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豬肺炎支原體的分離鑒定及其主要抗原蛋白基因的克隆與序列分析

發(fā)布時(shí)間:2021-04-14 03:47
  豬肺炎支原體(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)是豬支原體肺炎(Mycoplasmalpneumonia of swine, MPS)的主要病原體,也是豬呼吸道病綜合征(Porcine RespiratoryDisease Complex,PRDC)的主要原發(fā)性病原之一。MPS廣泛存在于世界各地,主要危害是引起豬咳嗽、喘氣、生長(zhǎng)受阻和飼料轉(zhuǎn)化率大幅下降,嚴(yán)重影響?zhàn)B豬業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益。為了進(jìn)一步了解Mhp在廣東的流行及主要抗原蛋白的變異情況,本研究從屠宰豬肺組織分離鑒定了一株Mhp,并觀察其培養(yǎng)特性、致病性、抗菌藥物敏感性。同時(shí)克隆分離株主要抗原蛋白基因P46、P65蛋白C末端和P97蛋白R(shí)1R2區(qū)編碼序列,與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)株核苷酸序列和推導(dǎo)的氨基酸序列進(jìn)行同源性比較,分析P46、P65和P97的抗原指數(shù)。研究結(jié)果報(bào)告如下。(1)本研究從100多份屠宰肺組織樣品中分離到一株疑似Mhp,通過(guò)菌株的培養(yǎng)特性、形態(tài)觀察、生化試驗(yàn)、血清學(xué)鑒定和P46基因序列分析證實(shí)該分離株為Mhp,命名為GDZJ01。(2)將分離菌株GDZJ01分別接種到牛心湯培養(yǎng)基、改良KM2培養(yǎng)基和改良Hay... 

【文章來(lái)源】:廣東海洋大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】:62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

豬肺炎支原體的分離鑒定及其主要抗原蛋白基因的克隆與序列分析


圖2-1分離菌的菌落形態(tài)(A)(×400)

菌體形態(tài),瑞氏染色,菌體形態(tài),豬肺炎支原體


圖 2-2 瑞氏染色的菌體形態(tài)(B)(×1000)Fig.2-2 Morphology of the isolate stained by Wight’s dye(×1000)驗(yàn)與血清學(xué)鑒定對(duì)毛地黃皂苷敏感,可以發(fā)酵葡萄糖,水解尿素、七葉苷和甘,TTC 還原試驗(yàn)、膜和斑形成試驗(yàn)均為陰性,與豬肺炎支原體性一致;血清生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)陽(yáng)性,提示豬肺炎支原體抗血清能24 mm。上述結(jié)果證實(shí),所分離菌株為豬肺炎支原體,命名定 PCR 反應(yīng)的產(chǎn)物通過(guò) 1%瓊脂糖凝膠電泳后,在凝膠成像系80bp、1200bp 和 290bp 大小的明亮特異條帶,均與預(yù)期片段示。

菌體形態(tài),生長(zhǎng)抑制試驗(yàn),豬肺炎支原體,瑞氏染色


圖 2-2 瑞氏染色的菌體形態(tài)(B)(×1000)2 Morphology of the isolate stained by Wight’s d學(xué)鑒定皂苷敏感,可以發(fā)酵葡萄糖,水解尿素、七原試驗(yàn)、膜和斑形成試驗(yàn)均為陰性,與豬肺清生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)陽(yáng)性,提示豬肺炎支原體上述結(jié)果證實(shí),所分離菌株為豬肺炎支原應(yīng)的產(chǎn)物通過(guò) 1%瓊脂糖凝膠電泳后,在凝200bp 和 290bp 大小的明亮特異條帶,均與

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]豬肺炎支原體HNMhy1株免疫原性基因的鑒定與分析[J]. 徐引弟,張青嫻,王治方,焦文強(qiáng),李海利,朱文豪,王克領(lǐng).  河南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2020(09)



本文編號(hào):3136595

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