副豬嗜血桿菌（Haemophilus parasuis,HPS）屬于巴斯德菌科（Pasteurellaceae）嗜血桿菌屬（Haemophilus）。它是豬上呼吸道依附的共棲菌,在條件發(fā)生突變的情況下侵襲豬體,它主要表現(xiàn)為臟器的漿液性纖維素性胸膜炎、腦膜炎、心包炎和關(guān)節(jié)炎癥為特征的全身性細(xì)菌疾病。該病發(fā)病率和死亡率呈顯著上升趨勢,已經(jīng)成為全球養(yǎng)豬產(chǎn)業(yè)影響最為嚴(yán)重的細(xì)菌性傳染病之一,給我國的養(yǎng)豬業(yè)也造成慘重的經(jīng)濟(jì)損失。本試驗(yàn)主要研究如下：1.在16省、市的發(fā)病豬場收集疑似HPS病料樣品,共分離出168株HPS分離株,通過菌落和菌體形態(tài)、生化鑒定等試驗(yàn),都符合HPS病原特性,PCR檢測驗(yàn)證分離菌株為HPS菌株。表明副豬嗜血桿菌病原在我國豬場中普遍流行存在。2.將HPS分離株經(jīng)KRG血清分型和ERIC-PCR基因分型兩種方法分型,其中KRG血清分型結(jié)果4型的36株（21.43%）,5型的31株（18.45%）,13型32株（19.05%）,占總比例的58.93%,占有毒力血清型（強(qiáng)毒和中等毒力血清型）比例76.74%; ERIC-PCR基因分型結(jié)果ERIC-PCR指紋圖譜與標(biāo)準(zhǔn)菌株血清4型E... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 副豬嗜血桿菌的病原學(xué)
    1.2 副豬嗜血桿菌的毒力因子
        1.2.1 血清型與毒力關(guān)系
        1.2.2 主要潛在毒力因子研究
    1.3 副豬嗜血桿菌的流行病學(xué)
        1.3.1 副豬嗜血桿菌的分型方法
        1.3.2 流行病學(xué)
    1.4 副豬嗜血桿菌疫苗研究進(jìn)展
        1.4.1 副豬嗜血桿菌滅活疫苗
        1.4.2 活菌疫苗
        1.4.3 重組亞單位疫苗
        1.4.4 菌影疫苗
        1.4.5 其他新型疫苗
        1.4.6 疫苗佐劑
    1.5 研究的目的與意義
2 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 試驗(yàn)菌株來源
        2.1.2 主要培養(yǎng)基及其配制
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要儀器
        2.1.5 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 副豬嗜血桿菌的分離與鑒定
        2.2.2 副豬嗜血桿菌的KRG血清分型與ERIC-PCR基因分型
        2.2.3 副豬嗜血桿菌生物學(xué)特性研究
        2.2.4 副豬嗜血桿菌抗體微量板凝集試驗(yàn)方法的建立
        2.2.5 副豬嗜血桿菌血清流行病學(xué)監(jiān)測
        2.2.6 副豬嗜血桿菌滅活疫苗的研制
3 試驗(yàn)結(jié)果與分析
    3.1 副豬嗜血桿菌的分離與鑒定
        3.1.1 樣品采集
        3.1.2 細(xì)菌形態(tài)
        3.1.3 HPS分離菌株生化鑒定結(jié)果
        3.1.4 HPS分離株P(guān)CR鑒定結(jié)果
        3.1.5 菌株P(guān)CR擴(kuò)增片段測序
    3.2 副豬嗜血桿菌的KRG血清分型與ERIC-PCR基因分型
        3.2.1 副豬嗜血桿菌的KRG血清分型
        3.2.2 副豬嗜血桿菌的ERIC-PCR基因分型
    3.3 副豬嗜血桿菌生物學(xué)特性研究
        3.3.1 副豬嗜血桿菌生長曲線的測定
        3.3.2 副豬嗜血桿菌在不同條件下保存時(shí)間的測定
600值相關(guān)性曲線測定">        3.3.3 副豬嗜血桿菌活菌數(shù)與OD₆₀₀值相關(guān)性曲線測定
50)測定">        3.3.4 Balb/c小鼠半數(shù)致死量(LD₅₀)測定
    3.4 副豬嗜血桿菌抗體微量板凝集試驗(yàn)方法的建立
        3.4.1 抗原最適工作濃度的測定
        3.4.2 特異性試驗(yàn)
        3.4.3 重復(fù)性試驗(yàn)
    3.5 副豬嗜血桿菌血清流行病學(xué)監(jiān)測
        3.5.1 我國副豬嗜血桿菌病原學(xué)調(diào)查
        3.5.2 我國副豬嗜血桿菌血清型調(diào)查
    3.6 副豬嗜血桿菌三價(jià)滅活疫苗的研制
        3.6.1 疫苗候選菌株的篩選
        3.6.2 副豬嗜血桿菌滅活疫苗的實(shí)驗(yàn)室制備
        3.6.3 副豬嗜血桿菌滅活疫苗的安全性試驗(yàn)
        3.6.4 副豬嗜血桿菌不同佐劑滅活疫苗產(chǎn)生抗體效價(jià)比較
        3.6.5 副豬嗜血桿菌滅活疫苗攻毒保護(hù)試驗(yàn)
        3.6.6 母源抗體對仔豬的被動(dòng)保護(hù)試驗(yàn)
4 討論
    4.1 副豬嗜血桿菌的分離與鑒定
    4.2 副豬嗜血桿菌的KRG血清分型與ERIC指紋圖譜
    4.3 副豬嗜血桿菌生物學(xué)特性研究
        4.3.1 副豬嗜血桿菌的生長曲線
        4.3.2 副豬嗜血桿菌在不同環(huán)境下保存時(shí)間
        4.3.3 Balb/c小鼠半數(shù)致死量
    4.4 副豬嗜血桿菌抗體微量板凝集試驗(yàn)方法的建立
    4.5 副豬嗜血桿菌血清流行病學(xué)監(jiān)測
    4.6 副豬嗜血桿菌滅活疫苗的研制
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀碩士期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2012年我國部分省市規(guī)�；i場副豬嗜血桿菌分離鑒定及菌株血清分型[J]. 王建,邵衛(wèi)星,呂占軍,王超,董雅琴,劉爽,王博揚(yáng),吳發(fā)興,張志,劉自立,王佳,李曉成.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2014(03)
[2]副豬嗜血桿菌弱毒疫苗的研制[J]. 蘇丹萍,王文豪,章勝,張丹琳,張顯浩,陳瑞愛,賀東生.  中國畜牧獸醫(yī). 2012(11)
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[6]畜產(chǎn)品生產(chǎn)過程中獸藥殘留的危害及其控制措施[J]. 汪慧英.  中國動(dòng)物檢疫. 2011(10)
[7]副豬嗜血桿菌病研究進(jìn)展[J]. 司振書,王桂英.  中國畜牧獸醫(yī). 2011(06)
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博士論文
[1]副豬嗜血桿菌的分離鑒定及診斷方法與滅活疫苗的研究[D]. 蔡旭旺.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006

碩士論文
[1]副豬嗜血桿菌的分離鑒定及蜂膠疫苗的免疫保護(hù)效力研究[D]. 鐘霏.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[2]副豬嗜血桿菌菌影（Ghost）的制備及其免疫效力評價(jià)[D]. 胡明明.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2011



本文編號：3152422