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大豆球蛋白單抗制備和ELISA檢測(cè)試劑盒研究及其應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2021-04-16 12:19
  大豆?fàn)I養(yǎng)豐富,但是同時(shí)也含有多種抗?fàn)I養(yǎng)因子(antinutritional factors, ANFs),是人和動(dòng)物食品中一種重要的過(guò)敏原。大豆中含有的大豆球蛋白(glycinin)和p-伴大豆球蛋白(β-conglycinin)是最主要的大豆抗原蛋白。本試驗(yàn)建立了檢測(cè)大豆及大豆制品中大豆球蛋白的一種雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附方法(enzyme-link immunosorbent assay, ELISA)。研究分為三個(gè)試驗(yàn),試驗(yàn)一:用純化的大豆球蛋白分別免疫Balb/c小鼠和新西蘭白兔,制備了鼠抗大豆球蛋白單克隆抗體(monoclonal antibody, Mab)和兔抗大豆球蛋白多克隆抗體(polyclonal antibody, Pab)。經(jīng)間接法ELISA測(cè)定兔抗大豆球蛋白多克隆抗體滴度,在血清稀釋倍數(shù)為10,000時(shí)仍然為陽(yáng)性反應(yīng),這個(gè)滴度滿(mǎn)足試驗(yàn)的要求。通過(guò)與大豆中其它蛋白的交叉反應(yīng)試驗(yàn)表明,所制備的單克隆抗體6F2細(xì)胞株對(duì)大豆球蛋白有很高的特異性。經(jīng)間接法ELISA和Western blotting等方法鑒定鼠抗大豆球蛋白單克隆抗體,結(jié)果表明Mab6F2能識(shí)別大豆球蛋白的酸... 

【文章來(lái)源】:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 研究目的和意義
    1.2 國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀
    1.3 研究?jī)?nèi)容和方法
第二章 試驗(yàn)研究
    試驗(yàn)一 抗大豆球蛋白單克隆和多克隆抗體制備和鑒定
        摘要
        2.1.1 前言
        2.1.2 材料與方法
        2.1.3 結(jié)果與討論
        2.1.4 小結(jié)
    試驗(yàn)二 雙抗夾心ELISA檢測(cè)大豆球蛋白方法的建立
        摘要
        2.2.1 前言
        2.2.2 材料與方法
        2.2.3 結(jié)果與討論
        2.2.4 小結(jié)
    試驗(yàn)三 大豆種質(zhì)、大豆加工和深加工產(chǎn)品的檢測(cè)
        摘要
        2.3.1 前言
        2.3.2 材料與方法
        2.3.3 結(jié)果與討論
        2.3.4 小結(jié)
第三章 結(jié)論與建議
    3.1 本研究的主要結(jié)論
    3.2 本研究的創(chuàng)新點(diǎn)
    3.3 有待進(jìn)一步研究的問(wèn)腰
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]大豆凝集素在模擬豬胃腸環(huán)境中的穩(wěn)定性研究[J]. 王利民,張亮亮,王彬,秦貴信.  吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2009(04)
[2]間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)大豆11S球蛋白和7S伴球蛋白[J]. 彭楠,劉建峰,梁運(yùn)祥,葛向陽(yáng).  華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2007(05)
[3]大豆抗原蛋白的研究進(jìn)展[J]. 劉欣,馮杰.  中國(guó)飼料. 2004(20)
[4]大豆種子貯藏蛋白11S與7S組份的研究[J]. 王麗俠,郭順堂,付翠真,關(guān)榮霞,張其屬,常汝鎮(zhèn),邱麗娟.  中國(guó)糧油學(xué)報(bào). 2004(04)
[5]大豆種子貯藏蛋白11S和7S組分的研究[J]. 黃麗華,麻浩,王顯生,崔國(guó)賢.  中國(guó)油料作物學(xué)報(bào). 2003(03)
[6]大豆蛋白質(zhì)的構(gòu)造和功能特性(上)[J]. 趙威祺.  糧食與食品工業(yè). 2003(02)
[7]大豆胰蛋白酶抑制因子酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定方法的研究[J]. 張國(guó)龍,李德發(fā).  動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 1997(01)
[8]日糧抗原與早期斷奶仔豬腹瀉的關(guān)系[J]. 陳代文.  國(guó)外畜牧科技. 1994(01)

碩士論文
[1]雙抗體夾心ELISA檢測(cè)大豆11S球蛋白方法的建立[D]. 韓景華.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[2]大豆抗原在仔豬小腸組織中分布規(guī)律的研究[D]. 鮑男.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



本文編號(hào):3141415

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