精液自身存在相對(duì)較低的抗氧化能力的結(jié)果,本研究主要目的是評(píng)價(jià)豬精液在低溫儲(chǔ)存期間,在豬精液中添加不同濃度的鴿蛋LDL,冷凍解凍后采用SDS-PAGE、Western Blot、PCR擴(kuò)增和DNA電泳等試驗(yàn)方法研究其對(duì)不同處理組豬精子活力的特性：平均曲線運(yùn)動(dòng)速度（VCL）、平均直線運(yùn)動(dòng)速度（VSL）、平均路徑運(yùn)動(dòng)速度（VAP）、精子頂體完整性、熱應(yīng)激蛋白（HSP70）表達(dá)、抗凋亡基因（Bcl-21和Bcl-xl）以及促凋亡基因Bak表達(dá)的影響,得到以下結(jié)果：1、無論是冷休克還是快速冷凍解凍后,添加LDL組的精子活力特性：平均曲線運(yùn)動(dòng)速度（VCL）、平均直線運(yùn)動(dòng)速度（VSL）、平均路徑運(yùn)動(dòng)速度（VAP）均高于未添加組,9%LDL冷休克組、9%LDL（-196℃）凍融精子組效果最好。2、用考馬斯亮藍(lán)染色法評(píng)價(jià)冷休克和凍融豬精子頂體完整性,結(jié)果顯示：9%LDL冷休克組、9%LDL（-196℃）凍融精子組頂體完整性分別好于其他組。3、對(duì)不同處理組樣本進(jìn)行10%SDS-PAGE和... 

【文章來源】：延邊大學(xué)吉林省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 豬精液冷凍保存研究進(jìn)展、技術(shù)意義及研究原理
    1.2 影響因素-豬精子細(xì)胞的特殊性
    1.3 HSP70研究進(jìn)展及意義
    1.4 HSP70的家族特征及功能
        1.4.1 HSP70的特征
        1.4.2 HSP70家族的功能
    1.5 相關(guān)凋亡基因表達(dá)的研究
        1.5.1 細(xì)胞凋亡定義及生物學(xué)意義
        1.5.2 促凋亡基因Bax參與凋亡的機(jī)制與Bcl-2之間關(guān)系
        1.5.3 影響B(tài)ax參與細(xì)胞凋亡的因素
        1.5.4 Bak基因功能與機(jī)制以及影響參與細(xì)胞凋亡因素
        1.5.5 Bcl-21和Bcl-xl基因相關(guān)研究
    1.6 LDL冷凍保護(hù)作用
    1.7 精子狀態(tài)的評(píng)定
    1.8 總灰度測(cè)量
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)藥品、試劑
        2.1.3 主要儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 主要藥品配置
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
    2.3 數(shù)據(jù)分析
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 不同處理對(duì)豬精子生物學(xué)性狀的影響
    3.2 頂體完整性評(píng)估
        3.2.1 凍融豬精子頂體完整性評(píng)估
        3.2.2 冷休克豬精子頂體完整性評(píng)估
    3.3 不同處理對(duì)凍融后豬精子HSP70蛋白SDS-PAGE凝膠電泳分析
    3.4 不同處理對(duì)HSP70蛋白表達(dá)量影響的Western blot分析
    3.5 抗凋亡基因Bcl-xl在不同處理組中PCR擴(kuò)增結(jié)果
    3.6 抗凋亡基因Bcl-21在不同處理組中PCR擴(kuò)增結(jié)果
    3.7 促凋亡基因Bak在不同處理組中PCR擴(kuò)增結(jié)果
第四章 討論
    4.1 溫度和鴿蛋LDL對(duì)豬精子生物學(xué)性狀的影響
    4.2 溫度和鴿蛋LDL對(duì)豬精子頂體完整性的影響
    4.3 溫度和鴿蛋LDL對(duì)HSP70表達(dá)的影響
    4.4 溫度和鴿蛋LDL對(duì)豬精子抗凋亡基因Bcl-21、Bcl-x1凋亡基因Bak基因表達(dá)的影響
第五章 結(jié)論
作者簡(jiǎn)介
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]5種禽類卵黃低密度脂蛋白對(duì)豬精子冷凍效果的影響[J]. 呂瑞凱,胡建宏,王紅,程亮,江中良,李青旺,姚俊,張鵬飛.  西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2011(09)
[2]熱應(yīng)激對(duì)反芻動(dòng)物HSP70表達(dá)影響的研究進(jìn)展[J]. 許嘯,李燕,齊智利.  中國(guó)奶牛. 2011(16)
[3]抗凋亡因子Bcl-2/Bcl-XL蛋白小分子抑制劑研究進(jìn)展[J]. 王汝冰,周珊珊,周文,李紹順.  中國(guó)藥物化學(xué)雜志. 2011(02)
[4]不同精液解凍液和解凍速率對(duì)豬顆粒凍精品質(zhì)的影響[J]. 潘紅梅,麻常勝,劉文,王可甜,陳主平,王金勇.  畜牧與獸醫(yī). 2010(09)
[5]羥基喜樹堿對(duì)人白血病K562細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J]. 邵淑麗,吳敏,武廣慧.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(09)
[6]Bcl-2家族和Bcl-xl對(duì)細(xì)胞凋亡調(diào)控的研究進(jìn)展[J]. 孫懷宇,王軍,王鵬.  中國(guó)煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志. 2009(04)
[7]海帶多糖在誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡機(jī)制方面的研究[J]. 王琪琳,桑青,曲愛琴.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(09)
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[9]哺乳動(dòng)物HSP70及其與精子發(fā)生相關(guān)關(guān)系研究進(jìn)展[J]. 李俊杰,桑潤(rùn)滋,張國(guó)磊,趙駐軍,田樹軍.  中國(guó)畜牧雜志. 2008(19)
[10]凋亡抑制基因Bcl-xL的研究進(jìn)展[J]. 郭文娟,王愛英.  世界華人消化雜志. 2008(25)

博士論文
[1]LDL和多糖在豬精液冷凍保存中的作用研究[D]. 江中良.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2010
[2]豬精液冷凍保存研究[D]. 胡建宏.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2006

碩士論文
[1]豬精液冷凍保存的研究[D]. 周鑫.內(nèi)蒙古大學(xué) 2012
[2]松滋市養(yǎng)豬業(yè)現(xiàn)狀調(diào)查與發(fā)展戰(zhàn)略研究[D]. 陳雙勝.長(zhǎng)江大學(xué) 2012
[3]熱應(yīng)激對(duì)鼠精液品質(zhì)的影響及其與HSP70相關(guān)性分析[D]. 楊柳.吉林大學(xué) 2009
[4]豬精液冷凍保存技術(shù)研究[D]. 張樹山.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2006



本文編號(hào)：3156528