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2型豬鏈球菌β-半乳糖苷酶功能的初步研究

發(fā)布時間:2021-04-10 01:40
  豬鏈球菌(Streptococcus suis, S.suis)是一種重要的人獸共患病病原菌,根據(jù)其表面莢膜多糖(Capsular polysaccharide, CPS)的抗原性,可以分為1-31、33和1/2共33個血清型,其中2型豬鏈球菌(Streptococcus suis serotype2, S.suis2)是毒力最強、臨床檢出率最高的血清型。近年來多次出現(xiàn)S.suis2感染人事件,引起業(yè)界人士的高度關(guān)注。尤其值得關(guān)注的是,近年在我國江蘇“蘇中”地區(qū)和四川資陽等市縣豬養(yǎng)殖業(yè)從業(yè)人群中曾先后兩次暴發(fā)了大規(guī)模的S.suis2感染人的事件,人感染病例中出現(xiàn)高比例的、國內(nèi)外罕見的鏈球菌中毒性休克綜合癥(Streptococcus toxic shock syndrome, STSS),該型病癥可致高病死率(達80%以上)。長期以來,細菌表面蛋白一直都被視為重要的致病相關(guān)因子而引起廣泛研究。細菌表面蛋白外切糖苷酶是病原菌侵襲宿主的識別受體,同時也是細菌感染與定植宿主細胞的一種重要的酶。本課題組前期完成了S.suis2強毒株05ZYH33(分離自STSS病人)的全基因組測序,并對基因組... 

【文章來源】:南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】:96 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

2型豬鏈球菌β-半乳糖苷酶功能的初步研究


AbgaC基因的PCR擴增

重組蛋白,免疫印跡,蛋白


圖2-4 BgaC重組蛋白的免疫印跡Fig 2-4 Western blot of the recombinant Bga1:蛋白Marker, 2:純化后的BgaC重組蛋1 :Protein Marker; 2:Recombinant BgaC protei

免疫電鏡,表面


顆粒的定位,而加入免疫前鼠血清的陰性對照組表面則未觀察到膠體金顆粒點附。提示BgaC位于細菌表面(圖3-8)。I iiiHF..‘. Hr ' fcA B圖3-8免疫電鏡分析BgaC表面定位Fig 3-8 Immunogold labeling and transmission electron microscopy of BgaC proteinstructures on the cell surface of S,suis 2注:A:經(jīng)免疫前血清處理的組;B:經(jīng)anti-BgaC多抗血清處理的S.sw/^s 2組3.2.5流式細胞術(shù)分析通過流式細胞儀技術(shù)檢測到BgaC存在于2的細胞表面(圖3-9)。流式數(shù)據(jù)顯示用鼠抗BgaC作為一抗處理的實驗組平均焚光強度(MFI)顯著高于用免疫前鼠血清處理旳陰性對照組,在流式結(jié)果圖中明顯可以看出峰的右移(圖3-9)。經(jīng)過統(tǒng)計學(xué)分析表明BgaC存在于2細菌表面(圖3-10)。34

【參考文獻】:
期刊論文
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[2]耐熱β-半乳糖苷酶基因在大腸桿菌中的表達及酶學(xué)性質(zhì)研究[J]. 龔月生,劉錦妮,王晶,楊明明,袁新宇.  西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2008(10)
[3]來源于嗜熱古細菌Pyrococcus furiosus乳糖酶基因的原核表達及酶學(xué)性質(zhì)分析[J]. 段文娟,楊嬌艷,李卓夫,張偉,張志芳.  中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報. 2008(02)
[4]產(chǎn)低溫β-半乳糖苷酶菌株的篩選及其酶學(xué)性質(zhì)研究[J]. 史應(yīng)武,婁愷,,|,歐提庫爾.  食品科學(xué). 2007(11)
[5]環(huán)境條件對豬鏈球菌2型電轉(zhuǎn)化效率的影響[J]. 李明,胡福泉,王長軍,鄭峰,董亞青,潘秀珍,唐家琪.  中國人獸共患病學(xué)報. 2007(08)
[6]嗜熱脂肪芽孢桿菌β-半乳糖苷酶的性質(zhì)[J]. 魏東芝,陳少欣,王筱蘭,袁勤生,俞俊棠.  微生物學(xué)通報. 2001(01)

博士論文
[1]Rgg轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子對高致病性2型豬鏈球菌毒力與代謝的調(diào)控研究[D]. 鄭峰.第三軍醫(yī)大學(xué) 2011

碩士論文
[1]半乳糖激酶和半乳糖異構(gòu)酶的生物化學(xué)研究[D]. 王雷.山東大學(xué) 2010
[2]纖維單胞菌Cellulomonas sp.中性β-半乳糖苷酶新基因的克隆、表達及酶學(xué)性質(zhì)分析[D]. 段文娟.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2008



本文編號:3128705

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