冷凍保存應(yīng)激對牛MⅡ期卵母細(xì)胞表觀遺傳及其發(fā)育的影響
發(fā)布時(shí)間:2021-04-08 08:44
卵母細(xì)胞是哺乳動物種質(zhì)資源的重要組成部分。卵的體外培養(yǎng)和操作已經(jīng)廣泛應(yīng)用于體細(xì)胞核移植和臨床不孕不育癥的治療、卵子成熟和早期胚胎發(fā)育機(jī)理等方面的研究中。卵母細(xì)胞的冷凍保存可使其不受時(shí)間和條件的限制,能夠隨時(shí)隨地為生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因克隆動物、人的體外受精和單精子注射等提供足夠的卵母細(xì)胞,因此對人的輔助生殖、優(yōu)良家畜種質(zhì)資源的保存以及瀕危物種保護(hù)等具有重要意義。表觀遺傳修飾是卵和早期胚胎發(fā)育過程中的重要的重編程事件,它對擦除表觀記憶和胚胎多能性的獲得至關(guān)重要。表觀遺傳修飾易受環(huán)境因素改變的影響,冷凍作為一種強(qiáng)烈的物理刺激,很可能會影響表觀修飾穩(wěn)定,從而干擾正常的胚胎發(fā)育。表觀遺傳修飾主要包括DNA甲基化、組蛋白修飾和基因組印跡等。本研究采用Cryotop玻璃化冷凍的方法,對牛MⅡ期的卵母細(xì)胞進(jìn)行冷凍,檢測了冷凍對卵及其早期胚胎表觀遺傳修飾的影響,同時(shí)從冷凍復(fù)蘇后卵的恢復(fù)時(shí)間、激活條件以及采用抗氧化處理等方面進(jìn)行探索,旨在提高卵母細(xì)胞的冷凍效率和發(fā)育潛能。本研究通過分析冷凍后卵和胚胎在DNA甲基化、組蛋白修飾、印跡基因表達(dá)等方面存在的異常,評估了冷凍對表觀遺傳修飾產(chǎn)生的影響。同時(shí)通過引入冷凍復(fù)蘇后卵...
【文章來源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:65 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
卵母細(xì)胞冷凍對卵和胚胎中H3K9me3的影響,上標(biāo)中含有不同字母表示差異顯著(P<0.05)
卵母細(xì)胞冷凍對囊胚中印跡基因表達(dá)的影響,上標(biāo)中含有不同字母的表示差異顯3-4 Effects of oocyte cryopreservation on expression of imprinted genes in preimplantaValues with different letters differ significantly (P <0.05).論母細(xì)胞向胚胎過渡,以及早期胚胎發(fā)育過程中,基因組的表觀修飾將發(fā),以激活合子基因組和建立胚胎的基因表達(dá)模式,保證胚胎的后期發(fā)育觀重編程由一系列的酶和信號通路完成,任一環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題都會破壞其程。冷凍作為一種強(qiáng)烈的外界環(huán)境應(yīng)激,可能會通過影響和改變卵母細(xì)路和卵內(nèi)儲存的母源因子等,干擾卵母細(xì)胞和胚胎正常的表觀重編程N(yùn)A 甲基化是哺乳動物基因組表觀遺傳修飾的重要組成部分。CpG 二核的 5’ 甲基化是一種重要的 DNA 表觀修飾(Robertson and Wolffe 2000甲基化在轉(zhuǎn)錄調(diào)控上發(fā)揮重要作用,比如 X 染色體失活、基因組印記和
圖 4-1 卵母細(xì)胞冷凍對囊胚細(xì)胞數(shù)和凋亡的影e 4-1 Effect of oocyte cryopreservation on cell numbers and ap凍對囊胚凋亡的影響,B:冷凍對囊胚細(xì)胞數(shù)的影響,C:f cryopreservation on blastocyst apoptosis, B: Effect of cryopreblastocysts, C: Apoptotic cell numbers in blastocy表 4-3 卵母細(xì)胞冷凍對囊胚細(xì)胞數(shù)的影響Table 4-3 Effect of oocyte cryopreservation on cell numbers單個囊胚的總細(xì)胞數(shù)(Total)滋養(yǎng)層(TE)細(xì)胞數(shù)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(ICM)細(xì)胞數(shù)內(nèi)數(shù),96.0±3.5a73.8±4.5a22.5±1.7a74.5±4.0b58.4±4.6b16.4±2.0b不同上角標(biāo)表示差異顯著(P <0.05)lumn, values without a common superscript differed (P <0.05)
本文編號:3125244
【文章來源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:65 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
卵母細(xì)胞冷凍對卵和胚胎中H3K9me3的影響,上標(biāo)中含有不同字母表示差異顯著(P<0.05)
卵母細(xì)胞冷凍對囊胚中印跡基因表達(dá)的影響,上標(biāo)中含有不同字母的表示差異顯3-4 Effects of oocyte cryopreservation on expression of imprinted genes in preimplantaValues with different letters differ significantly (P <0.05).論母細(xì)胞向胚胎過渡,以及早期胚胎發(fā)育過程中,基因組的表觀修飾將發(fā),以激活合子基因組和建立胚胎的基因表達(dá)模式,保證胚胎的后期發(fā)育觀重編程由一系列的酶和信號通路完成,任一環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題都會破壞其程。冷凍作為一種強(qiáng)烈的外界環(huán)境應(yīng)激,可能會通過影響和改變卵母細(xì)路和卵內(nèi)儲存的母源因子等,干擾卵母細(xì)胞和胚胎正常的表觀重編程N(yùn)A 甲基化是哺乳動物基因組表觀遺傳修飾的重要組成部分。CpG 二核的 5’ 甲基化是一種重要的 DNA 表觀修飾(Robertson and Wolffe 2000甲基化在轉(zhuǎn)錄調(diào)控上發(fā)揮重要作用,比如 X 染色體失活、基因組印記和
圖 4-1 卵母細(xì)胞冷凍對囊胚細(xì)胞數(shù)和凋亡的影e 4-1 Effect of oocyte cryopreservation on cell numbers and ap凍對囊胚凋亡的影響,B:冷凍對囊胚細(xì)胞數(shù)的影響,C:f cryopreservation on blastocyst apoptosis, B: Effect of cryopreblastocysts, C: Apoptotic cell numbers in blastocy表 4-3 卵母細(xì)胞冷凍對囊胚細(xì)胞數(shù)的影響Table 4-3 Effect of oocyte cryopreservation on cell numbers單個囊胚的總細(xì)胞數(shù)(Total)滋養(yǎng)層(TE)細(xì)胞數(shù)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(ICM)細(xì)胞數(shù)內(nèi)數(shù),96.0±3.5a73.8±4.5a22.5±1.7a74.5±4.0b58.4±4.6b16.4±2.0b不同上角標(biāo)表示差異顯著(P <0.05)lumn, values without a common superscript differed (P <0.05)
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